Cryosectioning of the Dorsal Root Ganglion (DRG)

Beginnen Sie die Kryosektion, indem Sie mit einem kleinen Pinsel, der auf 20 Grad Celsius vorgekühlt ist, die optimale Schnitttemperatur des DRG-Abschnitts nach unten halten. Berühren Sie vorsichtig die Unterseite des Abschnitts mit dem Ende einer Pinzette bei Raumtemperatur, damit sie an der Oberfläche der Plattform haftet. Als nächstes legst du langsam einen Objektträger aus geladenem Glas über den Abschnitt.

Sobald der Abschnitt am Schlitten klebt, ziehen Sie den Schlitten vorsichtig nach hinten. Befolgen Sie den gleichen Vorgang, um mehr DRG-Abschnitte auf die Folie zu bekommen, ohne die Abschnitte zu überlappen. Die korrekte Platzierung der DRG-Schnitte auf den Objektträgern zeigt sich dort, wo die Gewebe den DRG-Abschnitt und das OCT anderer DRG-Schnitte nicht überlappen.

Das konfokale Fluoreszenzmikroskopiebild zeigte die Qualität der DRG-Schnitte, die mit diesem Protokoll erhalten wurden. Mit dieser Technik können die immunhistochemischen Untersuchungen der DRG mit verschiedenen Antikörpern durchgeführt werden.