功能化磁性纳米粒子的合成及其与侧双磷铁氧胺的结合及其细菌检测评价

磁性纳米粒子由于其强磁性特性和表面易于功能化，是分析科学和纳米医学的理想工具。我们在这里报告氨基功能化二氧化硅磁性颗粒与侧氟铁氧胺结合的第一个实例，以及光源材料捕获的评估。侧孔是小的有机分子，在铁分体机制中起着关键作用，它们被细菌的特定外膜受体所识别。

该视频显示，一步一步，一个有效的协议，准备磁性铁纳米粒子。然后，他们涂上二氧化硅，以保护分散和保护磁核。由此产生的反应器表面与胺群功能化。

与铁氧胺结合的磁性纳米粒子的合成。在20 mL玻璃瓶中加入0.5克Fe（acac）3。然后，与10mL的苯基醇混合。

使这种混合物声波2分钟。然后，转移到加热块，在180摄氏度加热72小时。用96%乙醇冲洗纳米粒子。

离心机30分钟使用磁性磁铁将纳米粒子与上一样物分离开上是由元。丢弃残留溶剂。

丢弃上清液，与声波交替，直到溶剂看起来清晰。在80毫升异丙醇中准备悬浮2克MNP，加入4毫升21%氨、7.5毫升蒸馏水和0.56毫升TEOS。在40摄氏度加热混合物2小时，连续搅拌。

然后，声波1小时。用磁铁分离MNP，丢弃上流水线，将其分散在30毫升异丙醇中，加入氨、蒸馏水和TEOS，顺序与之前相同。在40摄氏度加热混合物两小时，连续搅拌。

然后，声波一个小时。方便地拆下并清洗磁搅拌棒，以回收所有材料。丢弃上清液，用96%乙醇三次冲洗纳米粒子，与声波交替。

在室温下将纳米粒子干燥12小时。冲洗500毫克的MNP@SIO2从上一步获得二甲基甲酰胺。声化它们并丢弃。

将颗粒重新悬浮在圆底烧瓶中，用磁棒搅拌，并加入 9 毫升的 APTES。在60摄氏度下搅拌混合物12小时。丢弃上清液，用96%乙醇三次冲洗纳米粒子，与声波交替。

在5毫升蒸馏水中溶解100毫克的乙酰胺、中盐盐和53.0毫克乙酰酸铁。在室温下搅拌混合物过夜。在分离漏斗中用20毫升乙酸乙酯清洗所得产品三次。

在真空下去除有机溶剂。冷冻干燥水相，以提供铁氧胺和红色固体。在50毫升圆底烧瓶中加入350毫克的沙奇氢化物溶液，在5毫升的苯丙胺中加入100毫克的铁氧胺溶液中。

在室温下搅拌所得混合物16小时。在减压下去除过量的苯丙胺。将反应原油溶解在3毫升甲醇中。

将甲醇溶液转移到LH-20柱中，以0.5 mL/分钟计算。收集红色分数，在真空中去除甲醇。用DMGF冲洗30毫克干胺功能化纳米粒子，并在100毫升Erlenmeyer烧瓶中对纳米粒子进行声波化30分钟。

准备200毫克N-苏基苯胺溶液， 173毫克苯甲酸酯 1-yl-oxy-tris-磷六氟磷酸盐 BOP，46毫克1-羟基苯三甲酸酯HOBt和128.8毫克N，N-二异丙基胺DIPEA，在10毫升的DMF，在50毫升的圆底烧瓶。在干燥和无氧条件下MNP@SiO2@NH2在声波条件下将先前冲洗过的清洁液悬浮在 3 毫升 DMF 中。使用 argon 大气。

加入，滴，混合 A 混合B.摇动最终的混合物，使用轨道摇床，在室温过夜。使用磁铁将产生的结合与悬架分离。细菌测定与Y.肠细胞菌菌株，以量化分离和捕获致病菌与纳米粒子。

在无菌管中，以 1 mg/mL 的 1 mg/mL 准备悬浮所有中间纳米粒子和 PBS 的最终结合。准备一个文化 Y.entorocolitica 在 5 毫升的卢里亚贝尔塔尼， Lb， 肉汤过夜。准备5毫升的缺铁试管大豆汤，TSB，通过添加50微升10 mM 2，2-双酰溶液。

用50微升的Y.肠糖糖过夜培养剂接种5毫升缺铁TSB汤。在37摄氏度的温度下孵育，搅拌，直到达到0.5至0.8的OD600。以100微升的隔夜培养，并在含有900微升PBS的管中稀释，以获得第一个1/10稀释。

然后，准备1/100稀释从第一次稀释使用相同的程序，以获得细菌细胞的浓度在10到6殖民地形成单位大约每毫升的功率。加入100微升的纳米粒子悬浮液和1毫克/毫升至1毫升的1/100细菌稀释。分离MNP细菌聚集体，使用磁铁，丢弃，小心，上一液。

使用涡流用 1 毫米 PBS 冲洗分离的纳米粒子两次。准备从前一个暂停连续四个 1/10 稀释， 直到 10 到负 4 稀释的力量。板 10 微升每次稀释到 TS 阿加板上。

在光白色模式下用凝胶数字化器拍摄板。处理图像，使用方便的软件，放大一个点，以计算单个殖民地的数量。为了确认纳米粒子和侧光粒之间的共价键的形成，我们使用FT-IR拉曼光谱来监测合成，观察新波段如何出现在每一步中与一个新的功能群一致。

TEM 和 SEM 显微镜用于观察形态和粒径。热重力分析，测量添加有机材料造成的体重减轻。XPS允许我们分析原子在表面的不同氧化状态，并确认共价键的形成。

最后，我们使用最终结合物上的所有中间体来测试其捕获细菌的能力，以确定其作为生物传感器的特性。该协议旨在利用磁铁矿纳米粒子的高生物相容性。二氧化硅涂层可改善分散性，保护磁核免受水介质降解的影响。

并且还给出一个反应性表面，使胺组功能化，而胺群是用碳酰胺化学共同结合酸改性侧泡所必需的。在这种情况下，N-苏奇尼氢胺。结合细菌捕获能力测试，结果，发现菌落数量小，与中间体没有显著差异，因为PBS细菌悬浮液中呈现的体积效应的特定相互作用。