Wiegen Sie zunächst fünf Gramm trockenes superabsorbierendes Polymer oder SAP und mischen Sie es mit 500 Millilitern MMS1-Nährlösung. Etwa eine Woche vor dem Zusammenbau die Samen von Plantago lanceolata auf Löschpapier, das mit MMS1-Nährlösung angefeuchtet ist, in einer Petrischale keimen lassen. Dann inkubieren Sie die Petrischale im Dunkeln bei Raumtemperatur.
Um mit dem Zusammenbau des SAP-AS-Systems zu beginnen, platzieren Sie den Sämlingsstiel in der Kerbe an der Seite der Petrischale mit der Wurzel nach innen und den Keimblättern oder Blättern und Stängeln nach außen. Bedecken Sie die Wurzeln mit etwa 1,5 bis zwei Gramm Vermiculit. Anschließend hydratisieren Sie das Wurzelkompartiment mit acht Millilitern MMS1-Nährlösung.
Räumen Sie einen vermiculitfreien Raum entlang des Nylon-Netzfilters an der Seite des Wurzelfachs frei und fügen Sie fünf Gramm hydratisiertes SAP hinzu. Geben Sie dann 15 Gramm hydratisiertes SAP in das Highfill-Fach. Richten Sie nun die seitlichen Kerben des Deckels und den Boden der Petrischale aus, um den Stiel nicht zu beschädigen, und schließen Sie den Deckel.
Verschließen Sie dann die Petrischale mit einem Streifen Parafilm und verbinden Sie den Boden und den Deckel. Wiegen Sie die Petrischale und notieren Sie ihr Durchschnittsgewicht, um festzustellen, wann das SAP-AS rehydriert werden muss. Stapeln Sie dann die Petrischale, um den Platz zu optimieren.
Verwenden Sie eine undurchsichtige Abdeckung mit einer Öffnung an der Seite, um die Sämlinge im Dunkeln zu halten. Erhitzen Sie die Glaspipette mit einer Flammenkerze oder einem Bunsenbrenner und dehnen Sie das Glasrohr, während es schmilzt, um es zu trennen. Brechen Sie unter einem Stereomikroskop die Spitze der Glaspipette, um ihren Innendurchmesser zu verringern.
Öffnen Sie nun die Petrischale und suchen Sie, wo die Spore platziert werden soll. Schaffen Sie einen Platz zwischen den fünf Gramm hydratisiertem Saft entlang der Nylonnetz-Filtermembran, um einen Abschnitt einer Wurzel freizulegen. Nehmen Sie unter dem Präpariermikroskop mit der extrudierten Pipette eine Spore in einer flüssigen Suspension auf, während Sie etwas Flüssigkeit pipettieren, bevor Sie die Spore sammeln.
Legen Sie danach die Spore vorsichtig auf der Wurzel ab. Ersetzen Sie dann den Saft über dem Wurzelfragment, um eine feuchte Mikroumgebung für die Wurzel und die Spore zu erhalten. Nach 24 Stunden bei Bedarf das Wurzelkompartiment bewässern und darauf achten, die Spore nicht abzuwaschen.
Richten Sie die seitlichen Kerben des Deckels an der Unterseite der Petrischale aus, um den Sämlingsstiel nicht zu beschädigen, und schließen Sie die Petrischale mit dem Deckel.
