Platzieren Sie zunächst eine betäubte Maus auf dem Operationstisch. Öffnen Sie mit einer sterilen Augenschere und -zange die Brust- und Bauchhöhle. Dadurch werden das Herz und der Darm freigelegt.
Präparieren Sie die Mesenterialarterien und die Aorta vorsichtig separat. Spülen Sie die Mesenterialarterien in PBS und geben Sie sie in eine 10 Zentimeter große Petrischale, die 1 % Penicillin-Streptomycin-Amphotericin B-Lösung enthält. Spülen Sie auf ähnliche Weise die Aorta und geben Sie sie in eine andere Petrischale, die die gleiche Lösung enthält.
Entfernen Sie schnell das gesamte Fett um die Aorta und die Mesenterialarterien. Legen Sie die Arterien nach zweimaligem Spülen unter ein Stereomikroskop in einer Gewebekulturhaube. Machen Sie vorsichtig einen Längsschnitt entlang der Arterien.
Schälen Sie dann mit einer feinen Pinzette die äußere Schicht der Aorta und den ersten Ast der Mesenterialarterien ab. Legen Sie die äußere Schicht in eine 3,5 Zentimeter große Petrischale mit 0,1 bis 0,2 Millilitern Nährmedium und hacken Sie sie in winzige Stücke von etwa einem Kubikmillimeter. Die Gewebestücke in einen mit Gelatine überzogenen T-25-Kolben geben.
Stellen Sie den Kolben senkrecht in einen Inkubator bei 37 Grad Celsius mit 5 % Kohlendioxid. Nach drei Stunden werden fünf Milliliter DMEM-Wachstumsmedium mit hohem Glukosegehalt in den Kolben gegeben, um alle Gewebeblöcke unter Wasser zu halten.
