邻位配体检测，用于定位 DNA 损伤位点的蛋白质

DNA 损伤反应是一种维持基因组稳定性和完整性的细胞系统。这个过程中的功能障碍会导致多种疾病，例如癌症、与年龄相关的疾病和慢性炎症。我们的目标是确定在此过程中合作的蛋白质，从而确定治疗整合的替代靶点。

为了表征蛋白质参与 DNA 损伤反应的情况，通常使用 H2AX 组蛋白（DNA 损伤的标志物）的磷酸化形式进行免疫荧光研究。此外，可以在 DNA 损伤后进行蛋白质收集测定，例如免疫共沉淀，以确定蛋白质在信号传导中的作用。相互作用研究通常基于免疫沉淀测定，但这些是在体外进行的，不能提供有关相互作用位置的信息。

免疫荧光可以提供有关蛋白质细胞定位的信息，但证明相互作用可能很困难，并且取决于显微镜的分辨率。我们在这里表明，将邻位配体测定与 Gamma-H2AX 染色相结合的简单方案可以对 DNA 损伤背景下蛋白质相互作用的空间和时间表征。此外，我们还提供了一个用户友好的宏用于数据分析。