RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in <em>C. elegans</em>

C. elegans has proven to be a valuable model system for the discovery and functional characterization of many genes and gene pathways1. More sophisticated ...

Texas A&M University System Health Science Center

&#x7389;&#x7C73;&#x904D; 1 &#xFF08;Ubi-1&#xFF09; &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x662F;&#x7528;&#x6765;&#x8868;&#x8FBE;&#x5916;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x5355;&#x5B50;&#x53F6;&#x690D;&#x7269;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6837;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x5546;&#x4E1A;&#x4E0A;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x5404;&#x7EA7;&#x751F;&#x4EA7;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x9009;&#x62E9;&#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3001; &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x624B;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x76EE;&#x6807;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;Ubi 1 &#x4E00;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x3002;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4E0E;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x5143;&#x7D20;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x91CD;&#x53E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E5F;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x79BB;&#x520D; Ubi 1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x3002;&#x7389;&#x7C73;&#x548C;&#x520D;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x89E3;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7389;&#x7C73;&#x4E2D;&#x7684;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x89E3;&#x5256;&#x7684;&#x91CD;&#x53E0;&#x7389;&#x7C73; Ubi 1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x5143;&#x7D20;&#x548C;&#x6F14;&#x793A; 3&#39; &#x5143;&#x7D20;&#x9700;&#x8C03;&#x89E3;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;Ubi 1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x8FC5;&#x901F;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x975E;&#x5E38;&#x6D3B;&#x8DC3;&#xFF0C;&#x5728;&#x79CD;&#x5B50;&#x5185;&#x5B83;&#x5F3A;&#x70C8;&#x504F;&#x5411;&#x4E8E;&#x9A7E;&#x9A76;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x5143;&#x7D20;&#x66FF;&#x6362;&#x4E09;&#x805A;&#x4F53;&#x57FA;&#x672C;&#x57DF;/&#x4EAE;&#x6C28;&#x9178;&#x62C9;&#x94FE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x8C4C;&#x8C46;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4E2D;&#x80DA;&#x4E73;&#x7684;&#x79CD;&#x5B50;&#x8868;&#x60C5;&#x7684;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x6B64;&#x5904;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684; Ubi 1 &#x53D8;&#x91CF;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x79CD;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5176;&#x6574;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x90FD;&#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x9A71;&#x52A8;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7389;&#x7C73;&#x5916;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x5206;&#x6790;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x904D; 1 &#x7389;&#x7C73;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x5143;&#x7D20;&#x4E0E;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x53D8;&#x5F02;&#x4E0E;&#x6539;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x3002;

The maize polyubiquitin-1 (Ubi-1) promoter is one of a few select promoters used to express foreign genes in monocots, such that recombinant proteins can be produced at commercially viable levels. Modifying the activity, specificity and responsiveness of such promoters provides a means to achieve desired levels and patterns of expression of genes encoding target products. Ubi-1 is constitutively expressed but is further induced by heat shock. The promoter contains two overlapping sequences with similarity to defined heat shock elements and we show that these sequences are also present upstream of the Ubi-1 homologue isolated from teosinte. Both the maize and teosinte promoters can mediate a heat shock response in transgenic maize. We have dissected the overlapping maize Ubi-1 promoter heat shock elements and demonstrate that the 3' element is required to mediate a heat shock response. The Ubi-1 promoter is particularly active in tissues consisting of rapidly dividing cells, and within the seed it is strongly biased towards driving expression in the embryo. However, replacement of the heat shock elements with a trimer of a basic domain/leucine zipper factor binding site of a pea lectin promoter shifts the balance in seed expression towards the endosperm. The Ubi-1 variants described here differ in their overall activity in the seed, but they all show potential for driving high levels of heterologous gene expression in maize.

Analysis of the maize polyubiquitin-1 promoter heat shock elements and generation of promoter variants with modified expression characteristics.

