This study was supported by the American Heart Association (IRG 14330015, PRE 16850005, PRE 20380386, EIA 0740129N), and the National Institutes of Health (RR 2865AR; P20 RR 016477).

下面描述的所有程序进行了审查，并在西弗吉尼亚大学健康科学中心批准的机构动物护理和使用委员会。 1.选择动物模型注：在UCMS模型中最常用的品种包括只SD和Wistar大鼠和BALB / CJ鼠标;其他小鼠模型已经显示有限的功效（DBA / 2，C57BL / 6）。然而，仔细考虑应给予的特定鼠标或选择的大鼠品系，由于遗传背景和易感性环境压力变化很大物种之间，并已被证明是影响研究11,14,15的成果的重要因素， 19。 <ol><li>使用适当的年龄的动物（ 例如，如果期 ​​望的终点是在17周大的老鼠进行评估，然 ​​后将老鼠必须启动UCMS议定书〜9周龄）作为本协议需在LEAST 7-9周才能完全诱发抑郁症状。 </li><li>单家动物IACUC批准的笼子和娱乐设施，食品和饲料标准可随意（另有规定的特定协议）进行UCMS。 </li><li>要特别小心，以确保控件安置在一个安静的房间最小的活动，以减少任何可能的未知环境压力的影响。 </li></ol> 2.不可预知的慢性轻度应激协议注：动物接受UCMS每天输送（&gt;每周5天），以清洁室用于UCMS操作。动物暴露于1或2的各天下面列出的压力源。压力都在一个随机计划执行的，并且每个应力给药最少3-4小时的（ 见表 1）。 <ol><li>浇10-20盎司的浸湿被褥。干净的水到每个标准的笼子。调整水的量相应地的大小笼为了充分衰减寝具但不引起的水池。居住在潮湿的笼中的动物为3-4小时。 </li><li>从每个网箱中取出被褥3-4小时，在这之后的动物被转换成另一种应激，需要一个空笼子（浅浴，笼倾斜）或放置到一个干净的笼子里有清新的床上用品。 </li><li>倾斜笼为3-4小时，约45°（无床上用品）。笼可倾斜以将留在原地作为动物走动在笼子一个坚固的对象。 </li><li>改变正常的12小时/ 12小时的光/暗周期为30分钟周期演替持续8小时。后，返回动物的正常循环。 </li><li>从它的笼子转移的每个动物，一个相邻的动物已被删除3小时笼。 </li><li>从每个网箱中取出所有的床上用品和鼠标或加水的深度〜0.25英寸约0.5英寸，只约4小时。使用水，它比室温温暖（〜30℃），以尽量减少hypothermIA潜力。简单干动物用柔软的毛巾在水中暴露之前，放置到干净的笼子里的结论。 </li><li>暴露动物捕食者气味/声音从一个天敌物种添加毛发和尿液（10-20毫升）的随机分布的样品束入笼3-4小时。另外，玩咆哮或从天然食肉动物捕食的噪音在靠近笼子3小时。 </li><li>在每个日常压力期间结束，将所有的动物成清洁笼子里，并将它们返回到壳体设施。 </li></ol> 3.动物监测/美容比分<ol><li>每天检查每个动物的伤口或溃疡，可能需要兽医治疗的发展。动物发展轻度损伤可能会继续在兽医的同意UCMS协议。 <ol><li>两名调查员培训评估大衣疏导检查每个动物和上规模的0-1指定每周大衣得分。这个分数是威慑通过分配个人得分开采（0-干净，1脏），以每8身体regions-头，颈，背大衣，风衣腹，尾，前肢，后肢和生殖器区域。同样的调查人员在整个UCMS协议执行此任务，以保持在分配大衣分数的一致性。 </li><li>那经历了急剧减少体重（ 即 &gt; 15％）任何动物的，应当报的兽医人员，必须从协议中删除。 </li></ol></li></ol> 4。行为测试和测量指标注：评估的几种方法可以用来量化从啮齿动物的UCMS协议行为变化。 <ol><li>累计大衣疏导分数。 <ol><li>如上所述，每周涂层疏导得分被分配给每个动物。 </li></ol></li><li>蔗糖飞溅试验： <ol><li>将动物在干净的笼子内衬的化妆棉或纸巾，以防止床上用品附着在它的皮毛。喷10％的蔗糖溶液到每个动物的头和背涂层和5分钟记录总梳理行为。 </li><li>梳理活性（定义为清洗毛发由舔或刮伤的）由和频率（次数疏导的特定身体部位数）延迟（第一喷射和起始疏导之间的空闲时间）来测定。 </li></ol></li><li>蔗糖偏好测试： <ol><li> ，观察者动物饮用1％的蔗糖溶液（重量/体积）72小时的测试前，然后提供暴露于两瓶（1％蔗糖溶液与自来水中不同瓶）。习惯化后，提供动物随意访问蔗糖溶液和自来水3小时。 3小时后记录的蔗糖溶液的消费量和自来水，计算蔗糖偏好为：[（蔗糖消费量）/（用水量+蔗糖消耗）]×100。 </li></ol></li><li>悬尾实验（仅小鼠）： <ol><li>苏使用胶带（2厘米尾巴尖）稳定杆（20厘米处楼）花鼠的尾巴。记录不动时间超过5分钟。小鼠只有当他们挂被动，完全一动不动被认为是不动的。 </li></ol></li><li>强迫游泳测试： <ol><li>在一个容器的地方动物（〜15-20厘米直径为小鼠;〜55-60厘米直径为只）在26±0.5℃的温度下充满水。记录延迟到第一回合的流动性，并在5分钟测试期间花不动的时间。在试验结束时，将湿动物中在加热垫上（30-35℃）与正常寝具覆盖吸水纸巾直至干燥的保持架。 </li></ol></li><li>高架十字迷宫： <ol><li>允许每只动物自由探索迷宫5分钟。记录总条目到每个臂，和总时间在每个臂中度过，根据推测标准 20。 </li></ol></li><li> Locomo器活动： <ol><li>记录活动量，定义为整体运动，精细动作，饲养的动作，和不活动，对于急性（30分钟）和/或慢性（12小时）的时间段。使用家笼或小说环境为此，取决于个体环境（虽然一致性应维持）实时由观察者或事后通过重放和分析照相机镜头。 </li></ol></li></ol> UCMS议定书5.扩展/变异<ol><li>辖适当的治疗药物或挑战来研究它们要么生硬UCMS致成果的开发（如年初启动），扭转既定UCMS引起的后果严重程度（如果发起晚期）的能力。这是取决于单个实验室或协议11。 </li></ol> 6.最后的结果评估<ol><li>以下的UCMS协议和行为测试结束时，利用动物在后续EXPERiments在解决具体的假设，目的或个人实验室的目标的方式。 注：作为例子，这可以包括心血管疾病，炎症或内分泌反应，慢性应激。备选地，治疗性干预可以在此时被引入以评估它们的有效性和机理基础。 </li></ol>

