Die Trier Social Stress Test-Protokoll zur Induktion psychischer Stress

Zusammenfassung

Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll zur Induktion psychischen Stress bei den Teilnehmern, die es Forschern ermöglicht, psychologische, physiologische und neuroendokrine Reaktionen auf Stress innerhalb einzelner Teilnehmer oder zwischen den Gruppen zu messen.

Zusammenfassung

Dieser Artikel beschreibt eine psychische Belastung Protokoll für den Einsatz im Labor. Protokolle, dass die Forscher die biologische Pfade der Reaktion auf Stress in Gesundheit und Krankheit Studie ermöglichen, sind von grundlegender Bedeutung für den Fortschritt der Forschung in Stress und Angst. ¹ Obwohl zahlreiche Protokolle zur Induktion Stress-Reaktion im Labor bestehen, zu viele vernachlässigen einen naturalistischen Kontext oder auf Aspekte der sozialen und psychologischen Stress zu integrieren. Von psychischer Stress-Protokolle, Meta-Analyse legt nahe, dass die Trier Social Stress Test (TSST) die nützlich und angemessen standardisiertes Protokoll für die Untersuchung der Stresshormon-Reaktivität. ² In der ursprünglichen Beschreibung des TSST ist, wollten die Forscher Design und Evaluation eines Verfahrens induzieren kann eine zuverlässige Reaktion auf Stress in der Mehrzahl der gesunden Probanden. ³ Diese Forscher fanden heraus, Erhöhungen der Herzfrequenz, Blutdruck und einige endokrine Stressantwort markers in Reaktion auf die TSST (eine psychologische Stressor), um eine Kochsalzlösung (ein physikalischer Stressor) verglichen. ³ Obwohl die TSST modifiziert worden ist, auf die Bedürfnisse der verschiedenen Arbeitsgruppen gerecht zu werden, es besteht im Allgemeinen aus einer Wartezeit bei der Ankunft, vorausschauende Rede Vorbereitung, Vortrag Leistung und verbal Rechenleistung Zeiten, durch eine oder mehrere Erholungsphasen folgen. Das TSST, dass die Teilnehmer zur Vorbereitung und eine Rede halten, und verbal zu einem anspruchsvollen Rechenaufgabe in das Vorhandensein einer sozial evaluative Publikum ansprechen. ³ Soziale Bewertung und Unkontrollierbarkeit haben als Schlüsselkomponenten der Stress-Induktion wurde durch den TSST identifiziert. ⁴ In Verwendung für mehr als einem Jahrzehnt ist das Ziel des TSST systematisch induzieren eine Stress-Reaktion, um Unterschiede in der Reaktivität, Angst und Aktivierung der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse (HPA) oder sympathisch-Nebennieren-Mark (SAM)-Achse messen während der Aufgabe . ¹ Researcihr im Allgemeinen zu bewerten Veränderungen in selbst berichteten Angst, physiologischen Maßnahmen (zB Herzfrequenz), und / oder neuroendokrinen Indizes (z. B. das Stresshormon Cortisol) in Reaktion auf die TSST. Viele Forscher haben Speicheldrüsen Probenahme für die Stress-Marker wie Cortisol und Alpha-Amylase (ein Marker für die Aktivierung des autonomen Nervensystems) als Alternative zur Blutentnahme auf die verwirrende Stress des Blut-Sammlung Techniken reduzieren angenommen. Zusätzlich zu den Veränderungen durch eine individuelle Abschluss der TSST erfahren, können die Forscher Veränderungen zwischen den verschiedenen Behandlungsgruppen (z. B. klinische gegenüber gesunden Kontrollpersonen) oder die Wirksamkeit der Stress-Reduzierung Interventionen zu vergleichen. ¹