Le ma&iuml;s polyubiquitine-1 (Ubi-1) promoteur est l&#39;un des quelques promoteurs select utilis&eacute;es pour exprimer des g&egrave;nes &eacute;trangers chez les monocotyl&eacute;dones, tel que les prot&eacute;ines recombinantes peuvent &ecirc;tre produites &agrave; des niveaux viables sur le plan commercial. Modification de l&#39;activit&eacute;, la sp&eacute;cificit&eacute; et la sensibilit&eacute; de ces promoteurs fournit un moyen d&#39;atteindre les niveaux d&eacute;sir&eacute;s et modes d&#39;expression de g&egrave;nes codant pour des produits de la cible. Ubi-1 est exprim&eacute;e constitutivement mais est &eacute;galement induite par choc thermique. Le promoteur contienne deux s&eacute;quences chevauchantes de similaires aux &eacute;l&eacute;ments de choc thermique d&eacute;finie et nous montrons que ces s&eacute;quences sont &eacute;galement pr&eacute;sentes en amont de l&#39;homologue de Ubi-1 isol&eacute; de t&eacute;osinte. Le ma&iuml;s et la t&eacute;osinte promoteurs peuvent m&eacute;dier une r&eacute;ponse au choc thermique chez le ma&iuml;s transg&eacute;nique. Nous ont diss&eacute;qu&eacute; les &eacute;l&eacute;ments choc thermique des promoteur Ubi-1 ma&iuml;s qui se chevauchent et d&eacute;montrer que l&#39;&eacute;l&eacute;ment 3&#39; est requis &agrave; la m&eacute;diation d&#39;une r&eacute;ponse au choc thermique. Le promoteur Ubi-1 est particuli&egrave;rement actif dans les tissus constitu&eacute;s de cellules qui se divisent rapidement, et au sein de la graine, il est fortement biais&eacute; vers l&#39;expression de conduite dans l&#39;embryon. Cependant, remplacer les &eacute;l&eacute;ments de choc thermique avec un trim&egrave;re d&#39;un site de liaison de base de domaine et la leucine zipper facteur d&#39;un promoteur de lectine de pois d&eacute;place l&#39;&eacute;quilibre dans l&#39;expression de semences vers l&#39;endosperme. Les variantes de Ubi-1 d&eacute;crites ici diff&egrave;rent dans leur ensemble de l&#39;activit&eacute; dans la graine, mais ils pr&eacute;sentent des possibilit&eacute;s pour la conduite des hauts taux d&#39;expression du g&egrave;ne h&eacute;t&eacute;rologue chez le ma&iuml;s.

Analyse des &eacute;l&eacute;ments de choc de chaleur de ma&iuml;s polyubiquitine-1 promoteurs et g&eacute;n&eacute;ration des variantes du promoteur avec caract&eacute;ristiques d&#39;expression modifi&eacute;e.

Die Analyse der Mais Polyubiquitin-1-Promotor Hitzeschock-Elemente und die Erzeugung von Promoter-Varianten mit modifizierten Eigenschaften Ausdruck.

Il mais polyubiquitin-1 (Ubi-1) promotore &egrave; uno dei pochi promotori select usate per esprimere geni stranieri in monocotiledoni, tale che le proteine ricombinanti possono essere prodotto commercialmente valido a livello. Modificando l&#39;attivit&agrave;, la specificit&agrave; e la reattivit&agrave; di tali promotori fornisce un mezzo per raggiungere i livelli desiderati e pattern di espressione dei geni che codificano per prodotti di destinazione. Ubi-1 &egrave; espresso costitutivamente ma &egrave; ulteriormente indotta dallo shock termico. Il promotore contiene due sequenze sovrapposte con somiglianza con elementi di shock termico definito e ci mostra che queste sequenze sono anche presenti a monte dell&#39;omologo di Ubi-1 isolato dal teosinte. Il mais e il teosinte promotori possono mediare una risposta di scossa di calore nel mais transgenico. Ci hanno sezionato i mais Ubi-1 promotore heat shock elementi sovrapposti e dimostrare che l&#39;elemento 3&#39; &egrave; necessaria per mediare una risposta di scossa di calore. Il promotore Ubi-1 &egrave; particolarmente attivo nel tessuto costituito da cellule in rapida divisione, e all&#39;interno del seme &egrave; fortemente sbilanciata verso guida espressione nell&#39;embrione. Tuttavia, sostituzione degli elementi di scossa di calore con un trimero di un sito di legame base dominio/leucina zipper fattore di un promotore di lectin pisello sposta l&#39;equilibrio nell&#39;espressione di seme verso l&#39;endosperma. Le varianti di Ubi-1 descritte qui differiscono nella loro attivit&agrave; complessiva del seme, ma mostrano tutti i potenziali per la guida di alti livelli di espressione del gene eterologo nel mais.

Analisi degli elementi di shock termico mais polyubiquitin-1 promotore e generazione di varianti promotore con caratteristiche di espressione modificata.

&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E; polyubiquitin 1 (Ubi 1) &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x5546;&#x696D;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x308A;&#x7ACB;&#x3064;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5358;&#x5B50;&#x8449;&#x690D;&#x7269;&#x3001;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5916;&#x6765;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; select &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3001;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x6C34;&#x6E96;&#x3068;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x88FD;&#x54C1;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ubi 1 &#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x91CD;&#x306A;&#x308A;&#x5408;&#x3046; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x985E;&#x4F3C;&#x5EA6;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x71B1;&#x306E;&#x885D;&#x6483;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3082;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Ubi 1 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x3002;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x3068;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x5FDC;&#x7B54;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x91CD;&#x306A;&#x308A;&#x5408;&#x3046;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7; Ubi 1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x8981;&#x7D20;&#x304C;&#x89E3;&#x5256;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B; 3&#39; &#x8981;&#x7D20;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3060;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ubi 1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x7279;&#x306B;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5F37;&#x304F;&#x8868;&#x73FE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x80DA;&#x904B;&#x8EE2;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066;&#x504F;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7A2E;&#x306E;&#x5185;&#x3067;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;/&#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B8;&#x30C3;&#x30D1;&#x30FC;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E09;&#x91CF;&#x4F53;&#x3067;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C9;&#x5F0F;&#x80DA;&#x4E73;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F; Ubi 1 &#x4E9C;&#x7A2E;&#x3001;&#x7A2E;&#x5B50;&#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x7570;&#x7A2E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x793A;&#x3002;