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M., Akar, F., Erden, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+fluoxetine,+tianeptine+and+olanzapine+on+unpredictable+chronic+mild+stress-induced+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of fluoxetine, tianeptine and olanzapine on unpredictable chronic mild stress-induced depression-like behavior in mice.</a> Life Sci. 91 (25-26), 1252-1262 (2012).</li><li>Gumuslu, E., Mutlu, O., Sunnetci, D., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Cine, N., Akar, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+tianeptine,+olanzapine+and+fluoxetine+on+the+cognitive+behaviors+of+unpredictable+chronic+mild+stress-exposed+mice.">The effects of tianeptine, olanzapine and fluoxetine on the cognitive behaviors of unpredictable chronic mild stress-exposed mice.</a> Drug Res (Stuttg). 63 (10), 532-539 (2013).</li><li>Isingrini, E., Belzung, C., Freslon, J. L., Machet, M. C., Camus, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluoxetine+effect+on+aortic+nitric+oxide-dependent+vasorelaxation+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress+model+of+depression+in+mice.">Fluoxetine effect on aortic nitric oxide-dependent vasorelaxation in the unpredictable chronic mild stress model of depression in mice.</a> Psychosom Med. 74 (1), 63-72 (2012).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hasco&#235;t, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test.</a> Behav Brain Res. 143, 193-200 (2003).</li><li>Komada, M., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+plus+maze+for+mice.">Elevated plus maze for mice.</a> J Vis Exp. (22), 1088 (2008).</li><li>Golbidi, S., Frisbee, J. C., Laher, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+impacts+the+cardiovascular+system:+animal+models+and+clinical+outcomes.">Chronic stress impacts the cardiovascular system: animal models and clinical outcomes.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Extensive clinical and epidemiological evidence has indicated that chronic stress is one of the most potent precipitating factors for depression. Repeated exposure to stressors may potentiate individual vulnerability to depression and other neuropsychiatric disorders as a consequence of the psychological and physical demands within the body that accumulate over time. The use of validated preclinical animal models offers a valuable translational tool for studying depression and comorbid diseases. Firstly, an ideal animal ...

