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01:26 min
February 23rd, 2024
DOI :
10.3791/202519-v
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首先,取固定在多聚甲醛中的细菌细胞。将细胞以 14, 000 x g 离心 10 分钟。然后去除上清液。
将沉淀重悬于 100 μL 96% 分析级乙醇中,并在室温下孵育 1 分钟。重复离心 5 分钟,然后去除乙醇并风干细胞沉淀。现在,将细胞在含有荧光标记的寡核苷酸的溶液中,在 46 °C 至摄氏度下杂交 3 小时。
杂交后,立即将样品放入预热至 46 °C 的转子中,在最高允许温度下离心 15 分钟。然后在 48 °C 下在适当严格的缓冲液中洗涤样品 15 分钟。离心样品后,再次用 500 μL 冰冷的 PBS 洗涤细胞。
将它们重悬于 20 微升 PBS 中,并储存在 4 摄氏度直至进一步使用。
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