Beginnen Sie den chirurgischen Eingriff an der ordnungsgemäß betäubten Maus, indem Sie Buprenorphinhydrochlorid subkutan injizieren, um die Schmerzen zu lindern. Tragen Sie eine Augensalbe auf die Augen auf, um Trockenheit zu verhindern. Bringen Sie die Maus in eine dorsale Haltung und sichern Sie die Gliedmaßen mit Bändern in einer Streckposition.
Desinfizieren Sie die Rückenhaut mit abwechselnden Tupfern von Jod und Alkohol, jeweils mindestens dreimal. Schneiden Sie anschließend mit einer chirurgischen Schere einen 0,5 bis 1 Zentimeter großen Schnitt an der linken Rückseite des Tieres. Trennen Sie das Muskel- und Fettgewebe vorsichtig mit einer Pinzette, bis die Brustwand und die Lungenbewegung sichtbar sind.
Übertragen Sie mit einer Pipette ein ausgewähltes multizelluläres Steroid (MCS) von einer Mikroplatte in eine Glas-Petrischale, die eiskaltes PBS enthält. Befestigen Sie eine 20-Gauge-Nadel an einer 100-Mikroliter-Glasspritze und kühlen Sie sie auf Eis vor. Ziehen Sie dann 20 Mikroliter einer vorgekühlten Mischung aus PBS und Matrigel.
Verwenden Sie die Spritze, um schnell ein MCS aus der Petrischale in einer minimalen Menge PBS-Matrigel-Mischung zu aspirieren, wobei Sie das Sphäroid im Metallteil der Nadel belassen. Führen Sie die Nadel vorsichtig senkrecht zwischen zwei Rippenknochen bis zu einer Tiefe von etwa drei Millimetern ein und injizieren Sie langsam alle 20 Mikroliter des Gemisches, das das aspirierte MCS enthält. Entfernen Sie dann vorsichtig die Nadel.
Tragen Sie eine dreifache antibiotische Salbe auf die Wunde auf. Versiegeln Sie den Schnitt mit chirurgischen Klammern, die nach zwei Wochen entfernt werden sollen. Legen Sie das Tier auf ein Infrarot-Wärmekissen und decken Sie es mit Labortüchern ab, um die Körpertemperatur zu halten.
Überwachen Sie das Tier mindestens 30 bis 60 Minuten lang, bis es aufwacht und sich richtig bewegt. Messen Sie mit einem Kleintier-Bildgebungssystem bei einem 700-Nanometer-Kanal alle drei bis vier Tage das IRFP-Fluoreszenzsignal vom Tumor-Xenotransplantat der anästhesierten Maus. Messen Sie die Fluoreszenz in vier Haltungen, links, rechts, dorsal und ventral.
Die Netto-Fluoreszenzintensität sowohl von der linken als auch von der ventralen Seite zeigte einen ähnlichen Trend der Tumorprogression, wobei die Fluoreszenz von der ventralen Seite etwas langsamer wuchs als die Fluoreszenz von der linken Seite.
