Tragen Sie zunächst geeignete persönliche Schutzausrüstung. Wiegen Sie die Ratte vor dem Eingriff, um die richtige Dosis für gewichtsabhängige Medikamente und Beatmungsgeräteeinstellungen zu bestimmen. Nachdem Sie die Ratte betäubt haben, bringen Sie sie in Bauchlage.
Um die Tiefe der Anästhesie zu bestätigen, drücken Sie mit einer Pinzette sanft auf das Fußpolster der hinteren Gliedmaßen und prüfen Sie, ob keine Entzugsreaktion auftritt. Tragen Sie nun eine vom Tierarzt zugelassene Salbe auf Erdölbasis auf die Augen der Ratte auf, um Trockenheit zu verhindern. Beobachten Sie die Atemfrequenz und beurteilen Sie, ob es sich um Entzugsreaktionen handelt, wie zuvor gezeigt.
Rasieren Sie dann mit einer Schermaschine das Hinterglied der Ratte. Verwenden Sie Klebeband, um die Gliedmaße mit dem Knöchel in einem 90-Grad-Dorsalflexionswinkel, dem Knie in Streckung und der Hüfte in Abduktion zu positionieren. Führen Sie anschließend ein Paar isolierte monopolare Nadeln mit 28 Gauge zur Stimulation des Ischiasnervs ein, wobei die Kathode im Bereich der proximalen Hintergliedmaße platziert wird und die Anode proximal im Unterhautgewebe positioniert ist und das Kreuzbein überlagert.
Positionieren Sie dann eine Einweg-Masseelektrode an der kontralateralen Hintergliedmaße oder am Schwanz. Führen Sie eine 27 Gauge große 25-Millimeter-Autoklav-Nadelelektrode, die speziell für die Einzelfaser-Elektromyographie entwickelt wurde, vorsichtig in den rechten Gastrocnemius-Muskel ein. Führen Sie die Einzelfaser-Elektromyographie-Nadelelektrode parallel zu den Gastrocnemius-Muskelfasern ein, um das Einzelfaser-Aktionspotential zu erfassen.
Wenden Sie eine Konstantstromstimulation auf den rechten Ischiasnerv bei einer Frequenz von 10 Hertz an, wobei ein Intensitätsbereich von 0,3 bis 10 Milliampere und eine Impulsdauer von 0,1 Millisekunden verwendet werden. Passen Sie die Verstärkung von 200 Mikrovolt bis 1000 Mikrovolt pro Teilung an, um die Visualisierung des Potentials zu verbessern. Konfigurieren Sie die Sweep-Geschwindigkeit auf 500 Mikrosekunden pro Division.
Um eine Antwort als SFAP zu klassifizieren, muss sie eine Anstiegszeit von weniger als 500 Mikrosekunden aufweisen, eine Mindestamplitude von 200 Mikrovolt aufweisen und ein vollständiges oder kein Verhalten aufweisen. Berechnen Sie den Jitter oder die Variabilität der SFAP-Latenz zwischen aufeinanderfolgenden Entladungen nach mindestens 50 Stimulationen unter Verwendung der angegebenen Gleichung. Bewerten und quantifizieren Sie Blockierungen.
Nachdem Sie 10 Synapsen von jedem Tier ausgewertet haben, berechnen Sie den Jitter und bestimmen Sie die Durchschnittswerte pro Tier. Wenn Sie Potentiale aufzeichnen, die eine intermittierende Blockierung aufweisen, erhöhen Sie die Stimulusintensität, um sicherzustellen, dass das SFAP-Versagen nicht auf submaximale Stimulation zurückzuführen ist. Während der Verabreichung von Rocuronium zeigte das Einzelfaser-EMG im Vergleich zu gesunden Personen eine erhöhte Variabilität der Übertragung und der Blockade der neuromuskulären Verbindungen.