Protokoll

1. Einrichten

1. Alle Forschung sollte von den zuständigen Institutional Review Board oder menschlichen Probanden Prüfungsausschuss vor der Datenerfassung genehmigt werden.
2. Idealerweise sollten zwei Zimmer zur Verfügung, die TSST befragen. Ein komfortabler Warteraum zur Verfügung stehen sollte Teilnehmern vor Beginn des TSST und in der Rekonvaleszenz. Ein separater Besprechungsraum sollte während der Rede Vorbereitung, Rede Performance und Mathematik Teile der TSST eingesetzt werden, um der Neuheit und uncontrolability einzuführen.
3. Ordnen Sie die Interview-Raum, so dass die Teilnehmer werden vor die eidgenössischen Interviewer und Position Video-oder Audio-Aufnahmegeräte in das Gesichtsfeld des Teilnehmers. Laborkittel sollten für die Interviewer während des TSST tragen, um zu betonen, während der TSST erhöhen. Weisen Sie die Interviewer, Blickkontakt mit den Teilnehmern zu halten und alles unterlassen, was emotionale Gesichtsausdrücke während der TSST.
4. Überlegen Sie genau, the Forschungsfrage (n) bei der Auswahl abhängig Messungen. : Richtlinien für die Analyse und Veröffentlichung der verschiedenen Messungen der Reaktion auf Stress werden von mehreren Quellen (Richtlinien für die Veröffentlichung und Analyse der psychophysiologischen Maßnahmen werden von der Gesellschaft für Psychophysiologie Forschung bereitgestellt http://www.sprweb.org/journal/index. cfm # guidelines ). ⁵ Konsultation der diese Ressourcen bei der Planung von Experimenten wird empfohlen.
5. Richten Sie alle Geräte benötigt, um physiologische, psychologische oder endokrine Reaktionen auf die TSST aufzunehmen. Dieses Gerät kann (aber nicht beschränkt auf) Elektroden und elektronischen Geräten und / oder Software, um die Herzfrequenz, Herz-Kreislauf-Reaktivität, die Hautleitfähigkeit oder Antwort, Lidschlag, Muskelkontraktion / Ton, der Atmung usw., Papier und Bleistift oder elektronischen Versionen von psychologische Instrumente wie das State-Trait Anxiety Inventory; ⁶ Röhren und andere Sammlung Materialien für Urin-, Blut-oder Speichelproben,. oder Videoaufzeichnung Ausrüstung Für diese Demonstration werden wir mit drei führen Elektrokardiogramm (EKG)-Elektroden, um die Herzfrequenz während des TSST zu messen, und die wiederholte Verabreichung des State-Trait Anxiety Inventory, um psychologische Reaktion vor und nach dem Stressor zu messen. Wir nutzen eine einfache Recording-System entwickelt, um die physiologischen Reaktionen zu messen (Biopac MP36 System), um die Herzfrequenz aufzeichnen.
6. Wenn Blutproben (anstatt Speichel) während des Experiments gesammelt werden, sollten die Bemühungen für Schmerzen und Leiden bei der Erhebung weitestgehend einzuschränken. Blutentnahme Verfahren einführen können zusätzliche physische oder psychische Belastung, verwirrende Antwort auf die TSST.
7. Wenn der Teilnehmer ankommt, begrüßen sie ins Labor. Erhalten informed consent und Sitz der Teilnehmer bequem.
8. Sammeln demografische Informationen, Screening-Informationen oder zusätzlinal Ankunft Maßnahmen, die von Ihrem Experiment benötigt werden. Stellen Sie sicher, dass der Teilnehmer nicht für Nahrungsmittel oder Getränke (außer Wasser) in der letzten Stunde verbraucht, wenn das Sammeln Kortisol-Messungen. Eine kurze Zeit des Fastens ist empfehlenswert, wenn Sie sammeln werden Speichelproben für die Analyse. Änderungen des pH-Wertes mit sauren Speisen oder Getränken oder sichtbarer Verschmutzung verbunden mit genauen Messung der Speicheldrüsen Marker stören. Urin Toxikologie-Screening erforderlich, wenn die Maßnahmen von Interesse durch Medikamente oder andere Metaboliten verunreinigt werden kann. Informationen über Faktoren, die Stress-Reaktion (z. B. Medikamente, Krankheit, Schlaf, den letzten belastende Ereignisse, soziale Phobie) sollte auch bei der Screening-Teilnehmer beeinflussen können.

