Erhitzen Sie zunächst mit einem Bunsenbrenner vorsichtig einen stumpfen Stahldraht. Stechen Sie es in den Deckel eines Zwei-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchens, um ein einen Millimeter breites Loch zu erzeugen. Legen Sie die durchstochenen Röhrchen zur Sterilisation in ein autoklavierbares Gefäß.
Nachdem die Röhrchen autoklaviert und abgekühlt sind, füllen Sie sie mit 1,5 Millilitern vorgewärmtem BBM+Verwenden Sie nun eine Pipettenspitze, um etwa 50 bis 60 Milligramm der Sulfolobus acidocaldarius-Kultur aus einem Glycerinstamm zu kratzen. Übertragen Sie das Inokulum in die BBM+gefüllten Röhrchen. Bewahren Sie ein unbeimpftes Röhrchen mit BBM+ als Negativkontrolle auf.
Um zu verhindern, dass Aerosole aus dem durchstochenen Röhrchendeckel austreten, platzieren Sie eine hitzetolerante gasdurchlässige Membran auf der Oberseite des Deckels. Legen Sie die beimpften Röhrchen zur Inokulation in einen Thermomischer. Nachdem die Kulturen die erforderliche optische Dichte erreicht haben, zentrifugieren die Röhrchen zwei Minuten lang bei Raumtemperatur bei 5.000 g.
Pipettieren Sie dann den Überstand heraus, um ihn zu entsorgen. Geben Sie 1,5 Milliliter warmes BBM+ zum Pellet und resuspendieren Sie das Zellpellet im Medium. Beim Vergleich der Inkubation mit Thermomischern mit der in herkömmlichen Inkubatoren zeigte sich ein ähnliches Wachstum.