Gewinnung von Mausembryonen für In-vitro-Implantationsstudien

Zu Beginn nehmen Sie eine sechs bis acht Wochen alte weibliche Maus und injizieren Sie das PMSG, gefolgt von HCG in einem Abstand von 42 bis 48 Stunden. Verpaaren Sie die weibliche Maus mit einem Männchen vergleichbaren Alters. Nachdem Sie die weibliche Maus eingeschläfert haben, öffnen Sie den Bauch und lokalisieren Sie ihre Genitalien.

Dehnen Sie mit einer Pinzette den Eileiter, den Eierstock und die Fettpolster. Schneiden Sie mit einer Schere den Eileiter und den Eierstock auf, gefolgt von der Gebärmutter. Übertragen Sie den erhaltenen Eileiter in eine 35-Millimeter-Petrischale, die mit M2-Medium vorgefüllt ist.

Punktieren Sie die vergrößerte Ampulle des Eileiters, um den Kumulus-Zygoten-Komplex freizugeben oder einzuklemmen. Übertragen Sie den Komplex mit einer Pinzette in eine M2-Lösung, die 0,5 Milligramm pro Milliliter Hyaluronidase enthält, und inkubieren Sie ihn einige Minuten lang. Sammeln Sie mit einer Eitransferpipette die Zygoten und waschen Sie sie in M2-Medium, das BSA enthält, um verbleibende Hyaluronidase, Kumuluszellen und Verunreinigungen zu entfernen.