Pflanzen Sie zunächst die Samen von Arabidopsis thaliana in die Erde. Züchten Sie sie in einer Kammer mit weißem Leuchtstoffröhrenlicht. Als nächstes impfen Sie eine einzelne Kolonie von Pseudomonas syringae pv.
Tomate DC3000 in 5 Millilitern King's B Flüssigmedium. Inkubieren Sie die Kultur bei 28 Grad Celsius und schütteln Sie sie mit 200 Umdrehungen pro Minute, bis die Kultur die späte logarithmische Wachstumsphase erreicht. Zentrifugieren Sie die Kultur zwei Minuten lang bei 6.000 g.
Anschließend resuspendieren Sie das Bakterienpellet in einem Milliliter sterilem Wasser. Als nächstes pipettieren Sie den Überstand heraus. Und resuspendieren Sie das Pellet in einem Milliliter Stomata-Öffnungspuffer.
Messen Sie die optische Dichte der Suspension bei 600 Nanometern. Verdünnen Sie die Bakteriensuspension auf eine optische Dichte von 0,2, wobei der Spaltöffnungspuffer 0,4 % Silikontensid enthält. Um die Bakteriensuspension zu impfen, legen Sie die Pflanzen von Arabidopsis thaliana zunächst mindestens drei Stunden lang unter Licht auf ein Tablett, das mit einem transparenten Deckel bedeckt ist.
Nehmen Sie den Deckel ab. Besprühen Sie dann mit einer Airbrush die Unterseite der Blätter mit der Bakteriensuspension. Nach der Inokulation die Pflanzen auf einer Schale mit transparentem Deckel inkubieren, um eine relative Luftfeuchtigkeit von etwa 85 % aufrechtzuerhalten
