Beginnen Sie damit, die gesammelte Karottenkallus unter sterilen Bedingungen mit den verschiedenen Triazol-Pestiziden zu behandeln. Mischen Sie dazu in getrennten Glaskolben drei Gramm Karottenkallus mit 10 Millilitern jeder in MS-Medium hergestellten Pestizidlösung. Mischen Sie ebenfalls drei Gramm Karottenkallus mit 10 Millilitern aseptischem MS-Medium in einem anderen Glaskolben.
Inkubieren Sie die vorbereiteten Karotten-Kallusproben bei 130 U/min und 26 Grad Celsius im Dunkeln für 72 Stunden. Stellen Sie alle Behandlungen in dreifacher Ausfertigung ein. Sammeln Sie nach der Inkubation mit 0,5-Mikron-Glasfaserfiltern die Karottenkallus durch Filtration aus dem Medium.
Waschen Sie die Hornhaut dreimal mit Reinstwasser. Zum Schluss gefriertrocknen Sie die Hornhaut mit einem Gefriertrockner bei 55 Grad Celsius und homogenisieren sie anschließend mit einer Gewebemühle mit hohem Durchsatz bei 70 Hertz für drei Minuten. Die Konzentrationen aller Pestizide in den Nährmedien nahmen exponentiell ab.
Während die in Karottenschwielen zunahmen und nach vier oder acht Stunden ihren Höhepunkt erreichten, folgte ein allmählicher Rückgang. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass Pestizide schnell von Karottenkallus aufgenommen und umgewandelt wurden. Die zeitliche Wiedergewinnung von Pestiziden im Hornhautkultursystem zeigte, dass nach einer 72-stündigen Inkubation nur noch 8,3 bis 11 % der Pestizide übrig waren, was darauf hindeutet, dass die meisten Pestizide in Metaboliten umgewandelt worden waren.
