Positionieren Sie die Maus zunächst auf einem Seziertablett, das mit einem Nasenkonus für die Anästhesieabgabe ausgestattet ist. Überprüfen Sie die Reflexe des Tieres, wie z. B. das Zurückziehen der Pfote, um sicherzustellen, dass die Anästhesie eine angemessene Tiefe erreicht hat. Positionieren Sie dann die Maus, um die dorsale Haut freizulegen.
Befeuchten Sie die Haut mit reichlich 70%igem Ethanol, um eine Haarablösung zu verhindern. Machen Sie einen Schnitt entlang des Rückens, beginnend mit dem unteren Teil des Brustkorbs, und verlängern Sie ihn bis zum Hals. Heben Sie mit einer gebogenen Pinzette vorsichtig das braune Fettgewebe zwischen den Schulterblättern an und schneiden Sie das anhaftende Gewebe vorsichtig ab.
Heben Sie das Fettpolster in Richtung Kopf an und fahren Sie mit dem Schneiden des anhaftenden Gewebes fort, um die Region vorsichtig zu öffnen, bis die Sulzer-Vene freiliegt. Schneiden Sie nun vorsichtig die Sulzer-Vene ab. Mit einer 200-Mikroliter-Pipettenspitze und einer P100-Pipette etwa 40 Mikroliter Blut entnehmen und das gesammelte Blut in einem Blutentnahmeröhrchen aufbewahren.
Halten Sie das Röhrchen bis zur Serumentnahme auf Eis. Befeuchten Sie die Bauchhaut großzügig mit 70%igem Ethanol, um eine Haarablösung zu verhindern. Öffnen Sie mit einer Schere vorsichtig die Brusthöhle, um das Herz freizulegen.
Mit einer Ein-Milliliter-Spritze, die mit einer 29-Gauge-Nadel ausgestattet ist, punktieren Sie präzise den Scheitelbereich der linken Herzkammer. Führen Sie zwei Drittel der Nadel etwa drei bis fünf Millimeter in die rechte Horizontale der Herzspitze ein und ziehen Sie die Spritze zurück, um Blut aus der linken Herzkammer zu entnehmen. Zentrifugieren Sie dann die Blutproben bei 10.000 G für 10 Minuten bei vier Grad Celsius.
Sammeln Sie den Überstand mit einer Pipette und fahren Sie mit der Extraktion und Analyse der Metaboliten fort.
