Nehmen Sie zunächst einen Objektträger mit polymerisiertem, archiviertem frischem Gewebe oder paraformaldehydfixiertem Mäusehirngewebe. Tragen Sie einen Augenschutz und verwenden Sie eine Rasierklinge, um die beiden Glasobjektträger der Gelierkammer zu trennen. Schneiden Sie das leere Gel um das Gewebe herum, um das Volumen zu minimieren, und stellen Sie sicher, dass es asymmetrisch geschnitten wird, um die Ausrichtung des Gels nach der Homogenisierung zu verfolgen.
Heben Sie das Gewebe mit dem Gel vorsichtig mit einer Rasierklinge vom Objektträger ab. In ein zwei Milliliter Zentrifugenröhrchen überführen. Füllen Sie das Röhrchen bis zum Rand mit auf 80 Grad Celsius vorgewärmtem Homogenisierungspuffer.
Anschließend wird die Probe durch Schütteln bei 80 Grad Celsius für acht bis 60 Stunden inkubiert. Gießen Sie den Inhalt des Zentrifugenröhrchens in eine einzelne Vertiefung einer sechsfachen Kunststoff-Zellkulturplatte und entfernen Sie den Denaturierungspuffer mit einer Transferpipette. Um das restliche SDS vollständig aus dem Hydrogel zu entfernen, waschen Sie die Probe in einer 1%igen nichtionischen Tensidlösung.
Zum Schluss wird die Probe in PBS und 0,02 % Natriumazid bei vier Grad Celsius gelagert.