2. Pre-Stress-Messungen

1. Weisen Sie den Teilnehmer, um bequem warten Sie 45 Minuten im Wartezimmer. Sie können wählen, um die Teilnehmer mit Lesestoff wie Zeitschriften, die emo bietentional-neutral Inhalte oder anderen emotional neutral in diesem Zeitraum.
2. Nach dem 45-minütigen Wartezeit, zur Verwaltung der State-Trait Anxiety Inventory, um Vorspannung Angst zu bewerten. ⁶ Alternativ können auch andere Instrumente, die entworfen, um Statusänderungen in Stress, Angst oder Entspannung bewerten verabreicht werden kann (z. B. visuelle Analogskala) werden.
3. Sammle eine "Vorspannung" Speichelprobe. Weisen Sie den Teilnehmer, den Mund mit Wasser spülen. Geben Sie dem Teilnehmer eine 5-10 cm Abschnitt Trinkhalm und einem sauberen, Einweg 2,0 ml Polypropylen Röhrchen. Weisen Sie den Teilnehmer, den Kopf nach vorne geneigt, damit Speichel Pool auf dem Boden der Mundhöhle dann den Speichel durch den Strohhalm in die Flasche. Sammeln Sie ca. 1,5-2,0 ml des Speichels aus der Teilnehmerliste. Alternativ können Speichel durch Verwendung von absorbierenden zahnärztlichen Docht (oder ähnliches Material) und Unterweisung der Teilnehmer zu kauen oder zu sättigen das Material mit Speichel gesammelt werden. Wenn posSible, den Raum verlassen, um den Teilnehmer mit Privatsphäre. Label und speichern alle Speichel-Proben bei -20 ° C so schnell wie möglich.
4. Rekord 5 Minuten Vorspannung physiologische Messungen.

3. Das TSST

1. Wenn Sie verwenden möchten einen separaten Besprechungsraum (um den Stress Auswirkungen der TSST zu erhöhen), bringen die Teilnehmer aus dem Wartezimmer in die Interview-Raum.
2. Zu Beginn des TSST Rede Vorbereitungszeit, lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: "Das ist die Rede Vorbereitung Teil der Aufgabe, ihr seid geistig vorzubereiten fünf-minütigen Rede, warum Sie ein guter Kandidat für Ihr Traumjob wäre. Ihre Rede wird auf Video aufgezeichnet und durch ein Gremium von Richtern in öffentlichen Reden geschult überprüft werden. Sie haben 10 Minuten für die Vorbereitung und die Zeit beginnt jetzt. "
3. Rekord physiologische Messungen während der 10-minütigen Rede Vorbereitungszeit. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 10 Minuten und verlassen den Raum.
4. Nach 10 Minuten den Raum trägt einen Kittel zurück. Lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: "Das ist die Rede Teil der Aufgabe Sie sind mit einer Rede, warum Sie ein guter Kandidat für Ihr Traumjob wäre liefern Sie sollten für die gesamte Fünf-Minuten-Zeitraum zu sprechen... Ihre Zeit beginnt jetzt. " Die Stütze Videokamera sollte nun gedreht werden, um evaluative / Leistung Stress erhöhen.
5. Rekord physiologische Messungen während der 5-minütigen Rede Performance-Zeitraums. Wenn der Teilnehmer hört auf zu reden während der Rede, damit er oder sie bleiben für 20 Sekunden still. Wenn er oder sie nicht fortgesetzt wird gesprochen, prompt die Teilnehmer weiter zu sprechen, indem sie anweisen,: "Sie haben noch verbleibende Zeit."
6. Am Ende der 5-minütigen Rede Performance-Zeitraums, lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: "Während der letzten fünf Minuten math Teil dieser Aufgabe, die Sie gebeten, nacheinander subtrahieren Sie die Zahl 13 aus 1.022 werden Sie verbal.ly melden Sie Ihre Antworten laut, und bat darum, wieder ganz von 1.022, wenn ein Fehler gemacht werden. . Ihre Zeit beginnt jetzt: "Wenn die Teilnehmer einen Fehler macht, prompt ihnen mit:" Das ist falsch, dann starte gleich noch 1.022 "Set eine digitale Zeitschaltuhr für 5 Minuten..
7. Rekord physiologische Messungen während der 5-Minuten-Mathe Performance-Zeitraums.
8. Am Ende des Performance-Zeitraums Mathematik der TSST, sammeln eine "post-stress" Speichelprobe.
9. Verwalten Post-Stress-State-Trait Anxiety Inventory.

