Zweidimensionale Röntgen-Angiographie, feine Gefäßstruktur mit einem Silikon Injektion Gummimischung zu prüfen

Zusammenfassung

Diese Studie stellt eine einfache zweidimensionale angiographischen Methode um feine vaskulären Strukturen mit einem Silikon Kautschuk Injektion zusammengesetzte und Weichgewebe Röntgensystem zu untersuchen.

Zusammenfassung

Angiographie ist ein wesentliches Instrument für die Untersuchung der vaskulären Strukturen in verschiedenen Forschungsbereichen. Das Ziel dieser Studie ist es, eine einfache angiographischen Methode für die Prüfung der feinen Gefäßstruktur fixierten, frisches Gewebe mit einem Silikon Kautschuk Injektion zusammengesetzte und Weichgewebe Röntgensystem einzuführen. Diese Studie konzentriert sich vor allem auf Klappe Territorien in der rekonstruktiven Chirurgie verwendet. Diese Studie beschäftigt Angiographie mit einer Silikon-Kautschuk-Injektion Verbindung in verschiedenen experimentellen Bedingungen mit Sprague-Dawley Ratten. Erstens ist 15 mL MV zusammengesetzte und 15 mL Verdünnungsmittel gemischt. Dann 1,5 mL die Härtemittel ist bereit, und ein 24G Katheter wird in die gemeinsame Halsschlagader der Ratte kanülierte. Ein Dreiwege Hahn dann an einen Katheter angeschlossen, und der röntgendichten Agent, nachdem er mit den vorbereiteten Härtemittel gemischt wird eingespritzt sofort ohne Verschütten. Schließlich verfestigt sich der Agent, die Probe wird geerntet und angiographischen Bild erhält man mit einem weichen Tuch Röntgenanlage. Diese Methode zeigt, dass qualitativ hochwertige Angiographie Darstellung von feinen vaskulären Strukturen leicht und einfach innerhalb in kurzer Zeit erreicht werden kann.

Einleitung

Prüfung der vaskuläre Strukturen wie Arterien und Venen, ist ein wichtiger Bereich von Interesse, besonders in der rekonstruktiven Chirurgie. In diesem Bereich wird weithin Lappenplastik durchgeführt. Daher ist angiographischen Bildgebung aktiv verwendet, um die Klappe Territorium, Angiosome und vaskulären Versorgung mit frischem Gewebe¹zu studieren. Insbesondere gab es kontinuierliche Bemühungen zu beobachten das feine Gefäßsystem, einschließlich der feinen Gefässe wie Perforationsladungen (Schiffe aus tiefen Gefäße die Haut zu erreichen), und ersticken Schiffe (Verbindung zwischen angrenzenden Angiosomes)² . Diese zwei Arten von Schiffen sind wichtig im Feld Perforator Flap Rekonstruktion und stehen im Mittelpunkt der Forschung^3,4.

In der Angiographie werden verschiedene Materialien verwendet. Erstens gibt es Indien Tinte, das ist hilfreich bei der Beobachtung der Anatomie der Blutgefäße. Jedoch ist es strahlendurchlässig, so angiographischen Bilder abgerufen werden können. Die häufig verwendete röntgendichten Materialien sind Bleioxid und Barium. Jedoch Toxizität ist ein entscheidender Nachteil von Bleioxid, und es ist unbequem, wenn gemischt mit Wasser durch seine pulverisierte Form zu verwenden. Barium ist frei von Toxizität; Es ist jedoch nicht sehr machbar, da es nach Verdünnung verwendet werden soll. Beide röntgendichten Materialien überschreiten nicht Kapillaren; Daher, wenn eine gesamte Gefäßstruktur analysiert werden muss, ist es notwendig zu injizieren sie in die Arterie und Vene separat⁵. Darüber hinaus verursachen die beiden Materialien Farbstoff Leckage bei anatomischen Präparation, daher sollten sie mit Gelatine kombiniert werden. Blei-Oxid-Gelatine und Barium-Gelatine-Mischungen nehmen mindestens 1 Tag,^1,6,7zu festigen.

