Führen Sie einen Monat nach der LISW-Exposition eine pathologische Untersuchung der Cochlea der Maus durch. Beginnen Sie die Hämoperfusion mit stillatisierter Ringer-Lösung, gefolgt von einer transkardialen Perfusion mit 4% Paraformaldehyd. Nach der Enthauptung der Maus die Cochlea entfernen und über Nacht direkt mit 4%Paraformaldehyd bei vier Grad Celsius durchbluten.
Nachdem Sie das gesamte Bild der Cochlea mit der ImageJ-Software aufgenommen haben, berechnen Sie die Cochlea-Frequenzkarte, um die spezifischen Cochlea-Regionen bei verschiedenen Frequenzen genau zu lokalisieren. Berechnen Sie mit der angegebenen Formel die Überlebensrate der Haarzellen bei jeder Frequenz. Nachdem Sie hochauflösende Z-Stapel-Bilder der inneren Haarzellen aufgenommen haben, berechnen Sie die Anzahl der Synapsen.
Visualisieren Sie die Hämatoxylin- und Eosin-gefärbten Cochlea-Schnitte und zählen Sie die Anzahl der Spiralganglien-Neuronen in der mittleren Windung des Rosenthal-Kanals, um das Überleben der Spiralganglien-Neuronen pro Kontrolle zu berechnen. Im Vergleich zur Kontrolle zeigte die fluoreszierende Immunfärbung in allen Gruppen intakte Cochlea-Strukturen ohne signifikanten Verlust von Haarzellen oder Nervenfasern. Quantitative Auswertungen deuteten jedoch darauf hin, dass das Überleben der äußeren Haarzellen in der Gruppe mit 2,5 Joule pro Quadratzentimeter signifikant geringer war.
In der Zwischenzeit war das Überleben der inneren Haarzellen zwischen den Gruppen konsistent. Die Anzahl der synaptischen Bänder war in Gruppen mit höherer Frequenz deutlich reduziert. Parallel dazu ging eine Abnahme der Neuronendichte der Spiralganglien in der Gruppe von 2,5 Joule pro Quadratzentimeter einher, was darauf hindeutet, dass die Degeneration der Cochlea von der LISW-Energieexposition abhängt.
