Beginnen Sie mit der Vorbereitung des Virusinokulums. Aktivieren Sie den Rotavirus-Vorrat, indem Sie 10 Mikrogramm Worthington-Trypsin pro Mikroliter hinzufügen und eine Stunde lang bei 37 Grad Celsius inkubieren. Verdünnen Sie dann 50 Mikroliter des aktivierten Virusbestands mit 50 Mikrolitern CMGF-Next, ersetzen Sie die Medien aus den HIO-Monolayern durch 100 Mikroliter Virusinokulum, um die Monolayer zu infizieren.
Bei einer Rotavirusinfektion mit einer 25-Gauge-Nadel eine einzelne Einritzung über die Länge der Monoschicht vornehmen. Die Platten zwei Stunden lang bei 37 Grad Celsius inkubieren. Nach der Inkubation wird das Inokulum entfernt und die Monoschichten einmal mit 1 X PBS gewaschen.
Dann 100 Mikroliter phenolrotfreies Differenzierungsmedium zugeben. Legen Sie den Objektträger in einen 37 Grad Celsius heißen Inkubator, bis er für die Aufnahme bereit ist.
