Geben Sie zunächst einen Milliliter basales Medium Eagle in jede Vertiefung der Sechs-Well-Platte. Und setzen Sie mit einer sterilen Pinzette einen einzelnen Zellkultureinsatz in jede Vertiefung ein. Inkubieren Sie die Platte mindestens zwei Stunden lang in einem 37 Grad Celsius heißen Inkubator mit 5 % Kohlendioxid.
Nachdem Sie den Präparierbereich in einer biologischen Haube eingerichtet haben, waschen Sie die chirurgischen Instrumente in 70%igem Ethanol, gefolgt von PBS. Positionieren Sie dann das eingeschläferte Tier im Sezierbereich und machen Sie einen kleinen Schnitt mit einer Schere weg vom Kleinhirn, um das Gehirn freizulegen. Ziehen Sie mit einer Pinzette mit abgerundeten Enden den Schädel vorsichtig ab und entfernen Sie den Schädel in kleine Stücke, um das Kleinhirngewebe nicht zu beschädigen.
Legen Sie das Hirngewebe frei, um das Kleinhirn zu extrahieren, und trennen Sie die drei Stielpaare mit einem fein gebogenen Irisspatel, um die Kleinhirnrinde vom Hirnstamm zu trennen. Schieben Sie dann den Spatel zwischen das Kleinhirn, den Colliculus superior und den Hirnstamm, um das Kleinhirn zu entnehmen.
