Immunhistochemie auf Paraffinschnitten von Mouse Epidermis unter Verwendung von fluoreszierenden Antikörper

Zusammenfassung

Wir beschreiben eine zuverlässige Methode zur Immunolokalisation in der Epidermis sowohl für gefrorene und Paraffinschnitte, die wir verwenden sehr routinemäßig in unserem Labor modifiziert.

Zusammenfassung

In der Epidermis, ist Immunhistochemie ein effizientes Mittel zur Lokalisierung von spezifischen Proteinen, ihre relativen Expression Fach, nämlich die basale, suprabasalen und Stratum corneum Schichten. Die genaue Lokalisation innerhalb der Epidermis eines bestimmten Proteins verleiht Hinweise auf seine funktionale Rolle innerhalb der Epidermis. In diesem Kapitel beschreiben wir eine zuverlässige Methode zur Immunolokalisation in der Epidermis sowohl für gefrorene und Paraffinschnitte, die wir verwenden sehr routinemäßig in unserem Labor modifiziert. Paraffinschnitte in der Regel eine wesentlich bessere Morphologie, damit bessere Ergebnisse und Fotos, aber nicht alle Antikörper wird mit den harten Fixierung und Behandlung in ihrer Verarbeitung beteiligt zu arbeiten. Daher ist das Protokoll für gefrorene Schnitte ebenfalls enthalten. Innerhalb Paraffin Schnitte sind zwei Fixierung Protokolle beschrieben (Bouin und Paraformaldehyd); die Wahl der Fixateur wird direkt an den Antikörper-Spezifikationen beziehen und kann auch eine andere Befestigungsart benötigen.

Protokoll

Der vollständige Text Protokoll für diesen experimentellen Ansatz ist in Springer Protocols .