我们感谢党邵族博士和她的实验室成员的协同努力利用其成像和显微设备。我们也感谢Biorepository和组织研究基金（BTRF）核心，杰夫·哈珀，居民在弗吉尼亚大学为我们提供子宫组织。我们感谢卡罗尔Szlachta的帮助示意图。

在这个手稿中使用子宫切除标本的和谐与编号IRB-HSR＃14424一个大学IRB批准的道德协议。 1，从临床来源样品采集<ol><li>开始前获得政府和机构为基础的道德准则和批准文件。 </li><li>开展在无菌条件下的所有步骤。 </li><li>在50ml管中保存患者来源组织中的介质（RPMI或DMEM /高糖）中在4℃下，如果样品不能在培养立即处理。样本可以被存储在该状态下，最多24小时。 </li><li>用1X无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗组织样品3次，弃洗涤液之间的溶液。 </li></ol> 2，制备用刮法原代细胞系<ol><li>加4-10毫升的生长培养基（RPMI或DMEM /高糖补充有10％胎牛血清和1％青霉素 - 链霉菌霉素），以组织并添加两性霉素（0.25μg/ ml的终浓度）处理30分钟。 </li><li>弃去生长培养基。 </li><li>用1X PBS洗两次组织。 </li><li>上放置一个6cm细胞培养板的组织肌层和内膜层（参见图2A-2C详细说明）之间进行区分。分开的子宫内膜。 </li><li>用手术刀或刀片，横切组织切成小块，而搔抓到6厘米细胞培养皿。这些划痕促进新兴初级子宫内膜细胞的附着。相比于胰蛋白酶的方法，更多的组织是必要的（参见图2D为近似值）。 </li><li>轻轻地，加入2ml生长介质，以抓菜（组织碎片将是可见的，并从抓运动非常固定的）。 </li><li>该板件（次）转移到指定细胞培养孵化器中（37℃和5％CO 2）。指定用于原代细胞系的地方，远离OTH呃细胞培养皿。原代培养物是对感染和污染更敏感。 </li><li>日常的检查在光学显微镜下的细胞。细胞小群体应该通过两天或三个来自各地的组织切片出现（见图3B）。 </li><li>为了保持文化，用1X PBS轻轻地洗，并添加新鲜培养基（2毫升），每三天。当细胞增殖速率的增加，额外的生长培养基（3-4毫升）可以被添加到该6厘米培养板（次）。 注意：在洗涤和媒体的变化，组织碎片将有可能被吸出。这不会影响粘附细胞的生长。组织块应该由后续步骤（2.10）被吸入作为新的殖民地不大可能一周后出现。 </li><li>当6厘米板是约75 -用0.05％胰蛋白酶80％汇合（见图3B），通道。原代细胞不能无限期传 - 定格下来的细胞中的一块板，只要两三个板块是马intained。如果有更多的通道是必需的，遵循一个永生化协议（参考文献3审阅）。 </li></ol> 3，制备使用胰蛋白酶的方法原代细胞系<ol><li>放置一小块子宫内膜组织（参见图2D为近似值）在2毫升0.25％胰蛋白酶的补充有卡那霉素（0.03毫克/毫升的最终浓度）。 </li><li>组织培养在37℃的旋转平台上30分钟。 </li><li>短暂涡旋振荡组织。 </li><li>离心样品在200-400×g离心2分钟，弃去上清液。 </li><li>加入新鲜的胰蛋白酶和卡那霉素。 </li><li>孵育所述组织在37℃，在旋转的同时对一个小时。 </li><li> VORTEX组织为5-10秒。 </li><li>加生长培养基（补充有10％胎牛血清和1％青霉素 - 链霉素）2ml的去激活胰蛋白酶。 </li><li>离心机的细胞在200-400 XG为2-3分钟。 </li><li>弃上清，加入2ml成长日媒体到沉淀的细胞。 </li><li>板放置一个6cm细胞培养皿。刮痧板如准备原代细胞系用刮法步骤2.5是没有必要的，但提高原代培养的依恋和生长。 </li><li>每日监控在光学显微镜下的细胞。细胞通常可见在光学显微镜下24-48小时之后（参见图3C）。 </li><li>为了保持文化，监测细胞和改变介质每2-3天，如步骤2.9。 </li><li>到通道的细胞，用0.05％或0.25％的胰蛋白酶，当细胞达到75-80％汇合（见图3C）。 </li></ol> 4，节省额外的组织的分析（快速冷冻和福尔马林固定） <ol><li>用1X PBS洗两次采样。 </li><li>吸尽可能多的液体越好。 </li><li>对于快速冷冻，将子宫内膜组织样本中1.7离心管（见图2F和2G）。将1.7离心管中的液体氮，持续10秒或直到它可以看出，在组织已经冻结了。 注：样品制备时要小心，不要直接接触液态氮。样品可以贮存于-80℃直到进一步的处理或分析。 </li><li>对于福尔马林固定，剪一小块子宫内膜组织（见图2H），并淹没在10％缓冲福尔马林锌。 24小时后，弃去福尔马林，并添加70％的乙醇，以组织样品直到进一步处理。 </li></ol> 5，免疫荧光（IF） <ol><li>细胞固定<ol><li>准备在培养片或板单元。 </li><li>轻轻地，洗涤细胞用1X PBS。 </li><li> 5分钟加预冷（4℃）甲醇和丙酮（混合比例为1:1）。 </li><li>继续操作之前，空气干燥的幻灯片。幻灯片可以被存储在4℃下持续1-2周，如果需要。 </li></ol></li><li>中频处理<ol><li>水化细胞用1X PBS 10分钟。对于FOllowing步骤1-6，进行一个旋转平台上的所有清洗和孵化。 </li><li>使用1X PBS块补充有1％牛血清白蛋白（BSA）和1％的物种特异性血清（2 次抗体源）处理30分钟，在室温（RT）。 </li><li>在孵育一抗（参见制造商的抗体稀释的建议）。参阅材料特异性抗体。稀释的第一抗体在新鲜封闭缓冲液，如步骤5.2.2。孵育可以在RT或过夜，4℃下进行至少2小时</li><li>对于每次5分钟洗涤3次，用1×PBS。 </li><li>在孵育二抗（参见制造商的抗体稀释的建议）。稀释的第二抗体在新鲜封闭缓冲液，如步骤5.2.2。为了防止光致漂白，要进行这个和随后的步骤在不存在光的是很重要的。 </li><li>对于每次5分钟洗涤3次，用1×PBS。 </li><li> ThoroughlŸ干的幻灯片。 </li><li>新增安装介质和DAPI复染的解决方案。 </li><li>适用盖玻片，用密封胶（S）密封边缘。幻灯片可以保存在4℃下在黑暗中长达2周。 </li></ol></li></ol> 6，RNA提取<ol><li>沉淀1×10 7细胞通过离心分离。所有的材料和试剂在本议定书应无RNA酶。 </li><li>裂解细胞在1ml TRIZOL试剂，孵育匀浆样品10分钟，在室温下完成核蛋白复合物的解离。 </li><li>加入200μl氯仿每1ml TRIzol的。用力摇晃手，持续15秒后，于室温2-3分钟。 </li><li>以最大速度离心（15000×g离心）处理1​​5分钟，在4℃下三层将导致。 </li><li>传输最佳水相到一个新的离心管中。加入1μl糖原增加RNA产量;然而，这一步只需要小的时候预计RNA的量。 </li><li>加入0.5毫升的异丙醇到水层中，并颠倒样品的3-5倍。孵育的样品在室温下10分钟。为了增加产量，样品可以被放置在-20℃或-80℃，30分钟。 </li><li>以最大速度离心10分钟，在4℃下</li><li>在这一点上，小球团的RNA应该是可见的。弃上清。 </li><li>用1毫升75％乙醇洗涤RNA。 </li><li>以最大速度离心5分钟，弃上清。样品可以洗涤一次以去除无机污染物，但此步骤不是必要的。 </li><li>简单地说，干燥RNA沉淀，直到RNA沉淀干燥（一般需要7-10分钟）。 注意：一个附加的步骤可以被用于降低无机物质和减少干燥时间。后从乙醇洗涤，脱水样品在最大速度为额外分钟和抽吸残留液弃去上清。小心不要吸入颗粒。 </li><li>溶解RNA在无RNA酶的水，这取决于RNA沉淀的大小。体积通常为10-50微升。 </li><li>孵育的样品在55℃下进行10分钟，并测量RNA的浓度。 </li><li>样品储存在-20°C，直到进一步的处理。 </li></ol> 7，反转录<ol><li>使样品的RNA（1-3微克）至9微升体积用H 2 O。 </li><li>热核糖核酸至70℃10分钟。 </li><li>要生成的AMV主结构，结合下列试剂：5微升的dNTP（50μM的工作浓度），5微升的N6的DNA寡核苷酸（80μm的工作浓度），5微升的5X AMV缓冲液和1微升的AMV 。这预混液是每一个样本而设计的。 </li><li>加入16微升的主结构被加热的RNA。最终反应体积为25μl的反应。 </li><li>使用下面的PCR条件进行反转录：（阶段1）42℃下90分钟，（站戈2）95℃下进行5分钟，和（阶段3）4℃直至进一步处理。 </li></ol> 8，实时定量PCR <ol><li>使用引物，退火温度，循环次数，和试剂在表1中找到进行PCR反应。 注：这是理想的使用PCR试 ​​剂（指公司和产品目录中的材料数量）时，需要遵循制造商的说明。 </li></ol> 9。 在体外蜕膜协议（来自参考文献4和5派生） <ol><li>板子宫内膜细胞。 </li><li>长到75-85％汇合一。 </li><li>后的细胞汇合，用1X PBS洗涤一次。 </li><li>很快，添加无激素培养基（无苯酚RPMI补充有5％的木炭条FBS和1％青霉素 - 链霉素）。 </li><li> 24小时后，加入以1μM和8-溴腺苷3的终浓度添加有醋酸甲羟孕酮（MPA）激素免费媒体&#39;，5&#39;环腺苷（cAMP）在0.5mM的最终浓度。 </li><li>后至少48小时，使反应停止，并保存所述板（次）进行进一步处理。 </li></ol>