&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E; polyubiquitin 1 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x71B1;&#x306E;&#x885D;&#x6483;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x5F0F;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x751F;&#x6210;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;

&#xC625;&#xC218;&#xC218; polyubiquitin-1 (Ubi-1) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; monocots, &#xC678;&#xB798; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xC5C5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC120;&#xD0DD; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xB3D9;, &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xB4F1; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xC218;&#xC815; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xB300;&#xC0C1; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ubi-1&#xC740; constitutively &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC; teosinte&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC720;&#xBE44; 1 homologue &#xC0C1;&#xB958;. &#xC625;&#xC218;&#xC218;, teosinte &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC625;&#xC218;&#xC218;&#xC758; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC625;&#xC218;&#xC218; Ubi 1 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD574; &#xBD80; &#xD574;&#xC57C; &#xD558; &#xACE0; 3&#39; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC751;&#xB2F5; &#xC911;&#xC7AC; &#xD574;&#xC57C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ubi 1 &#xBAA8;&#xD130; &#xD2B9;&#xD788; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xD560; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4; &#xC528;&#xC557; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC2DD; &#xC6B4;&#xC804;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xCE58;&#xC6B0;&#xCE5C; &#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC644; &#xB450; lectin &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;/&#xC2E0; &#xC9C0;&#xD37C; &#xC778;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC640; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C; &#xAD50;&#xCCB4;&#xB294; endosperm &#xD5A5;&#xD574; &#xC528; &#xC2DD;&#xC758; &#xADE0;&#xD615;&#xC744; &#xC774;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB41C; Ubi 1 &#xBCC0;&#xC885; &#xC528;&#xC557;&#xC5D0;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB974;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBAA8;&#xB450; &#xC625;&#xC218;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80; &#xC6B4;&#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xC2DC;.

&#xC625;&#xC218;&#xC218; polyubiquitin-1 &#xBAA8;&#xD130; &#xC5F4; &#xC1FC;&#xD06C; &#xC694;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xC2DD; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBCC0;&#xC885;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

El ma&iacute;z poliubiquitina-1 (Ubi-1) promotor es uno de unos promotores seleccionados sol&iacute;a expresar genes for&aacute;neos en las monocotiled&oacute;neas, que pueden producir prote&iacute;nas recombinantes en niveles comercialmente viables. Modificaci&oacute;n de la actividad, la especificidad y la sensibilidad de estos promotores proporciona un medio para lograr los niveles deseados y patrones de expresi&oacute;n de genes que codifican productos de destino. Ubi-1 se expresa constitutivamente pero m&aacute;s se induce por choque t&eacute;rmico. El promotor contiene dos secuencias superpuestas con semejanza a los elementos de choque de calor definida y mostramos que tambi&eacute;n est&aacute;n presentes estas secuencias del hom&oacute;logo de Ubi-1 aislado de teocintle. El ma&iacute;z y el teosinte promotores pueden mediar una respuesta de choque de calor en el ma&iacute;z transg&eacute;nico. Nos han diseccionado los superposici&oacute;n ma&iacute;z Ubi-1 promotor calor choque elementos y demostrar que el elemento 3&#39; debe mediar una respuesta de choque de calor. El promotor de Ubi-1 es particularmente activo en los tejidos que consiste en dividir r&aacute;pidamente las c&eacute;lulas, y dentro de la semilla est&aacute; fuertemente sesgada hacia la expresi&oacute;n de la conducci&oacute;n en el embri&oacute;n. Sin embargo, la sustituci&oacute;n de los elementos de choque de calor con un tr&iacute;mero de un sitio de uni&oacute;n de factor de dominio b&aacute;sico/leucina cremallera de un promotor de la lectina de guisante cambia el equilibrio en la expresi&oacute;n de la semilla hacia el endospermo. Las variantes de Ubi-1 descritas aqu&iacute; se diferencian en su conjunto de la actividad en la semilla, pero todos muestran potenciales para conducir a altos niveles de expresi&oacute;n de genes heter&oacute;logos en ma&iacute;z.

An&aacute;lisis de los elementos de choque de calor ma&iacute;z promotor de poliubiquitina-1 y la generaci&oacute;n de variantes de promotor con caracter&iacute;sticas de expresi&oacute;n modificada.

