这是弹性蛋白酶诱导腹主动脉瘤的标准化方案,这将大大提高使用该模型的研究的可重复性和一致性。该技术具有一致的腹主动脉瘤诱导率。它还具有费用低,运行时间短的优点,这将产生更强的统计能力和可重复性。
您需要确保去除覆盖主动脉的结缔组织,以便弹性蛋白酶有更好的渗透机会,但要注意不要损坏血管。首先,在麻醉诱导前30分钟皮下注射每公斤卡洛芬5毫克。在皮肤切口前测试麻醉的小鼠缺乏脚趾夹紧反应。
沿着中下腹部的中线在皮肤上做一个2.5厘米的纵向切口。轻轻拉起下面的肌肉,沿着白线做一个2.5厘米的纵向切口。使用湿润的棉头涂抹器将肠道和胃移动到小鼠的右侧,并进入腹腔。
使用镊子轻轻去除覆盖腹主动脉和下腔静脉的结缔组织。使用镊子轻轻地从下面的肌肉中解剖腹主动脉的背面和下腔静脉。将一块四厘米乘四毫米的手套条纹穿过腹主动脉和下腔静脉的背面,并拉直条纹。
将条纹放置在距离右肾动脉约0.5厘米的地方。在条纹上方,通过腹主动脉和下腔静脉的背面放置一块三厘米乘两毫米的棉垫。然后,拉直化妆棉。
要孵育弹性蛋白酶,使用移液管将30微升猪胰腺弹性蛋白酶滴到化妆棉上方的主动脉段上。将化妆棉和条纹缠绕在主动脉和下腔静脉周围。用无菌的0.9%生理盐水冲洗一块10厘米乘10厘米的纱布,并将其放在腹部。
30分钟后,用镊子取下条纹和化妆棉。用500微升无菌0.9%盐水冲洗主动脉和腹腔。使用纱布吸收剩余的盐水。
用运行6-0不可吸收的单丝缝合线重新近似肌肉层。然后,用3-4根中断的6-0条不可吸收的单丝缝合线闭合皮肤。雌性动物术后第14天腹主动脉瘤的发生率为91.7%,而雄性动物的发生率为72.7%,在发生腹主动脉瘤的19只动物中,雌性和雄性分别观察到最大腹主动脉直径增加1.7倍和1.6倍, 与非手术对照相比。
显示术后第14天非手术组和手术组的主动脉代表性图像。该技术是帮助剖析三重A的病理生理学并帮助发现新的潜在治疗靶点的潜在工具。