<ol>
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G., Brar, A. K., Frank, G. R., Hartman, S. M., Jikihara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast+cells+from+term+human+decidua+closely+resemble+endometrial+stromal+cells:+induction+of+prolactin+and+insulin-like+growth+factor+binding+protein-1+expression).">Fibroblast cells from term human decidua closely resemble endometrial stromal cells: induction of prolactin and insulin-like growth factor binding protein-1 expression).</a> Biol Reprod. 52, 609-615 (1995).</li><li>Gellersen, B., Brosens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+AMP+and+progesterone+receptor+cross-talk+in+human+endometrium:+a+decidualizing+affair.">Cyclic AMP and progesterone receptor cross-talk in human endometrium: a decidualizing affair.</a> J Endocrinol. 178, 357-372 (2003).</li><li>Marsh, M. M., Hampton, A. L., Riley, S. C., Findlay, J. K., Salamonsen, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+and+characterization+of+endothelin+released+by+human+endometrial+epithelial+cells+in+culture.">Production and characterization of endothelin released by human endometrial epithelial cells in culture.</a> J Clin Endocrinol Metab. 79, 1625-1631 (1994).</li><li>Siegfried, J. M., Nelson, K. G., Martin, J. L., Kaufman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histochemical+identification+of+cultured+cells+from+human+endometrium.">Histochemical identification of cultured cells from human endometrium.</a> In Vitro. 20, 25-32 (1984).</li><li>Rawdanowicz, T. J., Hampton, A. L., Nagase, H., Woolley, D. E., Salamonsen, L. 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作者没有披露。

其它基团所描述的，并适于方法对子宫内膜间质培养物，其中大部分利用胶原酶4,12,13,15-18的制备。在这个手稿中，我们提供的方法和证据为2的简化主子宫内膜间质培养的方法，这两者都是由本实验室利用出于经济原因和胰蛋白酶和/或刀片的方便可用的。 当我们比较两种方法，既成功地生成可行的原代培养。我们首选的方法是胰蛋白酶方法通常有更高的收益率以较小...