La regulaci&oacute;n transcripcional de genes diana de AP-1 v&iacute;a activator protein-1 (AP-1) prote&iacute;nas de uni&oacute;n a sitios de uni&oacute;n de la AP-1 dentro de regiones promotoras de genes desempe&ntilde;a un papel clave en el control de la oncog&eacute;nesis, la proliferaci&oacute;n y la invasi&oacute;n celular y es importante en la patog&eacute;nesis de la artritis y enfermedades cardiovasculares. Para identificar nuevas prote&iacute;nas que interaccionan con el sitio de uni&oacute;n de ADN de AP-1, se realiz&oacute; el an&aacute;lisis de nucle&oacute;tido afinidad preincubaci&oacute;n especificidad prueba de reconocimiento (NAPSTER) de basadas en cromatograf&iacute;a de afinidad del ADN y descubrieron una prote&iacute;na 97 kDa que une in vitro a un elemento m&iacute;nimo de secuencia de ADN de AP-1. La secuencia de la fragmentaci&oacute;n de espectrometr&iacute;a de masa determinado eso p97 nucleolina. Material de immunoblotting de ADN purificados por afinidad con los anticuerpos anti-nucleolina confirm&oacute; esta identificaci&oacute;n. Nucleolina tambi&eacute;n une el sitio AP-1 en los an&aacute;lisis de cambio de gel. Nucleolina interact&uacute;a en NAPSTER con el sitio AP-1 dentro de la secuencia del promotor del gen de la Metaloproteinasa-13 (MMP-13) y se une en vivo en los ensayos de inmunoprecipitaci&oacute;n de cromatina en las cercan&iacute;as del sitio AP-1 en el promotor de la MMP-13. Sobreexpresi&oacute;n de nucleolina en c&eacute;lulas humanas de carcinoma cervical HeLa significativamente reprime la transactivaci&oacute;n del gen dependiente de AP-1 de una construcci&oacute;n m&iacute;nima de reportero de AP-1 y de una secuencia de reportero promotor de MMP-13. Este es el primer informe de atar nucleolin y transregulation en el sitio de la AP-1.

Nucleolina se une espec&iacute;ficamente a una secuencia de ADN de AP-1 y reprime la transactivaci&oacute;n AP1-dependiente del gen 13 de metaloproteinasa de la matriz.

&#x901A;&#x8FC7;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;-1 (AP 1) &#x86CB;&#x767D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; AP 1 &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x7684; AP 1 &#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6;&#x3001; &#x6269;&#x6563;&#x4E0E;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5BF9;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x4E0E;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x5F88;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x8981;&#x8BC6;&#x522B;&#x4E0E; AP 1 DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x65B0;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C; DNA &#x4EB2;&#x548C;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6839;&#x636E;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4EB2;&#x548C; Preincubation &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B; &#xFF08;NAPSTER&#xFF09; &#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D1;&#x73B0; 97 kDa &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6700;&#x5C0F;&#x7684; AP 1 DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x8D28;&#x8C31;&#x788E;&#x7247;&#x5148;&#x540E;&#x987A;&#x5E8F;&#x786E;&#x5B9A;&#x8BE5; p97 &#x9ED1;&#x8272;&#xFF09; &#x662F;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x3002;DNA &#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x6750;&#x6599;&#x5177;&#x6709;&#x6297;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x6297;&#x4F53;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x6B64;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x8FD8;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x51DD;&#x80F6;&#x79FB;&#x4F4D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x7684; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x5728; NAPSTER &#x4E0E; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x5185; &#xFF08;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13&#xFF09;&#xFF0C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5185;&#x4E2D;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5BAB;&#x9888;&#x764C;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x660E;&#x663E;&#x538B;&#x6291; AP 1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8BB0;&#x8005;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x7684; AP 1 &#x8BB0;&#x8005;&#x6784;&#x9020;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; transregulation AP 1 &#x73B0;&#x573A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;

&#x6838;&#x4EC1;&#x7D20;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5177;&#x4F53;&#x5230; AP 1 DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x538B;&#x6291; AP1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

Transcriptional regulation via activator protein-1 (AP-1) protein binding to AP-1 binding sites within gene promoter regions of AP-1 target genes plays a key role in controlling cellular invasion, proliferation, and oncogenesis, and is important to pathogenesis of arthritis and cardiovascular disease. To identify new proteins that interact with the AP-1 DNA binding site, we performed the DNA affinity chromatography-based Nucleotide Affinity Preincubation Specificity TEst of Recognition (NAPSTER) assay, and discovered a 97 kDa protein that binds in vitro to a minimal AP-1 DNA sequence element. Mass spectrometric fragmentation sequencing determined that p97 is nucleolin. Immunoblotting of DNA affinity-purified material with anti-nucleolin antibodies confirmed this identification. Nucleolin also binds the AP-1 site in gel shift assays. Nucleolin interacts in NAPSTER with the AP-1 site within the promoter sequence of the metalloproteinase-13 gene (MMP-13), and binds in vivo in chromatin immunoprecipitation assays in the vicinity of the AP-1 site in the MMP-13 promoter. Overexpression of nucleolin in human HeLa cervical carcinoma cells significantly represses AP-1 dependent gene transactivation of a minimal AP-1 reporter construct and of an MMP-13 promoter reporter sequence. This is the first report of nucleolin binding and transregulation at the AP-1 site.

