莫里斯水迷宫,或MWM实验,已成为最广泛使用和经典的行为实验,以评估动物的空间学习和记忆能力。虽然有很多关于MWM的文章,但在实践中,研究人员仍然感到困惑。因此,这种直观而严格的操作过程视频尤为重要。
我们之前进行过基于MWM的研究,建议针灸可以缓解AD模型小鼠的症状。在这里,我们介绍了我们最近研究中使用的MWM操作协议,为研究人员提供了一种简单可见的方法来评估AD模型动物的空间学习和记忆。MWM是一种强大的评估认知功能的技术,在研究中被广泛使用。
但是,没有定义或标准参数来执行任务,例如池和平台的大小。因此,该方法的真正演示至关重要。首先根据手稿指示设置莫里斯水迷宫或 MWM 测试。
MWM 设备和信号采集和处理系统应位于设计用于保持隔音的实验室中。由不透明布包围的圆形白色储罐应放置在 MWM 设备的中间。摄像机应固定在设备的天花板上,并连接到带自动跟踪系统的录像机。
使用标有北、南、东、西三条线将水迷宫水箱划分为四个相等的区域,从概念上讲,它将池区域划分为四个象限。然后,在鼠标视线内每个象限的墙上放置一个独特的视觉提示。向圆形水箱加注30厘米深的水,并在水中加入150克奶粉,使其不透明。
要执行可见平台试验,请随机将一个塑料圆形平台置于水面上方一厘米处的任何象限中,并在其上放置一面黑旗。将每只鼠标从朝向水箱壁的四个启动位置之一轻轻地释放到水中。一旦将鼠标释放到水中,立即激活计算机跟踪程序,并给每只鼠标 60 秒到达平台。
每次试用结束时,将鼠标放在平台上,并允许它在那里停留 10 到 30 秒。观察电脑上老鼠的游泳轨迹。记录鼠标查找平台的时间作为逃生延迟,并分析鼠标的游泳速度。
然后,用毛巾擦干鼠标,用电加热器加热。移动平台,每只鼠标执行四个试验,在不同的象限中启动鼠标。允许鼠标在每次试用之间恢复 15 到 20 分钟。
要执行隐藏平台试用,请将同一平台放在东南象限中,而不放置一个无标志的平台。然后,将鼠标随机放在四个象限之一,并给它 60 秒来查找隐藏的平台。如果鼠标在 60 秒内找不到平台,请引导它到平台,并允许它在那里停留 10 到 30 秒。
记录每个试验的转义延迟。用毛巾擦干鼠标,用电加热器保暖。每只鼠标执行四次试验,每次试验之间有 15 到 20 分钟,每次在不同的象限中启动鼠标。
连续五天的试验与平台和视觉提示在恒定的位置重复。要执行探针试验,请卸下平台,将鼠标放在西北象限水箱壁朝下。记录其游泳距离、速度和平台交叉编号。
完成后,将鼠标晾干并保暖。要执行反向试验,请将平台定位在西北象限中,然后重复隐藏平台试验。该协议用于研究手动针灸或MA对阿尔茨海默氏症小鼠学习和记忆的影响。
对于MA组,治疗在MWM测试前15天开始,并持续了11天的测试。在MWM第一天的可见平台测试中,在逃逸延迟或游速方面未观察到统计差异。在"隐藏平台"和"逆转"试验期间,阿尔茨海默病或AD组的逃逸延迟仍然很高,而其他三组患者的逃逸延迟逐渐减少。
重要的是,MA组的转义延迟比 AD 组的短。在探针试验中,MA组中小鼠的平台交叉数量低于对照组,但明显高于AD组。此外,MA 小鼠在平台先前位于象限中花费的时间百分比与药物组相似,该组小于控制,但大于 AD。重要的是要记住,如果鼠标在60秒内找不到平台,研究人员应引导它到平台,并允许它在那里停留10到30秒。
池的尺寸和平台大小没有特定的标准。这些参数必须在初步实验中根据实验要求和实验动物的状况进行优化。大多数研究都需要对像MWM这样的基本实验进行。
目前,MWM作为实验工具的灵活性,只在于根据所提出的研究选择基本方案的能力,因此可以应用这种测试更深入地评估认知功能。