Chemische Extraktion von mit Pestiziden behandeltem Karottenkallus zur Beurteilung der Zytotoxizität der Pestizidmetaboliten

Mischen Sie zunächst 0,2 Gramm gemahlenes Pulver jeder gefriergetrockneten, mit Pestiziden behandelten Karotten-Hornhautprobe mit drei Millilitern Acetonitril in einem 10-Milliliter-Zentrifugenröhrchen. Wirbeln Sie das Zentrifugenröhrchen acht Minuten lang vor und beschallen Sie es dann fünf Minuten lang mit 150 Watt und 40 Kilohertz. Als nächstes zentrifugieren Sie das Röhrchen 10 Minuten lang bei 8.000 g und vier Grad Celsius, bevor Sie den Überstand durch Pipettieren auffangen.

Mit einem Stickstoffkonzentrator bei 40 Grad Celsius die gepoolten Extrakte bis zur Trockenheit konzentrieren. Die Rückstände des Extrakts werden in einem Milliliter DMEM, der 0,3 % DMSO enthält, wieder gelöst, um die Pestizid-Metaboliten-Expositionslösung zu erhalten. Auf ähnliche Weise werden die Rückstände des Extrakts, die aus den blinden Hornhautproben gewonnen wurden, wieder gelöst.

in einem Milliliter DMEM, der 0,3 % DMSO enthält. Lösen Sie dann ein Milligramm jedes verwendeten Pestizids in verschiedenen Röhrchen auf, die die Blindprobenrückstandslösung enthalten, um scheinbare Pestizidexpositionslösungen zu erhalten.