首先，从零下 80 摄氏度的冰箱中取出 FN-silk 小瓶，然后将它们放入干冰中运输。将样品瓶带到生物安全柜中，并将它们放在微量离心管架中。解冻后，将 550 微升丝溶液移液到 48 孔板的每第二个孔中。
将盖子放在板上，然后将其放入无菌盒中。小心地将盒子从生物安全柜中转移出来，并在环境条件下放置过夜。第二天，将装有带有 FN 丝膜和无菌插入物的板的盒子带入生物安全柜。
小心地从盒子中取出板，打开板盖，通过观察孔中的混浊来目视验证膜的形成。使用无菌镊子，拿起一个插件并将其向下引导到膜上，直到手柄接触孔的顶部。放下所有插件后，将盖子放在板上，然后将板放回无菌盒中。
让膜粘附在插入物上 2 小时。接下来，从盒子中取出板子并打开盖子。使用无菌镊子，从孔中取出插入物。
用 100 微升 DMEM/F12 填充插入物进行基础接种，或 200 微升用于根尖接种。将插入物转移到 24 孔板的空孔中，并用 1 毫升 DMEM/F12 填充孔中。在收获所需数量的人角质形成细胞后，使用 P200 移液器吸出 20 至 50 微升细胞悬液。
将移液器吸头对准膜的中心，然后缓慢按下移液器柱塞，使液滴与插件内的培养基接触。转移完所有膜后，以 8 字形移动板，使细胞均匀分布在膜上。在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育培养物。
使用镊子将插入物从 24 孔板中取出，将培养基留在孔中。然后倒置插入物，使基部朝上。将倒置的插件放入培养皿中。
用 P200 移液器吸出 20 微升重悬的人角质形成细胞悬液。将移液器吸头对准膜的中心，然后缓慢按下移液器柱塞，形成落在膜上的液滴。将盖子盖在培养皿上。
将培养皿和含培养基的 24 孔板转移至培养箱中 30 分钟。孵育后，将 24 孔板和培养皿放入生物安全柜中。使用镊子，选择一个插入物并将其倒置，使膜的顶端朝上，基底朝下。
使用 P200 移液器，在插件内添加 200 微升培养基。将插件放回 24 孔板的预装孔中。在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下培养插入物。
在 FN 丝膜上培养的角质形成细胞均匀地覆盖表面，并在第一天显示出鹅卵石形态。角质形成细胞在第 3 天形成汇合层，表明上皮功能，并形成紧密连接网络，表明它们承担生理上皮功能。三天后，在 FN 丝膜上观察到高细胞活力，中心和外围之间的活力没有显着差异。
FN-silk 膜系统支持的角质形成细胞活力与商业 PET 膜系统相似或更好。