4. Post-Stress-Recovery-Messungen

1. Zurück Teilnehmer auf die ursprüngliche Wartezimmer. Während der ersten Erholungsphase, weisen die Teilnehmer bequem warten Sie 20 Minuten. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 20 Minuten und verlassen den Raum.
2. Zurück zu Wartezimmer nach 20 Minuten und sammeln eine "recovery 1" Speichelprobe.
3. In der zweiten Erholungsphase, weisen die Teilnehmer wieder bequem warten Sie 20 Minuten. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 20 Minuten und verlassen den Raum.
4. Zurück zu Wartezimmer nach 20 Minuten und sammeln eine "recovery 2" Speichelprobe.
5. Weisen Sie den Teilnehmer in die "Verwertung" State-Trait Anxiety Inventory abzuschließen.
6. Besprechen Sie die Teilnehmer, wie die wahre Natur des Experiments. Informieren Sie die Teilnehmer, dass ihre Leistung nicht aufgenommen wurde und dass keine Analyse ihrer Sprache oder Mathematik Leistung durchgeführt werden. Erklären Sie den Teilnehmer, dass die Aufgaben, mit denen sie vorgestellt wurden unzumutbar erschwert wurden und nicht auf die Teilnehmer der Eignung oder Fähigkeit zu reflektieren.

5. Data Analysis

1. Zur Analyse psychologische Maßnahmen, Gäste jeden Staat Trait Anxiety Inventory aus der Vorspannung, Post-Stress-und Recovery-Zeit Punkte. ⁶
2. Zur Analyse physiologische Messungen, Berechnung einer mittleren Herzfrequenz Punktzahl für jede der 5-minütigen "pre Stress", "Rede Vorbereitung", "Rede-Performance" und "math "Zeiten des TSST. Alternativ berechnen Mittelwerte für jede Minute des TSST oder messen die Herzfrequenz zu diskreten Zeitpunkten während des TSST.
3. Zur Analyse neuroendokrinen Maßnahmen Assay Speichel-Proben für die Hormon-Konzentration mit dem kommerziell erhältlichen EIA-Kits.

6 Optional:. Zusätzliche Cortisol Assay-Protokoll-Informationen (reproduziert aus Salimetrics Cortisol-Assay-Kit einfügen)

1. Bringen Sie alle Speicheldrüsen-Assay-Kit Reagenzien auf Raumtemperatur.
2. Bereiten Waschpuffer nach Montageanweisungen.
3. Bestimmen Platte Layout und Pipette 25 ul Standards und Kontrollen in die entsprechenden Wells in zweifacher Ausfertigung.
4. Thaw Speichelproben, vortexen, zentrifugieren bei 1.500 XG (@ 3,000 RPM) für 15 Minuten.
5. Je 25 ul einer klaren Flüssigkeit aus zentrifugierten Proben in die entsprechenden Wells in der Platte (in zweifacher Ausfertigung).
6. Enzymkonjugat und Pipette 200 ul in alle Vertiefungen.
7. Mix Platte für 5 Minuten bei 500 rpm und inkubieren für eine zusätzliche 55 Minuten.
8. Waschen und trocknen Sie die Platte 4 mal mit Waschpuffer.
9. Geben Sie 200 ul Tetramethylbenzidin (TMB)-Lösung in jede Vertiefung mit einer Mehrkanalpipette.
10. Mix der Platte 5 Minuten bei 500 Umdrehungen pro Minute und im Dunkeln inkubieren für eine zusätzliche 25 Minuten.
11. Dann werden 50 ul Stop-Lösung in jede Vertiefung zugeben und 3 Minuten bei 500 Umdrehungen pro Minute, um die Reaktionen zu stoppen.
12. Wischen Sie die Platte unten sauber und lesen Sie die Platte in einem Platten-Lesegerät bei 450 nm innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe Stop-Lösung.
13. Zur Berechnung der Cortisol-Konzentration, berechnet die durchschnittliche optische Dichte für alle Doppelbestimmungen. Subtrahieren der mittleren optischen Dichte der nicht-spezifische Bindung Brunnen aus dem Mittelwert der optischen Dichte der Null-, Standard-, Steuer-und Probenvertiefungen.
14. Berechnen Sie die prozentuale gebunden (B / Bo) für jeden Standard, jede Kontrolle und Probe, indem die durchschnittliche optische Dichte dieser Brunnen (B) von der durchschnittlichenAlter optische Dichte der Null-Brunnen (Bo). Bestimmen Sie die Konzentration der Kontrollen und Proben durch Interpolation unter Verwendung von Software in der Lage Logistik.

