Vorbereitung des Erdnusswurm-Homogenats und -Gels für Fibrinogen-PAGE zur Identifizierung von fibrinogenolytischen Wirkstoffen

Wiegen Sie zunächst 50 Gramm Erdnusswürmer und geben Sie sie zusammen mit 150 Millilitern Kochsalzlösung in den Homogenisator. Homogenisieren Sie 60 Sekunden lang bei 24.000 U/min. Zentrifugieren Sie das Homogenat und sammeln Sie den Überstand für weitere Prozesse.

Für die Zubereitung von Fibrinogen-Polyacrylamid-Gel geben Sie 0,01 Gramm Fibrinogen und andere Reagenzien in ein 50-Milliliter-Glasbecherglas. Den Becher bei 37 Grad Celsius 30 Minuten erwärmen. Gießen Sie nach der Zugabe von Acrylamid die Trenngelmischung in eine 10-Well-Gelform.

Geben Sie dann zwei Milliliter doppelt destilliertes Wasser in die Gelform und inkubieren Sie sie 30 Minuten lang. Drehen Sie die Form um, um das Wasser zu entfernen. Bereiten Sie als Nächstes das Ladegel auf ähnliche Weise vor und gießen Sie es in dieselbe Form wie zuvor.

Führen Sie zum Schluss den Kamm für die Vertiefungsbildung ein.