Beginnen Sie damit, die Eierschalen von befruchteten weißen Leghorn-Hühnereiern vorsichtig mit fusselfreien, mit Ethanol getränkten Tüchern zu reinigen. Bebrüten Sie die Eier stumpf bis zum gewünschten Stadium, in der Regel HH20 bis 21. Bevor Sie mit dem Eingriff beginnen, bereiten Sie die erforderliche Anzahl von Knoten vor, indem Sie einen losen Überhandknoten in eine 1,5 Zentimeter lange 10-Null-Naht binden.
Achten Sie darauf, dass der Knoten nicht fest sitzt und groß genug ist, um über die Atrien zu passen. Öffne die Eierschale vorsichtig mit dem umgekehrten Ende der Pinzette und stütze das Ei gut ab, um unerwünschte Risse zu vermeiden. Öffne ein Fenster vom stumpfen Ende des Eies und entferne sowohl die äußere als auch die innere Membran.
Verwenden Sie eine Mikroschere, um nur die notwendige Vitellinmembran zu entfernen. Sobald der Embryo von der Vitellinmembran befreit ist, legen Sie die Pinzette mit geschlossener Spitze unter das dorsale Segment des Embryos und drehen Sie sie vorsichtig um, um die linke Seite freizulegen. Entferne alle Membranen unmittelbar um die Vorhofknospe herum, indem du zuerst die groben Membranen entfernst und dann eine feinere Pinzette verwendest, um die feine Membran zu entfernen.
Positionieren Sie den vorbereiteten Knoten in der Nähe des Embryos. Richten Sie den offenen Knoten korrekt über der linken Vorhofknospe aus, um den Knoten zu straffen. Schneiden Sie mit einer Mikroschere die überschüssigen Nahtenden so nah wie möglich an der Knospe ab und entfernen Sie die überschüssigen Nahtstücke mit einer Pinzette.
Zum Schluss wird der Embryo mit einer geschlossenen Pinzette wieder in seine ursprüngliche Position gebracht. Nach Abschluss der Mikrooperation wird das Ei mit einer doppelten Schicht Param bedeckt und in den Inkubator zurückgelegt. Die linksatriale Ligatur (LAL-Modelle) zeigte, dass eine kompaktere Myokardstruktur mit signifikanten morphologischen Veränderungen im Vergleich zur normalen Entwicklung erreicht wurde.
Um das kardiale Interstitium herum wurde eine Ablagerung der extrazellulären Matrix beobachtet, die einer Myokardfibrose ähnelt. Morphometrische Porositätsmessungen zeigten eine kleinere linksventrikuläre Höhle und eine trabekuläre Verdichtung in den LAL-Modellen. Bei HH 25 des LAL-Modells wurden eine vergrößerte rechtsventrikuläre Höhle, eine veränderte Trabekelarchitektur und ein verändertes Myokardvolumen beobachtet.
Die optische Kohärenztomographie von LAL-Modellen zeigte eine signifikante Verringerung der linksventrikulären Größe und des Durchmessers im Vergleich zur Kontrolle. LAL-Gruppen zeigten auch eine Zunahme der Wanddicke im Vergleich zu Kontrollgruppen bei HH 25.
