Zu Beginn besorgen Sie sich das Kleinhirn von einem 10 Tage alten Mauswelpen in kaltem Präparierpuffer. Positionieren Sie das Kleinhirn nach dem Entfernen des überschüssigen Puffers in vertikaler Ausrichtung auf der Schneidplattform. Führen Sie das parasagittale Schneiden bei einer Scheibendicke von 350 Mikrometern durch.
Trennen Sie die Scheiben vorsichtig mit einem feinen Irisspatel und legen Sie sie in das kalte Präpariermedium. Trennen Sie unter dem Fernglas mit zwei gebogenen Irisspateln die Gewebescheiben vorsichtig voneinander. Verwenden Sie für Kulturen Schnitte, die aus dem Kleinhirnvermis stammen, das sich in der medialen kortikonukleären Zone des Organs befindet.
Übertragen Sie mit einem breiten Spatel jede Gewebescheibe auf einen Kultureinsatz. Bewegen Sie jeden Einsatz, der eine Gewebescheibe trägt, in eine Vertiefung in der Sechs-Well-Platte, die das vorgewärmte Medium enthält. Während der Inkubation wird das gebrauchte Medium mit einer sterilen Glaspipette abgesaugt.
Geben Sie mit einer serologischen Fünf-Milliliter-Pipette einen Milliliter frisches Basalmedium Eagle hinzu, wobei die Spitze der Pipette an die Wand der Vertiefung gelehnt ist, ohne das Gewebe zu stören.
