Machen Sie zunächst mit einem Skalpell einen präzisen Schnitt entlang der beiden Mundwinkel einer euthanasierten Ratte, um das Muskelgewebe freizulegen. Verwende eine Gewebeschere, um die Gelenke des Jochbeins und des Unterkiefers auf beiden Seiten des Schädels zu durchtrennen. Entfernen Sie dann den Unterkiefer.
Schneiden Sie mit einer Gewebeschere die knöcherne Verbindung zwischen Nasenhöhle und Oberkiefer durch. Verwenden Sie dann ein Hämostat, um die Haut des Oberkiefers zu trennen und die Nasenhöhle freizulegen. Durchtrennen Sie die Verbindung zwischen der Nasenhöhle und den Augenhöhlen beidseits am Foramen infraorbitalis und entfernen Sie die Nasenhöhle.
Legen Sie die extrahierte Nasenhöhle zur Fixierung in eine 4%ige Paraformaldehyd-Lösung. Um das Gewebe zu entkalken, waschen Sie das fixierte Gewebe mit destilliertem Wasser. Legen Sie das Gewebe in eine Entkalkungslösung mit einem Volumen, das 20 bis 30 Mal so groß ist wie das Gewebe bei Raumtemperatur.
Sobald die Entkalkung abgeschlossen ist, legen Sie das Gewebe in eine Dehydratationsbox. Übergeben Sie die Dehydratationsbox in einen Dörrautomaten und dehydrieren Sie das Gewebe in steigenden Alkoholkonzentrationen zu unterschiedlichen Inkubationszeiten. Als nächstes legen Sie das Gewebe für 30 Minuten für zwei Zyklen in wasserfreies Ethanol.
Anschließend wird das Gewebe fünf bis 10 Minuten lang in Xylol übertragen und wiederholt, dann wird das Gewebe eine Stunde lang in Wachs getaucht. Legen Sie den Wachsblock in Einbettkassetten. Entfernen Sie die Wachsblöcke, nachdem sie erstarrt sind, und schneiden Sie den Wachsblock ab.
Den getrimmten Wachsblock in ein Paraffinmikrotom stecken und in drei Mikrometer dicke Scheiben schneiden. Die Hämatoxylin- und Eosinfärbung der Kontrollratten zeigte eine gut angeordnete Zilienfärbung. Die Nasenscheidewandschleimhaut war in der Krankheitsgruppe geschädigt und abgelöst, mit deutlicher Neutrophileninfiltration.