Computertomographie (CT)-Angiographie kann ist eine weitere verbreitete Methode und bei der Betrachtung von dreidimensionalen (3D) Strukturen⁸. Venen ist aber nicht effektiv⁵visualisiert. In dieser Modalität ist klare Visualisierung des feinen Gefäßsystems wie Drossel Venen schwer, außer bei Nutzung bestimmten Geräte. Die Notwendigkeit teurer Ausrüstung kann ein Nachteil sein, so dass die CT-Angiographie in allen Labors verwendet werden kann. Im Gegensatz dazu das Weichgewebe Röntgensystem ist relativ preiswert und kann leichter bedienen. Dieses System ist optimal für die Anzeige von Weichteilen und liefern Bilder mit höherer Qualität weiches Gewebe als die einfache Röntgenanlage. Obwohl das Weichgewebe Röntgensystem selbst 3D-Bilder zeigen kann, kann es helfen, deutlicher als CT-Angiographie feine vaskuläre Strukturen sichtbar zu machen. Daher haben wir das Weichgewebe Röntgensystem in vielen Experimenten, vor allem in verschiedenen Klappe Modelle und Grundlagen der Anatomie^2,9verwendet.

Zu guter Letzt hat die Verwendung von Silikon-Kautschuk-Injektion zusammengesetzte Angiographie zahlreiche Vorteile. Da verschiedene Farbstoffe vorbereitet sind, können injiziert werden und unterscheidbare Farben wie Tusche anzeigen. Daher ist es möglich, gleichzeitig Studium der Anatomie und Angiographie. Es kann sowohl durchlaufen Kapillaren und Venen sichtbar gemacht werden, zu ermöglichen, die Untersuchungen von feinen vaskulären Strukturen ermöglichen. Im Gegensatz zu der Gelatine-Mischung verfestigt sich die Silikon-Kautschuk-Injektion zusammengesetzte innerhalb kurzer Zeit, ca. 15 Minuten, ohne zusätzliche Verfahren. Der gesamte Prozess wird in der schematischen Abbildung in Abbildung 1zusammengefasst.

Protokoll

Alle Verfahren, einschließlich tierische Themen wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Ausschüsse der Seoul National University Hospital (IACUC Nr. 10-0184) genehmigt. Dieses Protokoll ist für die Erforschung von Klappe Gefäßsystem optimiert. Dieses Beispiel basiert auf einem vier-Gebiet Klappe Modell in unseren früheren Berichten.

(1) zur Gründung eines Klappe Zustand

Hinweis: Es ist wichtig, um eine vaskuläre Veränderung in einem Rattenmodell Klappe 4 bis 5 Tage vor sichtbar Schätzung^6,7zu generieren.

1. Verwenden Sie 7 Wochen alten männliche Sprague-Dawley Ratten mit einem Gewicht von 200-250 g.
2. Die Ratten mit Isofluran bei ca. 3-5 % für Induktion und 2-2,5 % für die Wartung zu betäuben. Führen Sie einen Zeh Prise Rückzug Reflexion Test um zu bestätigen, dass die Tiefe der Narkose ausreicht.  Injizieren Sie Meloxicam 5mg/kg subkutan zur Schmerzlinderung.
3. Rasieren Sie den Stamm mit einem Tier Haarschneider und Haarentfernungs-Creme (Thioglycolic Säure, 80 %). Bereiten Sie ein steriles OP-Feld mit 10 % Povidon-Jod und ein steriles Tuch auf einen sterilen Zustand in den Verfahren zu erhalten. Gelten Sie eine Tierarzt Salbe für die Augen, um Trockenheit zu verhindern. Halten Sie alle Instrumente in sterilem Zustand.
4. Herstellen der entsprechenden Klappe Zustand.
   1. Markieren Sie eine umlaufende Haut Lappendesign aus dem Unterbauch an der Rückseite messen 4 x 12 cm. suchen Sie die Mitte der Klappe auf halbem Weg zwischen dem Xiphoid Prozeß und seinen Penis (Abbildung 1).
   2. Machen Sie der Einschnitt markiert mit einer chirurgischen Klinge.
   3. Die Klappe mit einer Schere, einschließlich der Haut und Panniculus Carnosus zu sezieren.
   4. Rund um die vaskuläre Pedikels [bilaterale tief Zirkumflex Beckenkamm (DCI) und bilateralen oberflächlichen minderwertigen epigastrischen (SIE) Schiffe] am Unterbauch zu sezieren Sie und setzen Sie der vaskulären Pedikels eine chirurgische Lupe mit mikrochirurgischen Instrumenten aus.
   5. Pflegen oder die Schiffe je nach den gewünschten Bedingungen verbinden.
   6. Teilen Sie die Klappe an der dorsalen Mittellinie mit einem chirurgischen Messer oder Schere.
   7. Legen Sie die Klappe in seine ursprüngliche Position und befestigen Sie es mit einem Haut-Hefter.
   8. Wenden Sie eine topische Salbe auf die Operationswunde für 3 Tage an und bieten Sie postoperative Analgesie durch die Gabe von Meloxicam bei einer Dosis von 5 mg/kg oral einmal täglich für 3 Tage.
   9. Bestätigen Sie, dass die Ratte ausreichend zur Aufrechterhaltung der sternalen liegen wieder zu sich kommt. Die Ratte in den Käfig zurück und verschieben Sie sie in das Wohngebiet. Anwenden eines elisabethanischen Kragen an jedem Ratten.

