Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Beginnen Sie mit der elektroporationsbasierten DNA-Plasmaabgabe, indem Sie ein quadratisches Stück Paraffinfolie auf den Tisch legen und das Elektrodengel auf die Folie drücken. Tragen Sie dann eine großzügige Menge des Elektrodengels auf jedes Paddel auf, um die Elektrodenpaddel vollständig zu bedecken. Halten Sie dann den Welpen, dem die Plasmid-DNA-Mischung injiziert wurde, in der nicht-dominanten Hand, wobei Sie die Finger hinter dem Kopf halten.

Um den Kopf des Welpen für die Elektroporation zu positionieren, schieben Sie vorsichtig einen Finger auf die nächste dorsale Seite, hinter dem Kopf, und positionieren Sie die positive Elektrode außerhalb des Kopfes, wo der Ventrikel anvisiert wird. Legen Sie die Elektrode über das Auge des Welpen und drücken Sie die Elektrodenpaddel leicht auf den rostralen Teil des Kopfes des Welpen. Drücken Sie das Elektroden-Fußpedal, um die Elektroporation zu starten.

Drehen Sie die Elektrodenpaddel bei jedem Impuls leicht gegen den Uhrzeigersinn, so dass sich das positive Paddel in Richtung Oberseite des Kopfes bewegt. Nach dem letzten Impuls entfernen Sie die Paddel und legen sie beiseite. Die Mäuse waren fünf Monate nach der Elektroporation moribund, wobei das vollständige Tumorwachstum durch das Reporterprotein und die histologische Analyse nachgewiesen wurde.