Hydroponischer Anbau von Arabidopsis thaliana-Sämlingen für bakterielle Impfungen

Um den Nährboden für Arabidopsis Thaliana-Sämlinge vorzubereiten, mischen Sie Murashige und Skoog oder MS-Medium mit 2 % Saccharose und 0,9 % Agar. Gießen Sie das Medium nach der Sterilisation in eine quadratische Petrischale, um ein Austrocknen der Luft zu vermeiden, um die Luftfeuchtigkeit aufrechtzuerhalten. Tauchen Sie die Arabidopsis-Samen über 12 Stunden lang in ein Zwei-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen mit einem Milliliter sterilem Wasser bei vier Grad Celsius.

Dann sterilisieren Sie die Samen zwei Minuten lang mit einem Milliliter 2%iger Natriumhypochloritlösung. Waschen Sie die Samen sechsmal gründlich mit sterilem Wasser, um die Natriumhypochloritlösung zu entfernen. Säen Sie die Samen mit einer sterilen Ein-Milliliter-Spitze auf die MS-Agar-Schale.

Verschließen Sie die Petrischale mit atmungsaktivem medizinischem Klebeband und legen Sie sie eine Woche lang bei 28 Grad Celsius und einer Luftfeuchtigkeit zwischen 40 und 60 % vertikal in einen leichten Inkubator. Machen Sie fünf Millimeter große Löcher in ein porengroßes Zellsieb und sterilisieren Sie es 30 Minuten lang bei 115 Grad Celsius. Nach der Entnahme transplantieren Sie drei sieben Tage alte A thaliana-Pflanzen durch die Löcher eines Zellsiebs und geben Sie sie in eine Sechs-Well-Platte mit drei Millilitern halbstarkem MS-Medium mit 0,5 % Saccharose.