我们提供一种协议,在一只老鼠中建立梗死。这种庞廷梗死大鼠模型易于执行,易于复制,并且非常成功的模型。电刺激可用于在任何其他脑区,如丘脑区进行梗死。
想要执行此模型的人应在实验前学习庞廷自主性。手术前,根据随附文本中描述的行为测试,对大鼠进行称重,并评估其神经表现。麻醉前将加热垫预热至 37 摄氏度,然后将头骨钻头连接到立体轴架上的支架上。
确认第一只麻醉大鼠对踏板反射缺乏反应,将大鼠安装在加热垫上容易位置的立体轴上。将耳杆放在耳道上方以固定头部,注意保持头骨水平,以避免注射出现任何倾斜。将软膏涂抹在动物的眼睛上,并使用微型剃须刀从头骨上去除头发。
使用标记沿头骨的中线绘制一条三厘米的线,从双边侧管线绘制到后侧方体后面 0.5 厘米,并使用手术刀沿标记线进行中线切口。使用棉签去除任何血液,并在皮瓣的两侧放置一块手术胶带以暴露头骨。使用浸有 0.9% 氯化钠的新拭子轻轻取出头骨上的任何结缔组织,并找到骨骼。
使用细尖笔指示啤酒的中心点作为原点,将钻头放在前六毫米,中侧侧两毫米处。使用钻头仔细执行一毫米直径的颅骨切除术。接下来,将钻头替换为 22 表带探头,并采用绝缘护套,尖端位于护套的近端上方两毫米。
将纸张插入大脑七毫米,然后沿着护套推进探针,直到探针顶部低于大脑表面九毫米。将电极连接到电气刺激器,然后将阳极连接到探头。然后连接到阴极到老鼠的耳朵。
接下来,打开电气刺激器,将单脉冲宽度设置为 4,050 毫秒,将电压设置为 50 伏,将电流设置为 4 毫安。在刺激后将探针留在位置五分钟,然后从大脑中取出设备。用骨水泥盖住颅骨切除术,让水泥在使用4.0聚酰胺缝合丝关闭伤口之前变干。
三或四针后,打2-1-1标准手术结。然后内向大鼠注射250微升青霉素,每15分钟监测一次,直到完全清醒,然后将动物返回到笼子。在这项分析中,六只动物接受了手术,六只动物被当作对等控制动物。
这些图像中的大脑切片来自每组一只大鼠。MRI扫描显示,梗死位于模拟人类患者异端梗塞的龙的基础上。因为使用了绝缘护套,所以在皮层、小脑或中脑中没有观察到梗塞。
扩散加权图像也揭示了急性庞汀梗死。TTC染色用于确认手术后24小时梗死。正如预期的那样,与对照组相比,手术组的梗塞量要高得多。
手术前和手术后的行为得分被测量。与对照组相比,有庞汀梗塞的老鼠在左边盘旋。在 Longa、Berderson、肢体放置、梁平衡和胶粘剂去除躯体感官测试分数中观察到显著差异,这些分数与庞汀梗死大鼠对照组大鼠的咆哮。
任何特定的大脑区域将被电刺激摧毁。