FAM83A Knockdown in Human Cervical Cancer Cells and Proliferation Assay of Knocked Down Cells

Um mit der Zelltransfektion zu beginnen, werden menschliche Gebärmutterhalstumorzellen in 6-Well-Platten ausgesät. Bereiten Sie eine Mischung aus 50 nanomolaren SiFAM83A und acht Mikrolitern Transfektionsmittel in serumfreiem DMEM vor. Dann 500 Mikroliter der Mischung auf den Teller geben.

Zur Negativkontrolle wird nur das serumfreie DMEM hinzugefügt. Ersetzen Sie nun das Medium durch einen Milliliter mit fötalem Kälberserum ergänztes DMEM Nach 48 Stunden behandeln Sie die Zellen 24 Stunden lang mit einem Milliliter fünf mikromolaren Cisplatins. Anschließend werden die Zellen für die Gesamt-RNA-Extraktion und die qRT-PCR-Analyse geerntet.