Nucleolin binds specifically to an AP-1 DNA sequence and represses AP1-dependent transactivation of the matrix metalloproteinase-13 gene.

R&eacute;gulation de la transcription par l&#39;interm&eacute;diaire de liaison aux prot&eacute;ines activator protein-1 (AP-1) pour les sites de liaison AP-1 dans les r&eacute;gions promotrices de g&egrave;ne de g&egrave;nes cibles AP-1 joue un r&ocirc;le cl&eacute; dans le contr&ocirc;le de l&#39;oncogen&egrave;se, prolif&eacute;ration et invasion cellulaire et il est importante &agrave; la pathog&eacute;nie de l&#39;arthrite et les maladies cardiovasculaires. Pour identifier de nouvelles prot&eacute;ines qui interagissent avec le site de liaison de l&#39;ADN AP-1, nous avons effectu&eacute; le test ADN affinit&eacute; ax&eacute;e sur la chromatographie nucl&eacute;otides affinit&eacute; pr&eacute;incubation sp&eacute;cificit&eacute; TEst de reconnaissance (NAPSTER) et d&eacute;couvert une prot&eacute;ine 97 kDa qui lie in vitro &agrave; un &eacute;l&eacute;ment de s&eacute;quence ADN AP-1 minime. S&eacute;quen&ccedil;age par spectrom&eacute;trie de masse de fragmentation a d&eacute;termin&eacute; que p97 est nucl&eacute;oline. Mat&eacute;riel de purifi&eacute;s par affinit&eacute; immunoblotting de l&#39;ADN avec des anticorps anti-nucl&eacute;oline confirme cette identification. Nucl&eacute;oline lie &eacute;galement le site de l&#39;AP-1 dans les essais de Maj de gel. Nucl&eacute;oline interagit dans NAPSTER avec le site de l&#39;AP-1 au sein de la s&eacute;quence du promoteur du g&egrave;ne de la m&eacute;talloprot&eacute;inase-13 (MMP-13) et lie in vivo chez les dosages de l&#39;immunopr&eacute;cipitation de la chromatine dans les environs du site de l&#39;AP-1 dans le promoteur de MMP-13. La surexpression de la nucl&eacute;oline dans les cellules humaines de cancer du col de HeLa r&eacute;prime significativement AP-1 transactivation de g&egrave;nes d&eacute;pendant d&#39;une structure minimale de journaliste AP-1 et d&#39;une s&eacute;quence de journaliste de promoteur de MMP-13. C&#39;est le premier rapport de liaison nucl&eacute;oline et transregulation sur le site de l&#39;AP-1.

Nucl&eacute;oline se lie sp&eacute;cifiquement &agrave; une s&eacute;quence d&#39;ADN de l&#39;AP-1 et r&eacute;prime la transactivation AP1-d&eacute;pendante du g&egrave;ne matrix metalloproteinase-13.

Transkriptionelle Regulation &uuml;ber Activator Protein 1 (AP-1) Proteinbindung zu AP-1 Bindungsstellen innerhalb Gens F&ouml;rderer Regionen AP-1 Zielgene spielt eine Schl&uuml;sselrolle bei der Kontrolle der zellul&auml;ren Invasion, Verbreitung und Onkogenese und ist wichtig zur Pathogenese von Arthritis und Herz-Kreislauf-Erkrankungen. Um neue Proteine zu identifizieren, die Interaktion mit dem AP-1 DNA-Bindungsstelle, wir die DNA Affinit&auml;t Chromatographie-gegr&uuml;ndeten Nukleotid Affinit&auml;t Preincubation Spezifit&auml;t TEst der Anerkennung (NAPSTER) Probe durchgef&uuml;hrt und entdeckt ein 97 kDa-Protein, das in-vitro zu einer minimalen AP-1 DNA Sequence-Element bindet. Massenspektrometrische Fragmentierung Sequenzierung bestimmt, dass diese p97 Nucleolin ist. Immunoblotting von DNA Affinit&auml;t gereinigt Material Anti-Nucleolin-Antik&ouml;rper best&auml;tigt diese Identifikation. Nucleolin bindet auch die AP-1-Website bei Gel-Schicht-Assays. Nucleolin interagiert in NAPSTER mit der AP-1-Website innerhalb der Projekttr&auml;ger-Sequenz des Gens Metalloproteasen-13 (MMP-13) und in der N&auml;he der AP-1-Website in der MMP-13-Projekttr&auml;ger Chromatin Immunopr&auml;zipitation Proben in vivo bindet. Eine &Uuml;berexpression von Nucleolin in den menschlichen HeLa-Geb&auml;rmutterhals-Karzinom-Zellen unterdr&uuml;ckt deutlich AP-1 abh&auml;ngige gen Transactivation eines minimalen AP-1-Reporter-Konstrukts und eine MMP-13 Projekttr&auml;ger Reporter-Sequenz. Dies ist der erste Bericht der Nucleolin-Bindung und Transregulation am Standort AP-1.