7. Repräsentative Ergebnisse:

Der Vertreter hier präsentierten Daten aus einer Durchsicht der Literatur und zwei Studien, die in unserem Labor im Laufe des Nachmittags mit gesunden erwachsenen männlichen Teilnehmern durchgeführt wurden zusammengestellt. Diese Daten sollen repräsentativ für die Ergebnisse, die gefunden mit dem Protokoll in diesem Artikel vorgestellt werden könnte.

Das TSST-Protokoll (Abbildung 1) induziert steigt in selbst berichteten Angst (wie von der State-Trait Anxiety Inventory gemessen; Abbildung 2), Herzfrequenz (Abbildung 3) und Cortisol-Konzentrationen (Abbildung 4). Das experimentelle Protokoll in Abbildung 1 dargestellt ist, soll ein Beispiel, wie verschiedene Messungen können während einer Datensammlung Sitzung mit dem TSST gemacht werden können. Der Zeitpunkt der Messung!ts und die Einbeziehung der verschiedenen Maßnahmen werden von der spezifischen Fragestellung diktiert werden. Wenn Sie eine Intervention, sollen Angst und / oder Stress-Reaktion, abgestumpft oder abgeschwächten Anstieg der diese Maßnahmen werden voraussichtlich zu reduzieren.

Abbildung 1. Experimental-Protokoll Hinweis: Trier Social Stress Test (TSST), State-Trait Anxiety Inventory (STAI); 5-minütigen Pre Drangperiode (PS); 10-minütigen Vorausschauende Drangperiode (Rede Vorbereitung) (AS); 5-Minuten-Rede Zeitraum. (S); 5-Minuten-Math Zeitraum (M).

Abbildung 2. Vertreter Zustand Angstwerte Hinweis:. Staat Anxiety Ergebnis aus 20-iten Staat Angst Maß für State-Trait Anxiety Inventory (STAI) berechnet Vertreter Noten spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur..

Abbildung 3. Vertreter Herzfrequenzdaten Hinweis:.. Herzfrequenz in Schlägen pro Minute (BPM) Repräsentative Werte spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur.

Abbildung 4. Vertreter Cortisol Daten Hinweis:.. Cortisol-Konzentration im UL / DL Repräsentative Werte spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur.

Diskussion

In diesem Artikel haben wir gezeigt, wie man die Trier Social Stress Test in einem gesunden Probanden befragen. Das TSST ist eine standardisierte Labor sozialen Stressor, die robust und zuverlässig erhöht in psychologischen, physiologischen und neuroendokrinen Maßnahmen induziert. Das TSST ist eine sinnvolle Alternative zu physischen Stressoren wie am kalten Presser Test oder Gehen auf dem Laufband, und reproduziert die mehr naturalistische psychische Belastung der Leistung in der Gegenwart eine wertende Publikum.

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bezeichnung des Geräts / Supply	Firma	Katalog-Nummer
BSL Psychophysiologie System, Mac OS Inklusive MP36 Datenerfassungseinheit und drei Kanal-EKG-Elektroden	Biopac Systems Inc.	BSLPSY-M
State-Trait Anxiety Inventory	Geist Garden, Inc.	Bieder-B
Cortisol Enzyme Immuno Assay Kit	Salimetrics	1-3002
2,0 ml Polypropylen Ampullen	Fisher Scientific	05 40B 146
BioRad Mikroplatten-Reader, Modell 680, mit Microplate Manager Software	BioRad	Plate Reader: 168 1000 Software: 1706800