人类子宫语料库包括三个层，所述perimetrium（或浆膜），子宫肌层和子宫内膜。区分每一层是建立子宫内膜细胞系的重要一步。该perimetrium是子宫的最外层和薄，浆液性细胞组成。子宫肌层是子宫的厚，中间层和由平滑肌细胞。子宫内膜被确定为子宫的内层和包括上皮和基质细胞群体。 子宫内膜被进一步细分为basalis层的干细胞群是假设重新填充层泛函分析大约每28天1次。人类子宫内膜的一层泛函分析经历响应循环激素显著生化和形态学改变。这些激素是来自垂体和卵巢。 该协调生产和激素的释放结果在一个生殖周期。生殖周期的目的是准备子宫内膜潜在的胚胎着床的事件。在人类中，生殖周期被称为“月经周期”而分为三个阶段 - 增殖，分泌，和月经。增生期涉及子宫内膜泛函分析层的扩散，而分泌期的特点是成熟泛函分析。具体而言，细胞外的改变，分泌物和细胞分化信号的电位注入。如果植入分泌期结束前不会发生，子宫内膜泛函分析层是在月经期脱落。月经和触发泛函分析层脱落事件的重要性仍存在争议。在人类中，已经提出了月经是已知的特定分泌中期阶段分化事件的结果作为“自发蜕膜”2。在这个手稿中，我们提供详细的方法为子宫内膜间质细胞的分离方法，用免疫荧光和数字图像的组合，以证明这些方法的功效。此外，我们采用一种常用的自发蜕膜的体外模型，以确认子宫内膜间质细胞的分离。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="713">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">0.25 Trypsin or 0.05% Trypsin&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SH3023602 or SH30004202&#160;&#160;</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td dir="LTR" height="27" style="height:27px;width:235px;">1.7 micro Centrifuge Tube&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Genesee Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">22-272A&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td dir="LTR" height="25" style="height:25px;width:235px;">1&#181;l,20&#181;l, 200ml and 1000&#181;l Pipette&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Genesee Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">24-401,24-402, 24-412, 24-430&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td dir="LTR" height="22" style="height:22px;width:235px;">15ml Conical Tube&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">339650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td dir="LTR" height="23" style="height:23px;width:235px;">50ml Conical Tube&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">339652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">6cm Cell Culture Dish&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Thermo scientific&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">12-556-002&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td dir="LTR" height="22" style="height:22px;width:235px;">8 well Chambers&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">AB-4162&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td dir="LTR" height="23" style="height:23px;width:235px;">Acetate&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">C4-100&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">AMV RT Enzyme/Buffer&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Bio Labs&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">M077L&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">Bovine Serum Albumin (BSA)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP-1605-100&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td dir="LTR" height="23" style="height:23px;width:235px;">Buffered Zinc Formalin&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Thermo&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">59201ZF&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">Charcoal strip FBS&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">NC9019735&#160;&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">Chloroform&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP1145-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">Cover slip&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Brand&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">12-544D&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">Cyclic AMP (cAMP)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Sigma&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">B7880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td dir="LTR" height="24" style="height:24px;width:235px;">DMEM/High Glucose&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SH30243FS&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td dir="LTR" height="25" style="height:25px;width:235px;">dNTP&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Bioline&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BIO-39025&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Donkey Anti Goat -TRITC&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Santa Cruz&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SC-3855&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Donkey Serum&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Jackson&#8217;s lab&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">&#160;017-000-002&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">E Cadherin Antibody&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Epitomics&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">1702-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Ethanol&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP2818-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Fetal Bovine Serum (FBS)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">03-600-511&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Fungizone Amphotericin B&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Gibco&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">15290-018&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">GAPDH Probe&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Life Technologies&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">HS99999905&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Glycogen&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">5Prime&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">2301440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Goat Anti Mouse -FITC&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Jackson&#8217;s Lab&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">115-096-003&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Isopropanol&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP2618-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Kanamycin&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP906-5&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td dir="LTR" height="41" style="height:41px;width:235px;">Medroxyprogesterone acetate (MPA)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Sigma&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">M1629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">MeOH (Methanol)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">A4-08-1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Mounting Media (w/DAPI)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Vector Labratories&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">H-1500&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">N6 DNA Oligos&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Invitrogen&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Number 15 Scraper&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">BD&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">371615</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Pan Cytokeratin&#160; Mouse mAB&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Cell Signaling&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">4545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td dir="LTR" height="29" style="height:29px;width:235px;">PBS (phosphate buffered saline)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">BP-399-4&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td dir="LTR" height="41" style="height:41px;width:235px;">Penicillin-Streptomycin Glutamine Solution 100X&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SV30082.01&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">PML Anti Goat Anti body&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Santa Cruz&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SC-9862&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Primer(s)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Eurofins&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">RPMI&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Hyclone&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">SH30027FS&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">RPMI (Phenol free)&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Gibco&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">11835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Sybr Green&#160;&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">AB-4162&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Taqman&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Thermo&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">AB-4138</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Trizol&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Life Technologies&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;width:235px;">Vimentin Antibody&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:201px;">Epitomics&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:216px;">4211-1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