Nucleolin bindet spezifisch an eine AP-1 DNA-Sequenz und unterdr&uuml;ckt AP1-abh&auml;ngige Transactivation im Matrix-Metalloproteasen-13-gen.

Regolamento transcriptional tramite activator protein-1 (AP-1) legame con le proteine di AP-1 siti di legame all&#39;interno delle regioni di gene promotore dei geni bersaglio di AP-1 gioca un ruolo chiave nel controllo della oncogenesi, proliferazione e invasione cellulare ed &egrave; importante per la patogenesi dell&#39;artrite e malattie cardiovascolari. Per identificare nuove proteine che interagiscono con il sito di legame del DNA AP-1, abbiamo eseguito il dosaggio di Nucleotide affinit&agrave; preincubazione specificit&agrave; TEst di riconoscimento (NAPSTER) basati sulla cromatografia DNA affinit&agrave; e scopr&igrave; una 97 kDa proteina che si lega in vitro un minimo elemento di sequenza DNA AP-1. Sequenziamento di frammentazione di spettrometria di massa determinato quello p97 nucleolin. Materiale purificato per affinit&agrave; di immunoblotting di DNA con gli anticorpi anti-nucleolin confermato questa identificazione. Nucleolin associa anche il sito di AP-1 gel shift dosaggi. Nucleolin interagisce in NAPSTER con il sito di AP-1 all&#39;interno della sequenza del promotore del gene metalloproteinase-13 (MMP-13) e si lega in vivo in dosaggi di immunoprecipitazione della cromatina in prossimit&agrave; del sito di AP-1 nel promotore MMP-13. Sovraespressione di nucleolin in cellule di carcinoma cervicale umano HeLa reprime in modo significativo AP-1 transattivazione dipendente dal gene di un costrutto di reporter minimal AP-1 e di una sequenza di reporter del promotore MMP-13. Questo &egrave; il primo rapporto di nucleolin binding e transregulation presso il sito di AP-1.

Nucleolin lega specificamente a una sequenza di DNA AP-1 e reprime transactivation AP1-dipendente del gene matrix metalloproteinase-13.

AP 1 &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;ap &#x901A;&#x4FE1;-1) &#x86CB;&#x767D;&#x7D50;&#x5408;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306E; AP 1 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D78;&#x6F64;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x304C;&#x3093;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x3068;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;AP 1 DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;DNA &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x4F4E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58; &#xFF08;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF09; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x6700;&#x5C0F;&#x9650; AP 1 DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B; 97 kDa &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E; p97 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3;&#x304B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3002;DNA &#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x7CBE;&#x88FD;&#x6750;&#x6599;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3;&#x3082;&#x30B2;&#x30EB; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x8A66;&#x91D1;&#x3067; AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (MMP 13&#xFF09; &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5185;&#x306E; AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x3057;&#x3001;AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3; HeLa &#x5B50;&#x5BAE;&#x981A;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F; AP 1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650; AP 1 &#x8A18;&#x8005;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068; transregulation AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30EA;&#x30F3;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x3092; AP 1 DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; AP1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AP-1 &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-1 (AP 1) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC758; AP 1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; transcriptional &#xADDC;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xC785;, &#xD655;&#xC0B0;, &#xBC1C;&#xC554;, &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560; &#xD558; &#xACE0; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xACFC; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xD608;&#xAD00; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. AP 1 DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; DNA &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xAE30;&#xBC18; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; Preincubation &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD; (&#xB0C5;&#xC2A4;&#xD130;) &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; AP 1 DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; 97 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xC870;&#xAC01;&#xD654; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xADF8; p97 nucleolin &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-nucleolin &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; DNA Immunoblotting &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC21C;&#xD654; &#xC790;&#xB8CC; &#xD655;&#xC778;&#xC774; &#xC2DD;&#xBCC4;. Nucleolin&#xB294; &#xB610;&#xD55C; AP 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC824; &#xAD50;&#xB300; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nucleolin metalloproteinase-13 &#xC9C4; (MMP-13), &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC21C;&#xC11C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; AP 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB0C5;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xD558; &#xACE0; MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; AP 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC8FC;&#xBCC0; chromatin immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04; &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC790; &#xAD81; &#xACBD;&#xBD80; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; nucleolin&#xC758; overexpression&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; AP 1 &#xC885;&#xC18D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; transactivation &#xCD5C;&#xC18C; AP 1 &#xAE30;&#xC790; &#xAD6C;&#xBB38; &#xBC0F; MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xAE30;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xB204;&#xB974;&#xB294;. Nucleolin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; AP-1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; transregulation&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nucleolin AP 1 DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; AP1 &#xC885;&#xC18D; transactivation &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 13 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB204;&#xB974;&#xB294;.

