分离和处理用于小鼠视网膜神经节细胞免疫染色的全支架视网膜

使用颈椎脱位进行眼球摘除术和眼球加工对小鼠实施安乐死后，使用蓝色记号笔在眼球背侧标记角膜边缘，以确保解剖过程中的方向。使用剪刀去除附着在眼球上的残留肌肉组织。然后将去核的眼球转移到装有 PBS 的 2 毫升圆底微量离心管中。

现在，将眼球放入另一支含有新鲜制备的 4% 多聚甲醛的 2 毫升管中，在 4 摄氏度下固定 10 分钟。在解剖显微镜下，用细镊子在角膜上做一个小切口。将眼球放回固定剂中，并在 4 摄氏度下孵育 3 小时，以保持组织形态。

为了去除角膜和晶状体，使用精细的手术剪刀在角膜缘（角膜和巩膜之间的边界）周围做一个大约 1 毫米的小切口。小心地切开角膜的圆周，将其完全切除以露出底层结构。接下来，使用细镊子轻轻抓住并小心地从周围组织中提起晶状体，以免损坏视网膜。

对于巩膜切口，用细眼剪刀在巩膜上切一个精确的缝隙，以方便后续解剖。接下来，为了分离视网膜，将带齿的镊子插入巩膜和视网膜之间的切口中。轻轻抓住巩膜的边缘，避免用力过大，以防止撕裂组织。

通过沿巩膜和视网膜之间的边界移动镊子来逐渐扩大切口。使用镊子的牙齿部分小心地将巩膜与视网膜分开，不要损坏它。现在，使用锋利的剪刀将视网膜分成四个大小大致相等的皮瓣。

用软毛刷轻轻展开解剖的视网膜，并仔细去除其表面的碎屑。