Ein Modell eines abdominalen Aortenaneurysmas der Maus durch periadventielle Calciumchlorid- und Elastase-Infiltration

Zusammenfassung

Dieses Manuskript stellt ein Protokoll zur Etablierung eines Modells für ein abdominales Aortenaneurysma der Maus unter Verwendung von Calciumchlorid und Elastase vor, das die Vorteile früherer Modellierungsmethoden kombiniert. Dieses Modell kann verwendet werden, um die pathophysiologischen Mechanismen zu untersuchen, die abdominalen Aortenaneurysmen zugrunde liegen.

Zusammenfassung

Das abdominale Aortenaneurysma (AAA) ist eine lebensbedrohliche Erkrankung, die mit hohen Sterblichkeitsraten einhergeht. Sie zeichnet sich durch eine dauerhafte Erweiterung der Bauchschlagader mit einer Zunahme des Arteriendurchmessers um mindestens 50% aus. Verschiedene Tiermodelle von AAA wurden eingeführt, um die pathophysiologischen Veränderungen nachzuahmen und die zugrunde liegenden Mechanismen von AAA zu untersuchen. Unter diesen Modellen werden die Calciumchlorid (CaCl₂)- und Elastase-induzierten AAA-Modelle häufig bei Mäusen verwendet. Diese Methoden haben jedoch gewisse Einschränkungen. Die traditionelle intraluminale Perfusion der porzinen Pankreas-Elastase (PPE) ist mit hohen technischen Schwierigkeiten und einer hohen Rupturrate verbunden, während die periadventitielle Verabreichung von PSA zu inkonsistenten Ergebnissen führt. Darüber hinaus fehlen dem CaCl_{2-induzierten} AAA-Modell humane AAA-Merkmale wie Atherothrombose und Aneurysmaruptur. Daher wurde die kombinierte Anwendung von CaCl₂ und PSA als Ansatz vorgeschlagen, um die Erfolgsraten zu erhöhen und eine größere Durchmesservergrößerung in AAA-Tiermodellen zu induzieren. Dieses Manuskript stellt ein umfassendes Protokoll zur Etablierung eines Maus-AAA-Modells durch periaortale Infiltration von PPE und CaCl₂ im infrarenalen Segment der abdominalen Aorta vor. Durch die Befolgung dieses Protokolls können wir eine AAA-Bildungsrate von ca. 90% bei technischer Einfachheit und Reproduzierbarkeit erreichen. Weitere Ultraschall- und histologische Experimente bestätigen, dass dieses Modell die morphologischen und pathologischen Veränderungen, die bei humaner AAA beobachtet wurden, effektiv repliziert.

Einleitung

Ein Bauchaortenaneurysma (AAA) ist definiert als eine Durchmesserzunahme von mehr als 50 % oder ein maximaler Aortendurchmesser von mehr als 3 cm in der Bauchaorta. Diese Erkrankung stellt eine erhebliche Bedrohung für das Leben dar, mit einer Sterblichkeitsrate von etwa 90 % nach Aneurysmaruptur ^1,2,3. Derzeit sind die offene chirurgische Reparatur und die endovaskuläre Aortenreparatur (EVAR) die einzigen verfügbaren Eingriffe für AAA-Patienten ^4,5,6

Protokoll

Das Tierversuchsprotokoll entsprach dem National Institute of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Pub No. 86/23, 1985) und wurde vom Institutional Animal Care and Use Committee des West China Hospital der Sichuan University (Zulassungsnummer 202311300012) genehmigt. Für diese Studie wurden acht bis zehn Wochen alte männliche C57/B6J-Mäuse verwendet. Die Einzelheiten zu den verwendeten Reagenzien und Geräten sind in der Materialtabelle aufgeführt.

1. Präoperative Vorbereitung

1. Holen Sie sich die Tiere und füttern Sie sie mit normalem Futte....

Diskussion

Die Erforschung der molekularen Mechanismen von AAA erfordert ein stabiles Tiermodell. Folglich wurden seit seiner ersten Entwicklung durch Economou et al. in den 1960er Jahren zahlreiche AAA-Tiermodelle etabliert²⁹. Unter diesen Modellen wird CaCl₂ aufgrund seiner Wirtschaftlichkeit, technischen Einfachheit und zuverlässigen Reproduzierbarkeit häufig bei Nagetieren eingesetzt. Es hat sich jedoch gezeigt, dass die perivaskuläre CaCl-2-Infi.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anesthesia Machine	RWD	R550
Butorphanol	Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd	220608BP	1ml: 1mg
C57BL/6JGpt Male Mice	GemPharmatech	N000013
Calcium Chloride	Sigma Aldrich	C4901	100 g
Carprofen	MCE	HY-B1227	100 mg
Chow Diet	Dossy Experimental Animals Co.Ltd
Digital Caliper	Greener	IP54
Ethanol	Jinhe Pharmaceutical Co.Ltd	539682	75%/500 mL
EVG Staining Kit	Solarbio	G1597
GraphPad Prism	Graphpad		Ver 9.0.0
H&E Staining Kit	Servicebio	G1076
Insulin Syringe	BD	2143420
Isoflurane	RWD	R510-22-4	100 mL
Masson Staining Kit	Servicebio	G1006
Normal Saline	Servicebio	G4702	500 mL
Paraformaldehyde	Biosharp	BL539A	4%/500 mL
PBS, 1x	Servicebio	G4202	500 mL
Porcine Pancreatic Elastase	Sigma Aldrich	E1250	100 mg
Povidine Iodine	Yongan Pharmaceutical Co.Ltd		5%/100 mg
Prolene Polypropylene Suture	Ethicon LLC	8709H
Rodent Ultrasound System	Fujifilm	Vevo 3100LT
Stereo Microscope	Olympus	SZ61
Ultrasonic Couplant	Keppler	KL-250	250 g