Verwenden Sie zunächst eine Pasteurpipette aus Kunststoff, um die fluoreszenzgefärbten Gehirnschnitte vorsichtig in konfokale Glasbodenschalen zu übertragen. Füllen Sie diese Schalen mit äquilibriertem ACSF. Befestigen Sie die Hirnscheiben der Ratte mit einem Eisengitter an Ort und Stelle.
Als nächstes legen Sie die konfokalen Glasbodenschalen auf den Tisch eines konfokalen Mikroskops. Positionieren Sie den akuten Hirnschnitt am Boden der Schale und perfundieren Sie ihn während der Bildgebung mit äquilibrierendem ACSF. Betrachten Sie mit dem 40X-Objektiv die Wandzellen des zerebralen kortikalen Mikrogefäßsystems.
Verwenden Sie als Nächstes kompatible Software, um Bildstapel zu erfassen. Identifizieren Sie zerebrale Mikrogefäße und Perizyten anhand ihres Netzwerks und ihrer Morphologie, lokalisieren Sie dann eine bestimmte Region, die ein zerebrales Mikrogefäßsystem auf jedem Hirnschnitt enthält, und nehmen Sie Bilder auf. Unter normalen physiologischen Bedingungen kommt es bei Hirnperizyten nicht zum Zelltod.
Es wurden lebensfähige Perizyten nachgewiesen, die nicht mit Propidiumiodid gefärbt waren. Die SAB-Modelle zeigten vitale Perizyten innerhalb des Mikrogefäßsystems. Es wurden auch nicht-vitale Perizyten nachgewiesen.
Propidiumiodid, das als nicht-vitale Perizyten markiert ist, blieb vom gesamten Mikrogefäßsystem abgelöst.
