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小鼠子宫内电穿孔

Overview

子宫内电穿孔是研究引导神经发育中的细胞增殖,分化,迁移和成熟的分子机制的一项重要技术。电穿孔利用电脉冲在细胞膜上产生瞬时孔隙,快速和有靶向地将物质导入到细胞中。 电穿孔在体外研究中的使用由来已久,但科学的发展将它的使用扩展到了完整的器官,如那些在子宫内的发育的小鼠胚胎器官。

本短片将介绍子宫内电穿孔背后的主要原理,回顾在怀孕的鼠体内操作发育中的胚胎所需的基本外科技术。并提供了注射和电穿孔的详细步骤,以及将基因导入指引到特定脑区域的重要因素。最后展示了子宫内电穿孔在神经生物学中的应用,如调查特定基因是如何参与神经系统的发育和发育中神经元之间是如何建立连接的。

Procedure

子宫内电穿孔是研究神经发育的分子机制的一项关键技术。通过注射DNA来改变发育中啮齿动物大脑的特定区域中基因的表达,研究人员能够研究神经细胞在其自然环境下的增殖,分化,迁移和成熟。

本短片将介绍子宫内电穿孔的主要原理,如何操作该技术的基本概述,以及它在神经生物学研究中的应用。

在深入介绍如何进行这项操作前,让我们先了解一下电穿孔的一些原理。这个过程利用了电脉冲能在细胞膜上产生瞬时孔隙,使得DNA能进入细胞。由于带负电荷的DNA会朝正极移动,可以根据不同细胞群在电场中的位置,来击中不同的目标细胞。

电穿孔在体外研究中的使用由来已久,但科学的发展将它的使用扩展到了完整的器官,包括那些在子宫内的发育的小鼠胚胎器官。

与细胞培养或离体技术不同,子宫内电穿孔的优点是,转染后的细胞将继续接受到所有引导正常发育的生理因子的信号。这点在大脑中尤为重要,因为其中的结构,例如轴突需要从其他细胞类型获得引导因子,以便正确地发育。

尤其是大脑发育涉及一系列程序化的增殖和迁移事件,这意味着不同的组织层能根据电穿孔的时间被设为目标。

最后,有各

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Overview

0:47

Electroporation: Principles and Technical Considerations

2:32

Preparing for In Utero Electroporation

3:21

Performing In Utero Electroporation

5:28

Applications

7:33

Summary

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小鼠子宫内电穿孔

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