Zu Beginn legen Sie das Lungengewebe der Maus in 4% Paraformaldehyd, was dem 10-fachen Volumen des Gewebes entspricht. Nach dreistündiger Fixation trennen Sie die fünf Lungenlappen und betten den Schädel-, Mittel- und Akzessorallappen der rechten Lunge getrennt ein, wobei Sie sich in Richtung der vertikalen Lappen-Bronchus-Verbindung orientieren. Schneiden Sie dann den Schwanzlappen der rechten Lunge in zwei Stücke im Verhältnis von vier Millimetern von links nach rechts in Richtung senkrecht zur Lungen-Lappen-Bronchus-Verbindung und betten Sie die Scheiben mit der Schnittfläche nach oben in einen Wachsblock ein.
Um drei Schnitte im linken Lungenlappen zu machen, schneiden Sie quer über dem Hauptbronchialübergang, zwei Millimeter unterhalb der Spitze. Machen Sie den zweiten Schnitt quer über dem Hauptbronchialübergang, fünf Millimeter unterhalb der Spitze. Mache den dritten Schnitt am Ende des Lappens, acht Millimeter unterhalb der Spitze.
Nachdem Sie das oberste Stück Gewebe entsorgt haben, umhüllen Sie die restlichen drei Stücke mit der Schnittfläche nach oben in einem Wachsblock. Spülen Sie den Gewebeblock nach der Refixierung 15 Minuten lang unter fließendem Wasser aus. Tauchen Sie das Gewebe nacheinander in die eskalierenden Ethanolkonzentrationen, gefolgt von Xylol und weichem Wachs.
Füllen Sie eine Form mit einer angemessenen Menge flüssigem Paraffin und positionieren Sie das Gewebe mit einer Pinzette im Einbettrahmen in der Mitte. Legen Sie die Form und das Gewebe in den Gefrierbereich der Einbettmaschine. Wenn das Paraffin leicht zu bleichen beginnt, positionieren Sie schnell den unbedeckten Einbettrahmen auf der Form und führen Sie die zweite Wachsinjektion durch, indem Sie die Löcher an der Unterseite des Einbettrahmens verschließen.
Übertragen Sie dann die gesamte Form auf den Gefriertisch. Nachdem Sie den Wachsblock auf dem Hobel befestigt haben, schneiden Sie den Block ab, um eine glatte und flache Schnittfläche freizulegen. Drehen Sie die Radkurbel des Mikrotoms, um Scheiben mit einer Dicke von vier Mikrometern zu schneiden.
Legen Sie die entfernten Abschnitte nacheinander glatt auf die Wasseroberfläche. Sobald die Abschnitte vollständig ausgefahren sind, trennen Sie die gebrochenen Teile an den Verbindungsstellen zwischen den einzelnen Abschnitten. Kippen Sie eine Glasrutsche unter den Abschnitt und heben Sie die Rutsche bei Kontakt langsam und gleichmäßig in einer vertikalen Bewegung aus der Wasseroberfläche an.