&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF09; &#x90FD;&#x662F;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x91CD;&#x6784;&#x3001; &#x548C;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x4E2D;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x9176;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x521B;&#x764C;&#x75C7;&#x548C;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; Y &#x6846;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;-1 &#xFF08;YB-1&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x65B0;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x53CD;&#x5F0F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;YB 1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5916; DNA &#x4EB2;&#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#x7684;&#x5185;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;-1 &#xFF08;AP-1&#xFF09; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x63ED;&#x793A; YB 1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x7684; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;YB 1 &#x538B;&#x6291;&#x80BF;&#x7624;&#x5728; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x8868;&#x660E; YB 1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4EFD;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; AP 1 &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C; YB 1 &#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;

YB 1 &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x538B;&#x6291;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7; AP 1 &#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;

Matrix metalloproteinases (MMPs) are key enzymes that implement degradation of the extracellular matrix during cellular invasion in development, tissue remodeling, and pathogenic disease states. MMP-13 has pivotal roles in the pathogenesis of invasive cancers and arthritis. Here we report the identification of Y-box binding protein-1 (YB-1) as a new repressor of MMP-13 transactivation. YB-1 binds in vitro in DNA affinity chromatography to the activator protein-1 (AP-1) DNA sequence within the MMP-13 promoter. Chromatin immunoprecipitation assays reveal that YB-1 binds in living cells to the MMP-13 gene promoter to a region of the MMP-13 promoter containing the AP-1 site. YB-1 represses tumor promoter-induced MMP-13 promoter transactivation at the AP-1 site. This is the first report demonstrating YB-1 binding in vitro and in living cells to a mammalian AP-1 target gene, and the first report of YB-1 regulation of the MMP-13 promoter.

YB-1 binds to the MMP-13 promoter sequence and represses MMP-13 transactivation via the AP-1 site.

M&eacute;talloprot&eacute;inases matricielles (MMP) sont des enzymes cl&eacute;s qui impl&eacute;mentent la d&eacute;gradation de la matrice extracellulaire au cours de l&#39;invasion cellulaire dans le d&eacute;veloppement, remodelage tissulaire et &Eacute;tats pathog&egrave;nes de la maladie. MMP-13 a un r&ocirc;le essentiel dans la pathogen&egrave;se de l&#39;arthrite et de cancers invasifs. Nous rapportons ici l&#39;identification de Y-box binding protein-1 (YB-1) comme un nouveau r&eacute;presseur de transactivation de MMP-13. YB-1 se lie in vitro en chromatographie d&#39;affinit&eacute; d&#39;ADN &agrave; la s&eacute;quence de l&#39;ADN (AP-1) activator protein-1 au sein du promoteur de MMP-13. Essais d&#39;immunopr&eacute;cipitation de la chromatine r&eacute;v&egrave;lent que YB-1 se lie dans les cellules vivantes pour le promoteur du g&egrave;ne MMP-13 &agrave; une r&eacute;gion de la MMP-13 promoteur contenant le site AP-1. YB-1 r&eacute;prime la tumeur induite par le promoteur MMP-13 promoteur transactivation sur le site de l&#39;AP-1. C&#39;est le premier rapport d&eacute;montrant la liaison YB-1 in vitro et dans les cellules vivantes d&#39;un mammif&egrave;re AP-1 cibler des g&egrave;nes et le premier rapport du YB-1 R&egrave;glement du promoteur MMP-13.

YB-1 se lie &agrave; la s&eacute;quence du promoteur MMP-13 et r&eacute;prime la transactivation de MMP-13 via le site de l&#39;AP-1.

Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) sind wichtige Enzyme, die Abbau der extrazellul&auml;ren Matrix bei zellul&auml;ren Invasion in Entwicklung, Umbau von Gewebe und pathogenen Krankheitzust&auml;nden zu implementieren. MMP-13 hat entscheidende Rollen in der Pathogenese von invasiven Krebs und Arthritis. Hier berichten wir &uuml;ber die Identifizierung der Y-Box Binding Protein-1 (YB-1) als ein neues Verdr&auml;nger von MMP-13 Transactivation. YB-1 bindet in vitro in DNA-Affinit&auml;ts-Chromatographie, die Aktivator-Protein-1 (AP-1) DNA-Sequenz innerhalb der MMP-13-Projekttr&auml;ger. Chromatin Immunopr&auml;zipitation Proben zeigen, dass YB-1 in lebenden Zellen an den MMP-13 gen Projekttr&auml;ger zu einer Region des Projekttr&auml;gers MMP-13 mit die AP-1-Website bindet. YB-1 unterdr&uuml;ckt Tumor induziert durch Projekttr&auml;ger MMP-13 Projekttr&auml;ger Transactivation am Standort AP-1. Dies ist der erste Bericht demonstrieren YB-1 Bindung in-vitro- und in lebenden Zellen zu einem S&auml;ugetier-AP-1 Ziel-gen, und der erste Bericht der YB-1 Verordnung des Projekttr&auml;gers MMP-13.