抑郁症精神疾病是目前世界公认的残疾和疾病负担的一个主要原因一种复杂的神经系统疾病。镍氢报告说，美国约12％的临床抑郁症，有两倍多的影响相对于男性1女。仅在美国，抑郁症占了数十亿美元的直接医疗费用估计有$ 193个十亿以上的间接成本（降低收入和生产力损失）2。抑郁症的症状包括快感缺乏，体重变化和睡眠周期，体力活动减少和个人卫生，绝望或内疚，和/或死亡或自杀的想法再次发生感情。在过去十年中，流行病学和临床研究已经表明，抑郁症是心血管疾病（CVD）的发病率和死亡率3的独立危险因素，并且是预测更严重的预后的心血管病症，包括的therosclerosis，高血压，心肌梗塞，冠状动脉疾病，不管明显的CVD 4之前的历史。尽管日益流行和抑郁症的不利公众健康的影响，这种疾病的病因学和相关的病理生理学是知之甚少和病症由于各种因素（例如，遗传，生物和环境组分）的异质性使得临床诊断难以定义。 有证据表明，无法解决的心理压力为显影抑郁疾病的一个主要因素，也可以是一种有效的致病因子联抑郁症和心血管疾病，部分是由于破坏和下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）5,6-失调。 HPA轴的功能障碍是，已被链接到在抑郁症中观察到的行为和生理变化和几个CVD危险因素的发展的一个主要机制，包括血脂异常，肥胖症，糖尿病和7。抑郁症的多种临床前模型，已经开发了试图复制临床抑郁症的改变的HPA轴的活性特性的机制;这种模型提供了有效的手段进行调查慢性和急性应激动物相关的行为，神经系统和生理变化。的疾病的动物模型的有效性是基于模型的设计和其复述解剖学，神经生理学能力，和在人类疾病观察行为特征的病因和进展的相关性。此外，临床前对治疗的反应（如SSRIs的）应产生相似的结果的那些在临床环境观察。 应激抑郁的几种动物模型的研究，目前利用，如习得性无助，早期的生活压力，社会溃败的压力。然而，这些模型都有固有的缺点这减轻他们的翻译疗效8。在过去的几十年中，不可预知的慢性轻度应激（UCMS）协议已成为最翻译相关的车型之一是研究抑郁症的病理生理啮齿类动物9。该模型是基于长期暴露于压力破坏应激反应系统，并最终导致抑郁症的发展的基本概念。在UCMS协议，动物暴露于每天随机一系列温和的环境和社会压力的。它增强了该模型对人类的情况下的相关性的一个关键因素在于高度不可预测性和压力的不可控的，以及在其被引入的时间。此外，UCMS协议使用，而不是依赖于生命早期或积极的物理刺激只有轻微的压力。经过一段UCMS曝光，抑郁行为发展和媲美临床iCal的症状，包括反应减少到奖励（快感缺乏），改变身体活动和调查行为（无助和绝望），大衣状态恶化和改变性活动10。几乎所有的抑郁症症状可证实已经报道使用这种模型，并且研究已经证明，这些行为持续数周后应力的停止。此外，这些UCMS诱发抑郁行为可以逐渐被慢性尊敬，但不是急性的，治疗特别抗抑郁药，提示治疗改善了密切反映在人类中这些药物的临床操作和可变功效类似的神经效应11,14- 18。这里，我们报告了UCMS协议的详细描述，并描述典型行为和血管的结果在小鼠中。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Temporary animal cages with lids</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent bedding</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Predator fur or urine</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent cage drinking bottles</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 ml graduated cylinder</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>This is optional.&#160; Any container from which a known quantiity of water can be poured will be appropriate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden blocks cut from 2x4</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>8 inch sections are cut to facilitate cage tilt procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft paper towels</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your institution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small spray bottle&#160;</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>100-200 ml volume is sufficient, used for sucrose splash test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium (mice) or large (rats) plastic tubs for swim testing</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>variable</td>
			<td>Should be of sufficient depth that the animals cannot touch bottom (e.g., 2 feet)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an unpredictable chronic mild stress protocol for instigating depressive symptoms, behavioral changes and negative health outcomes in rodents

慢性，未解决的压力是临床抑郁症的发展的一个主要危险因素。而应激抑郁的许多临床前模型已报道，在不可预测的慢性应激（UCMS）协议是用于诱导行为症状通常与临床抑郁症有关，如快感缺乏，改变的梳理行为建立翻译相关的模型，和习得性无助在啮齿类动物。该UCMS协议也引起生理（E·G。，hypercortisolemia，高血压）和神经系统（ 例如 ，快感缺乏，习得性无助感），其在临床上与抑郁症相关的变化。重要的是，UCMS引起的抑郁症状可以通过长期得到改善，但不严重，治疗常见的SSRIs类药物。这样，UCMS协议提供了许多优点急性应激协议或，利用更极端的压力源协议。我们的协议包括随机，每天暴露于7不同的STREssors：潮湿的床上用品，拆除床上用品，笼倾斜，改变光/暗周期，社会压力，浅水洗澡，捕食者的声音/气味。 3-4小时，每天给这些轻度压力使鼠类为8周后，我们证明这两种显著的行为改变和不良的健康后果心血管系统。这种方法允许进行深入询问慢性应激抑郁相关联，以及用于新的潜在的治疗剂或干预策略测试神经，行为和生理改变的。

一周之后UCMS过程的时间表的一个例子示于表1中。每个星期，压力被随机防止鼓掌，并确保挑战应力的不可预测的每一天。 抑郁像行为措施继8周UCMS，有显著改变双方的行为和生理的结果相对于其非强调控制株慢性应激啮齿动物。抑郁像下面UCMS症状的发展是通过外套得分，蔗糖飞溅测试和尾吊评估（只老鼠，引用12,13）。在大衣疏导?...

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An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

煽动抑郁症状，行为变化和不利健康结果鼠害一个不可预知的慢性轻度应激协议

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

an-unpredictable-chronic-mild-stress-protocol-for-instigating

Research

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Behavior

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