2. Vorbereitung der Instrumente

1. Bereiten Sie einen 24G Katheter und ein drei-Wege-Hahn.
2. Bereiten Sie Moskito Pinzette, kleine Schere, ein chirurgisches Skalpell und chirurgischen Klinge.
3. Vorbereiten des angiographischen Agents (Silikon-Kautschuk Injection zusammengesetzten).
   1. Mischen Sie des Farbe-Agents mit dem Verdünnungsmittel in der sterilen Probe Sammlung Cup. Eine gleiche Quantität von Gewicht zu gewährleisten: 15 mL Farbe Agent zusammengesetzte und 15 mL MV Verdünnungsmittel in eine Ratte (Sprague-Dawley Ratten, 200-250 g).
   2. Fügen Sie die Härtemittel pro 5 % Gewicht oder Volumen der Mischung Lösung unmittelbar vor der Injektion: 1,5 mL Härtemittel in eine Ratte (Sprague-Dawley Ratten, 200-250 g).

(3) Ratte Arterie Vorbereitung

1. Verwenden Sie Isofluran, um die Ratten (ca. 3-5 % für Induktion) und 2-2,5 % für die Wartung zu betäuben. Führen Sie einen Zeh Prise Rückzug Reflexion Test um zu bestätigen, dass die Tiefe der Narkose ausreicht.
2. Rasieren Sie den Hals mit einem Tier Haarschneider und Haarentfernungs-Creme (Thioglycolic Säure, 80 %).
3. Die gemeinsame Halsschlagader¹⁰aussetzen.
   1. Machen Sie einen 2-cm-Mittellinie Schnitt zwischen die Schulterblätter.
   2. Sezieren Sie, tiefer mit Moskito-Zange und stumpfe Scheren, bis der Speicheldrüse Komplex ausgesetzt ist.
   3. Einfahren Sie der Speicheldrüse und unverblümt längs sezieren Sie den Omohyoid Muskel zu.
   4. Um die gemeinsame Halsschlagader zu sezieren.
4. Haken Sie cephalic und kaudalen Rand die gemeinsame Halsschlagader mit schwarzer Seide und kleben Sie es.
   1. Ein Unentschieden auf proximale Naht und Traktion um Stauungen der Arterie zu erhalten.
   2. Bereiten Sie eine Seide Naht an der kaudalen Seite zur Sicherung von 24G Katheter.

4. Kanülierung

1. Cannulate der vorbereiteten Halsschlagader mit einem Katheter 24G.
2. Festziehen Sie die vorgefertigte Krawatte in der kaudalen Seite und darauf achten Sie, dass den Katheter nicht während der Injektion zu entfernen.
3. Bereiten Sie die Härtemittel (Schritt 1.3.2).
4. Sichere Verbindung der drei-Wege-Hahn mit dem Katheter.
   1. Durch Zugabe von Unterdruck mit einer leeren Spritze regurgitated Blut in den Katheter zu bestätigen.

5. Injektion

1. Die Silikon-Kautschuk-Injektion zusammengesetzte zu injizieren, bis die Farbe der Augen und des Fußes verändert hat.
   Hinweis: Die Farbe zu ändern erscheint im Laufe des injizierten Flüssigkeit (Einspritzmenge ist etwa 25-30 mL für jede Ratte).
2. Sperren Sie der Dreiwege Hahn und warten Sie, bis der Agent erstarrt.
   1. Achten Sie darauf, dass Sie nicht mit dem Agent zu verunreinigen, vor allem, wenn die Spritze aus der drei-Wege-Ventil zu entfernen. Verwenden Sie eine schützende Barriere wie Gaze oder Vinyl, um die Injektion Raum von seiner Umgebung zu trennen.
      Achtung: Verunreinigungen erschwert, die angiographischen Bild zu analysieren, weil die Verbindung Radio-opak ist.
   2. Bestätigen Sie die Einstellung der Herzschlag und die Atmung. Stoppen Sie die Narkose.
   3. Beobachten Sie die Rate der Härte mit dem verbleibenden Mittel als Referenz (ca. 15 min benötigt).