YB-1 bindet an die MMP-13-Promotor-Sequenz und unterdr&uuml;ckt MMP-13 Transactivation &uuml;ber die AP-1-Website.

Metalloproteinasi della matrice (MMP) sono enzimi chiave che implementano la degradazione della matrice extracellulare durante invasione cellulare in sviluppo, rimodellamento dei tessuti e Stati di malattia patogena. MMP-13 ha ruoli cardine nella patogenesi di tumori invasivi e artrite. Qui riportiamo l&#39;identificazione di Y-box binding protein-1 (YB-1) come un nuovo repressor di transattivazione MMP-13. YB-1 si lega in vitro in cromatografia di affinit&agrave; del DNA alla sequenza di DNA (AP-1) activator protein-1 all&#39;interno del promotore di MMP-13. Analisi di immunoprecipitazione della cromatina rivelano che YB-1 si lega in cellule viventi per il promotore del gene di MMP-13 per una regione del promotore della MMP-13 contenente il sito di AP-1. YB-1 reprime tumorale indotta da promotore MMP-13 promotore transactivation presso il sito di AP-1. Questo &egrave; il primo rapporto dimostrando YB-1 associazione in vitro e in cellule viventi di un mammifero AP-1 gene e la prima relazione di YB-1 regolamento del promotore della MMP-13.

YB-1 si lega alla sequenza promotore MMP-13 e reprime transactivation MMP-13 tramite il sito di AP-1.

&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;Mmp&#xFF09; &#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x6539;&#x9020;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x4FB5;&#x653B;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;MMP 13 &#x306F;&#x6D78;&#x6F64;&#x764C;&#x3001;&#x95A2;&#x7BC0;&#x708E;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;MMP 13 &#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Y &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 (YB-1) &#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;YB 1 &#x4F53;&#x5916; DNA &#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB; &#x30C6;&#x30A3;&#x30FC; &#x30FB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;ap &#x901A;&#x4FE1;-1) DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1; YB 1 &#x7D30;&#x80DE; MMP 13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;YB 1 &#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x8A98;&#x8D77; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5316; AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; in vitro YB 1 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3068;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; AP 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068; MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; YB 1 &#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3002;

YB 1 MMP 13 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3001;AP 1 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; MMP 13 &#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases (MMPs) &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC870;&#xC9C1; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCE68;&#xACF5; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xAD6C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. MMP-13 &#xCE68; &#xC724; &#xC131; &#xC554;&#xACFC; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; MMP-13 transactivation&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC9C4;&#xC555;&#xC73C;&#xB85C; Y &#xC0C1;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-1 (YB-1)&#xC758; id&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. YB 1 MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB0B4; &#xD65C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-1 (AP 1) DNA &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; DNA &#xCE5C;&#xD654;&#xC131; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chromatin immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; YB 1 AP 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; MMP 13 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xB97C; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. YB 1 &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC720;&#xB3C4; MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; transactivation AP-1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;. YB 1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCCB4; &#xC678;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xC774;&#xBA70; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; AP-1 &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; YB 1 MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;.

YB 1 MMP 13 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xB204;&#xB974;&#xB294; MMP-13 transactivation AP 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;.

Metaloproteinasas de la matriz (MMP) son enzimas claves que implementan la degradaci&oacute;n de la matriz extracelular durante la invasi&oacute;n celular en desarrollo, remodelaci&oacute;n tisular y Estados de enfermedad grave. MMP-13 tiene papel fundamental en la patog&eacute;nesis del c&aacute;ncer invasivo y artritis. Aqu&iacute; divulgamos la identificaci&oacute;n de la caja Y binding protein-1 (YB-1) como un nuevo represor de transactivaci&oacute;n de MMP-13. YB-1 se une in vitro en cromatograf&iacute;a de afinidad de ADN a la secuencia de ADN (AP-1) de prote&iacute;na-1 activador en el promotor de la MMP-13. Ensayos de inmunoprecipitaci&oacute;n de cromatina revelan que YB-1 se une en las c&eacute;lulas vivas para el promotor del gen MMP-13 a una regi&oacute;n del promotor MMP-13 que contiene el sitio AP-1. YB-1 reprime la transactivaci&oacute;n de promotor inducida por el promotor del MMP-13 de tumor en el sitio de la AP-1. Este es el primer informe demostrando la Uni&oacute;n de YB-1 in vitro y en las c&eacute;lulas vivas a un mam&iacute;fero AP-1 objetivo gene y el primer informe de YB-1 regulaci&oacute;n de la promotora de la MMP-13.

Katherine K. Beifuss

Department of Molecular and Cellular Medicine

Texas A&M University System Health Science Center

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

Katherine K. Beifuss

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Molecular and Cellular Medicine

Texas A&M University System Health Science Center

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

Department of Molecular and Cellular Medicine