two methods for establishing primary human endometrial stromal cells from hysterectomy specimens

许多努力，一直致力于建立体外细胞培养系统。这些系统被设计来模拟体内过程的广大。从人类子宫内膜样产生的细胞培养系统也不例外。应用范围从正常循环生理过程的子宫内膜病变如妇科癌症，感染性疾病和生殖缺陷。在这里，我们提供了两种方法从手术切除的子宫内膜子宫切除标本建立初级子宫内膜间质细胞。第一种方法被称为“刮法”，并采用机械刮削使用手术或刀片而第二种方法被称为“胰蛋白酶的方法”，这后一种方法使用胰蛋白酶的酶活性，以促进细胞的分离和主细胞生长。我们通过数字图像和显微说明一步一步的方法。我们还providË例子通过实时定量聚合酶链反应（定量PCR）和免疫荧光（IF）验证子宫内膜间质细胞系。

所强调的协议部分，一定处理和准备人体组织时进行下政府的所有方法，制度和道德准则。 包括在这个手稿是“刮法”的一般工作流程的示意图（ 图1A）和用于建立初级子宫内膜文化“的胰蛋白酶法”（ 图1B）。这些方法进行了详细的协议部分中描述（参见部分1 - 3）。这两种方法都证明是成功的首要子宫内膜培养物的生长?...

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Two Methods for Establishing Primary Human Endometrial Stromal Cells from Hysterectomy Specimens

建立基层子宫内膜间质细胞培养系统从子宫切除标本是追求研究的目的繁多前一个有价值的生物技术和关键的一步。在这里，我们描述了两种方法用于建立从人类患者手术切除的子宫内膜组织间质文化。

两种方法从子宫切除标本小学建立人子宫内膜基质细胞

Many efforts have been devoted to establish in vitro cell culture systems. These systems are designed to model a vast number of in vivo processes. Cell ...

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22.5K 次观看.  University of Virginia. 建立基层子宫内膜间质细胞培养系统从子宫切除标本是追求研究的目的繁多前一个有价值的生物技术和关键的一步。在这里，我们描述了两种方法用于建立从人类患者手术切除的子宫内膜组织间质文化。 