Übertragen Sie unter sterilen Bedingungen mit einer Pinzette fünf bis 10 haarige Wurzellinien von Brassica napus auf eine Schale mit Regenerationsmedium. Verschließen Sie die Schale mit gasdurchlässigem Klebeband und kultivieren Sie sie bei 21 Grad Celsius in einer Langzeit-Photoperiode. Alle drei bis vier Wochen die Haarwurzeln in eine Petrischale mit frischem Regenerationsmedium umfüllen.
Beobachten Sie die schwielige Formation nach etwa zwei Wochen und schießen Sie nach zwei weiteren Wochen der schwieligen Formation aus der schwieligen Formation. Individualisieren Sie die Triebe und geben Sie sie in die Pflanzenkulturbox mit dem Sprossverlängerungsmedium. Schneiden Sie nach zwei bis drei Wochen die Reste der Hornhaut vom Spross ab und geben Sie die länglichen Triebe in die Pflanzenkulturbox mit Wurzelinduktionsmedium.
Übertragen Sie nun die Wurzelpflanze in die Erde und akklimatisieren Sie sie zuerst in den Phytotronen Dann bringen Sie die Pflanze zur Blüte in ein Gewächshaus. Um die Produktion von T1-Pflanzen zu beschleunigen, sammeln Sie Siliques, die reife grüne Samen aus den T0-Regenerierzien enthalten. Während Sie in einer sterilen Flowbox arbeiten, sterilisieren Sie die Siliques mit 70% Ethanol.
Legen Sie die Siliques auf einen Tellerdeckel oder einen Objektträger. Schneiden Sie die Siliques mit einer 24-Gauge-Nadel, die auf einer Ein-Milliliter-Spritze montiert ist, entlang der Ventilränder auf. Öffnen Sie die Handwurzeln und legen Sie sie beiseite.
Sammeln Sie die unreifen Samen und geben Sie sie auf eine Platte mit Samenkeimmedium. Verschließen Sie die Platte und stellen Sie sie bis zur Keimung in einen Kultivierungsraum. Im Vergleich zum Wildtyp zeigte die behaarte Wurzelregeneration von B.napus einen Zwergphänotyp mit dichtem Wurzelsystem, faltigen Blättern und veränderter Blütezeit.
