Führen Sie zunächst eine geschmierte rektale Sonde ein, um die Temperatur der anästhesierten Ratte während der Operation zu kontrollieren. Nachdem Sie die Halswirbelsäule in der unteren rechten Halsregion der anästhesierten Ratte oberhalb des Schlüsselbeins lokalisiert haben, verwenden Sie die DeBakey Atraumatic Pinzette, um die Haut sanft zu greifen und mit einer feinen, scharfen Schere oder einem Skalpell einen präzisen Schnitt zu machen. Schlitzen Sie das Gewebe vorsichtig mit einer Pinzette nach Standardmuster auf.
Lokalisieren Sie die Halsvene und befreien Sie sie sanft von ihrem muskulären Kompartiment. Legen Sie einen 4-0 Seidenfaden an, um die distale Seite der Halsvene sicher zu ligieren. Verwenden Sie die Naht mit den Nadelhaltern, um die Halsvene zu spannen.
Legen Sie eine 4-0-Naht auf die proximale Seite der Jugularvene und bereiten Sie einen chirurgischen Knoten vor, ohne ihn festzuziehen. Machen Sie mit der Mikro-Präparierschere von Vannas einen kleinen Schnitt in die Halsvene. Nachdem Sie die Venenwand vorsichtig mit einer kleinen Pinzette gefasst haben, führen Sie den PE50-Katheter in die Halsvene ein.
Schieben Sie den Katheter leicht vor und um seine korrekte Platzierung in der Vene zu bestätigen, entnehmen Sie eine kleine Menge Blut und injizieren Sie es erneut. Ziehen Sie den zuvor vorbereiteten Knoten fest, um den Katheter zu sichern. Tragen Sie einen Tropfen Lidocain auf die eingeschnittene Stelle auf.
Decken Sie den Schnitt mit einem feuchten, sterilen Mullkissen ab. Verwenden Sie die DeBakey Atraumatic Pinzette, um die Haut des Scarpa-Dreiecks am linken Bein zu greifen, und machen Sie einen Schnitt mit einer feinen, scharfen Schere oder einem Skalpell. Dilatieren Sie das Gewebe vorsichtig mit einer Pinzette mit Standardmuster.
Lokalisieren Sie die Femur-Triade und platzieren Sie eine Pinzette unter der Triade. Trennen Sie dann mit einer zweiten Standardzange vorsichtig die Arterie vom Nerv und der Oberschenkelvene. Legen Sie eine 4-0-Naht an, um die Oberschenkelarterie distal zu ligieren, und nehmen Sie die Naht mit den Nadelhaltern, um die Oberschenkelarterie in Spannung zu setzen.
Legen Sie nun eine 4-0-Naht auf die proximale Seite der Oberschenkelarterie und bereiten Sie einen chirurgischen Knoten vor, ohne ihn zu schließen. Nach dem Einklemmen der Arterie verwenden Sie eine Vannas Mikropräparierschere, um einen Querschnitt in der Oberschenkelarterie vorzunehmen. Fassen Sie die Arterienwand mit einer Zange im Standardmuster und kanülieren Sie die Oberschenkelarterie mit dem Katheter, der sie mit einer Pinzette hält.
Lösen Sie vorsichtig die Arterie und stellen Sie sicher, dass das Blut nicht in den Katheter zurückfließt. Wenn das Signal gut ist, schieben Sie den Katheter leicht in die Arterie vor und ziehen Sie den zuvor vorbereiteten Chirurgenknoten fest. Verabreichen Sie der Ratte Heparin und legen Sie ein angefeuchtetes steriles Mullkissen über die eingeschnittene Stelle.
Nach 10 Minuten Stabilisierung zeichnen Sie die basalen hämodynamischen Werte fünf Minuten lang auf. Um einen hämorrhagischen Schock auszulösen, verwenden Sie eine Ein-Milliliter-Spritze, um fünf Minuten lang fünf Milliliter Blut aus der Oberschenkelarterie zu entnehmen. Bereiten Sie eine Mischung aus 50 % Laktationsringerlösung und 50 % gesammeltem Blut bei Raumtemperatur vor.
Legen Sie eine mit der Mischung gefüllte Zwei-Milliliter-Spritze an das Ende der Jugularvenenkanüle. Zur Aufrechterhaltung eines hämorrhagischen Schocks, wenn der mittlere arterielle Druck 38 Millimeter Quecksilbersäule übersteigt, entnehmen Sie 200 Mikroliter Blut aus der Oberschenkelarterie. Wenn der Druck unter 32 Millimeter Quecksilbersäule fällt, injizieren Sie 200 Mikroliter des Ringer-Gemisches aus 50 % Blut und 50 % Laktat durch die Halsvene.
Nach der sterilen Präparation des Schwanzes mit einem Mullkissen entnehmen Sie mit der Nadelspitze einen Blutstropfen aus dem Ende des Schwanzes, um das periphere Blutlaktat zu messen. Zum Schluss reanimieren Sie die Ratte mit einer Laktat-Ringer-Lösung unter Verwendung einer 20-Milliliter-Spritze durch den Jugularkatheter mit einer Spritzenpumpe.
