Adipose-Derived Stem Cell Differentiation to the Adipogenic Lineage

Beginnen Sie mit der Aussaat einer Sechs-Well-Platte mit 10.000 Stammzellen aus Fettgewebe pro Quadratzentimeter. Sobald die Zellen zu 60 bis 80 % zusammenfließen, fügen Sie das Differenzierungsmedium hinzu. Waschen Sie die Zellen am 12. Tag mit PBS und inkubieren Sie sie mit 500 Mikrolitern 4%Formalin für eine Stunde bei Raumtemperatur.

Sobald die Zellen mit destilliertem Wasser gewaschen sind, waschen Sie sie fünf Minuten lang mit 60%igem Isopropanol und lassen Sie sie trocknen. Fügen Sie 500 Mikroliter 0,5%igen ölroten O-Färbefarbstoff hinzu, der mit 60%Alkohol verdünnt ist. Nach der Inkubation bei Raumtemperatur werden die Vertiefungen zweimal mit einem Milliliter destilliertem Wasser gewaschen und die Platte unter einem inversen Mikroskop betrachtet.

Aus Fettgewebe gewonnene Stammzellen differenzierten sich innerhalb von 48 Stunden in Richtung der adipogenen Linie und zeigten eine reduzierte Zellgröße und eine abgerundete Form. Nach sieben Tagen waren Lipidvesikel sichtbar, die 12 Tage nach der Differenzierung positiv für die Ölrotfärbung waren.