Herstellung von anaerobem flüssigem Medium in einer Ballonflasche zur Kultivierung von anaeroben Mikroorganismen in der Umwelt in einem Bioreaktor

Um das Carballon-Setup vorzubereiten, öffnen Sie das Ventil einer 6,4 Zentimeter langen Schlauchtülle. Befestigen Sie zwei Zentimeter lange Silikonschläuche an beiden Enden des Schlauchtüllen-Kugelhahns. Befestigen Sie an einem Ende der Baugruppe einen 7,9 bis 6,4 Millimeter Schlauchtüllenadapter.

Befestigen Sie das andere Ende der Baugruppe an der Schlauchtülle einer Acht-Liter-Ballonflasche. Verwenden Sie einen Kabelbinder, um die Verbindung zwischen der Schlauchtülle der Ballonflasche und dem Schlauch und die Verbindung zwischen der Schlauchtülle und dem Schlauch zu sichern. Messen Sie die erforderlichen Medienkomponenten aus und geben Sie sie in die Acht-Liter-Ballonflasche.

Nachdem Sie den erforderlichen pH-Wert eingestellt haben, mischen Sie die Komponenten durch Rühren auf einer heißen Platte zu Homogenität und lassen Sie die Flüssigkeit 30 Minuten kochen. Befestigen Sie als Nächstes eine sterile 10-Milliliter-Glaspipette an einem Stickstoffgasverteiler. Öffnen Sie den Verteiler, um Sauerstoff abzulassen, und lassen Sie Stickstoffgas ausströmen.

Nach dem Ausschalten der Hitze die Pipettenspitze in die Flüssigkeit stecken und 30 Minuten lang mit Stickstoffgas spülen, mäßig kräftig, aber nicht überlaufend. Ziehen Sie als Nächstes die Pipettenspitze nach oben in den Kopfraum der Ballonflasche. Fügen Sie zwei Gramm Natriumbicarbonat und 4,8 Gramm Natriumsulfid-Nonahydrat hinzu und warten Sie, bis Resazurin farblos wird.

Sobald Resazurin farblos ist, entfernen Sie die Glaspipette und verschließen Sie die Ballonflasche sofort mit einem Stopfen Nummer 10. Drehen Sie einen Draht über den Stopfen und um die Lippe der Ballonflasche, um den Stopfen zu sichern.