6. Ernte der Probe

1. Machen Sie einen Schnitt mit einem chirurgischen Klinge zu Panniculus Carnosus 1 cm außerhalb der Klappe, damit vaskuläre Struktur im Inneren der Klappe nicht beschädigt.
2. Sezieren Sie entlang der zuvor sezierten Ebene aus Schritt 1.4 (unter der Panniculus Carnosus Ebene) und ernten Sie das Gewebe einschließlich der Klappe und vaskuläre Pedikels mit einer Schere (die Gefäßstruktur beinhaltet die Klappe) zu.
3. Verbinden Sie den Stiel der Klappe mit einer 5-0 Seide Naht und trennen Sie die Klappe aus dem Körper zu. Achten Sie darauf, nicht die Gefäßstruktur beschädigt.

7. Aufnahme der angiographischen

1. Die Probe, um sicherzustellen, dass es nicht klappen, und legen Sie sie vorsichtig auf den chirurgischen Faltenwurf mit Pinzette verteilt.
2. Nehmen Sie eine Röntgen-Bild.
   1. Übertragen Sie die Probe auf die Filmkassette zur Ladefläche Probe liegen.
   2. Legen Sie das Weichgewebe Röntgensystem auf 60 kVp, 5 mA und 5 s Belichtung.
3. Den Film in der Dunkelkammer mit einer automatischen Entwicklungscomputer zu entwickeln.
4. Scannen Sie den Film mit der höchsten Auflösung möglich.

8. Analyse der Bild^6,7,11

1. Unterscheiden Sie Arterien und Venen, basierend auf die Kontinuität der Strömung und Durchmesser.
   1. Starten Sie von der Zufluss des Pedikels Arterie und Fokus auf dem Ziel-Schiff geprüft wird.
   2. Messen Sie die Durchmesser mit Software durch Öffnen des Bildes.
      1. Klicken Sie auf die Schaltfläche " geraden " und zeichnen Sie eine Linie auf dem Skalabalken, der die gleiche Länge.
      2. Öffnen der analysieren | Skala Menü und geben Sie den Wert des Maßstabs in Entfernung bekannt.
      3. Klicken Sie auf die Schaltfläche " geraden " und zeichnen Sie eine Linie auf das Schiff, von dem der Durchmesser gemessen werden muss.
      4. Öffnen der analysieren | Maßnahme Menü und bestätigen Sie die Länge.
2. Analysieren Sie die vaskuläre Muster unter Berücksichtigung der Klappe Überlebensraum.

Ergebnisse

Durch dieses Protokoll folgend wurde die Klappe Vaskularität des Sprague-Dawley Ratten untersucht. Eine umlaufende Hautlappen aus dem Unterbauch an der Rückseite, die 4 x 12 cm gemessen wurde basierend auf unseren früheren Berichten gekennzeichnet. Jede Probe wurde in eine andere vaskuläre Erkrankung.

Alles, was die Klappen erhoben wurden anhand der Tiefe Zirkumflex Beckenkamm Arterie (DCIA) und Vene und dann mit Kompressor ...

Diskussion

Silikon-Kautschuk-Injektion zusammengesetzte Angiographie problemlos durchgeführt werden kann, erfordert keine teure Ausrüstung und bietet viele Vorteile. Im Gegensatz zu der präoperativen und intraoperativen Bewertungen der Patienten können unter bestimmten Bedingungen, ermöglicht vielfältige und umfassende Studien Experimente mit Tieren und Kadaver Angaben. Die Klappe-Modell mit Ratten ist besonders wertvoll für Kliniker, da Änderungen in verschiedenen Kontexten vor klinischen Anwendungen⁶

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-112	White color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-117	Orange color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-120	Blue color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-122	Yellow color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-130	Red color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-132	Clear agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-Diluent	Diluent
MICROFIL CP-101 For Cast Corrosion Preparations	Flow Tech Inc.	CP-101	Curing agent
SOFTEX X-ray film photographing inspection equipment	SOFTEX	CMB-2	Soft tissue x-ray system
Film	Fujifilm	Industrial X-ray Film (FR 12x16.5cm)
Automatic Development Machine	Fujifilm	FPM 2800
Rat			Sprague-Dawley rat weighing 200-250 g
Three-way stopcock
24-guage catheter
Image J	National Institutes of Health		https://imagej.nih.gov/ij/