Beginnen Sie mit der Entnahme des Spenderherzens für Neugeborene, indem Sie die Ratte betäuben und sterilisieren und einen horizontalen Schnitt am Xiphoid mit einem 15-Klingen-Skalpell unter einem 12,5-fachen Operationsmikroskop machen. Als nächstes machst du mit einer Schere seitlich bis zu den Achselhöhlen auf beiden Seiten vertikale Einschnitte. Entfernen Sie die vordere Brustwand mit einem weiteren horizontalen Schnitt unterhalb des Halses.
Präparieren Sie die untere Hohlvene (IVC), die rechte und linke obere Hohlvene (SVC) und die Lungengefäße mit einer Schere. Einkreisen und ligieren Sie stumpfe Gefäße mit einer 7-0-Seidennaht. Drücken Sie das Diaphragma mit einer Pinzette leicht nach unten und verabreichen Sie drei Milliliter eiskalte, kaliumreich modifizierte Krebs-Henseleit-Lösung in den rechten Vorhof, indem Sie die IVC mit einer 30-Gauge-Nadel punktieren.
Schneiden Sie die IVC-, SVC- und Lungengefäße mit einer Schere ab. Stellen Sie die richtige Länge sicher, indem Sie die Lungenarterien und die Aorta distal des Truncus brachiocephalica mit einem Skalpell der Nummer 11 so weit wie möglich durchtrennen. Spülen Sie das Herz mit der eiskalten kardioplegischen Lösung mit einer Drei-Milliliter-Spritze.
Legen Sie die betäubte Ratte auf ein schräges Regal. Befestigen Sie die Vorderzähne mit einer Schnur und positionieren Sie den Kopf in Richtung des Chirurgen. Platzieren Sie das Licht an der Außenseite des Halses im Bereich der Stimmbänder.
Fassen Sie die Zunge mit zwei Fingern und drücken Sie sie sanft nach oben und links, um eine optimale Sicht auf die Intubation zu gewährleisten. Verwenden Sie nun eine 18-Gauge-Kanüle mit zwei Zoll Durchmesser für eine 100 bis 150 Gramm schwere Ratte und sichern Sie den Intratrachealtubus mit Klebeband. Schließen Sie die Intubationskanüle an das Beatmungsgerät für Kleintiere an und passen Sie die Einstellungen gemäß den Anweisungen des Herstellers an die Größe des Tieres an.
Nach der Intubation der Ratte führen Sie eine Mittellinien-Laparotomie mit einem 15-Klingen-Skalpell durch, um den Hautschnitt vorzunehmen. Öffnen Sie die vordere Bauchdecke mit einer Schere und mobilisieren Sie den Darm in Richtung des rechten oberen Quadranten. Als nächstes legen Sie die retroperitoneale Bauchaorta und die IVC mit Wattestäbchen-Applikatoren frei.
Bedecken Sie den Darm mit warmer, mit Kochsalzlösung getränkter Gaze und verwenden Sie Retraktoren, um eine optimale Freilegung der IVC und der Bauchschlagader aufrechtzuerhalten. Führen Sie nun eine stumpfe Dissektion der infrarenalen IVC und der abdominalen Aorta bis zur Bifurkation durch. Ligatieren Sie stumpfe infrarenale verzweigte Arterien und Venen mit einer 10-0-Nylonnaht.
Transportieren Sie das entnommene Spenderherz in einem sterilen Operationsbecken mit Krebs-Heneseleit-Puffer zum Operationsfeld. Stellen Sie sicher, dass das Spenderherz intermittierend mit eiskalter kardioplegischer Lösung gespült wird. Als nächstes trennen Sie den Lungenstamm und die absteigende Aorta mit einer Mikroschere und spülen das Spenderherz mit eiskalter kardioplegischer Lösung.
Als nächstes legen Sie vier atraumatische Gefäßklemmen an den distalen und proximalen Segmenten der infrarenalen Aorta und IVC an. Führen Sie eine Aortotomie mit einer Mikroschere durch, um zwei kleine horizontale Schnitte zu machen. Platzieren Sie dann das Spenderherz auf der linken Seite der Aorta.
Befestigen Sie die infrarenale Aorta des Empfängers und die aufsteigende Aorta des Spenders und seitlich an der 12- und 6-Uhr-Position der Aortotomie mit Nähten. Fahren Sie mit der dritten und vierten Naht an der Drei- und Neun-Uhr-Position fort und drehen Sie das Herz nach der dritten Naht vorsichtig auf die linke Seite der Aorta. Schließen Sie die arterielle Anastomose ab, indem Sie jedem Zwischenraum ein bis zwei Nähte hinzufügen.
Drehen Sie die Ratte nun gegen den Uhrzeigersinn, so dass der Kopf zur linken Hand des Chirurgen zeigt. Verschieben Sie das Herz des Spenders auf die linke Seite der Bauchschlagader, um eine optimale Sicht auf die IVC zu erhalten. Führen Sie eine Venotomie an der IVC durch, die etwas proximal zur Aortenanastomose liegt.
Verwenden Sie eine 11-fache Klinge für die Punktion und eine Mikroschere, um die Größe entsprechend dem Lungenrumpfdurchmesser des Spenders anzupassen, und spülen Sie das intrakovale Lumen mit heparinisierter Kochsalzlösung. Als nächstes führen Sie die venöse Anastomose zwischen der IVC des Empfängers und dem Lungenrumpf des Spenders durch, indem Sie unterbrochene 11-0-Nylonnähte an der Rückwand des Gefäßes platzieren, beginnend bei der 12- und 6-Uhr-Position. Platzieren Sie eine durchgehende 11-0-Nylonnaht an der Vorderwand, legen Sie resorbierbare Gelatine-Schwammstreifen über die Anastomosen und entfernen Sie die mikrovaskulären Klemmen, beginnend mit den distalen.
Stellen Sie sicher, dass sich die Herzkranzgefäße füllen und das Herz des Spenders kurz nach dem Lösen der proximalen Klemmen zu schlagen beginnt. Üben Sie mit einem Wattestäbchen-Applikator leichten Druck auf die Schwämme aus, um eine optimale Blutstillung zu erreichen. Legen Sie den Darm vorsichtig zurück in den Bauchraum und achten Sie darauf, die arterielle und venöse Anastomose nicht zu verzerren.
Schließen Sie die Bauchdecke und lassen Sie das Tier sich erholen. Gezeigt ist ein horizontaler Schnitt des Spendertransplantats, der auf mittelventrikulärer Ebene des rechten und linken Ventrikels reseziert wurde. Die histologische Analyse zeigte, dass das endokardiale Fibroelastosegewebe hohe Mengen an organisierten Kollagen- und Elastinfasern aufwies.
Endokard-Fibroelastis-Gewebe, doppelt gefärbt für VE-Cadherin und alpha-SMA. CD-31, Phospho-SMAD2 und SMAD3, CD-31 und Schnecke oder Schnecke zeigten einen Übergang von Endothel zu Mesenchym an.
