Beginnen Sie mit der Kultivierung von HEK 293 T-Zellen in DMEM-Medium, ergänzt mit 10 % fötalem Rinderserum. Am Tag vor der Transfektion säen Sie HEK 293 T-Zellen in einer Sechs-Well-Platte, um am nächsten Tag eine Konfluenz von etwa 60 % zu erreichen. Anschließend transfizieren Sie die experimentellen Probenzellen in einer Sechs-Well-Platte mit Plasmiden für den NHEJ- oder HR-Assay unter Verwendung eines kommerziellen Transfektionskits.
Lassen Sie für die facs-Kalibrierungskontrollen eine Vertiefung mit nicht transfizierten Zellen als Negativkontrolle. Transfizieren Sie die Zellen in einer Sechs-Well-Platte mit Plasmiden für GFP (Einzelfarbkontrolle) oder mCherry (Einzelfarbkontrolle).
