Nehmen Sie zunächst die kultivierten glatten Muskelzellen der Speiseröhre, sobald sie eine Geläufigkeit von 80 % erreicht haben. Aspirieren Sie das Medium und waschen Sie die endothelialen glatten Muskelzellen mit fünf Millilitern PBS. Dann geben Sie zwei Milliliter 0,2%Trypsin-EDTA in den Kolben und inkubieren Sie zwei Minuten lang, um die Zellen zu verdauen.
Fügen Sie zwei Milliliter DMEM hinzu, um den Verdauungsprozess zu beenden, und überführen Sie die Zellsuspension in ein 15-Milliliter-Zentrifugenröhrchen. Zentrifugieren Sie das Röhrchen drei Minuten lang bei 675 g. Aspirieren Sie vorsichtig den Überstand und resuspendieren Sie das Zellpellet in den Komposit-Biotinten aus Gelatinemethacrylat und Seidenfibroinmethacryloyl.
Nach dem Bioprinting und Waschen der 3D-Ösophagusmuskelschicht mit PBS aspirieren Sie das PBS vorsichtig und ersetzen es durch drei Milliliter DMEM, ergänzt mit 10 % FBS und 1 % Penicillin oder Streptomycin.