Wir danken Daniel Carpi für seine Hilfe und frühen Beiträge zu diesem Projekt. Wir danken auch Lucrecia Novoa für ihre Unterstützung mit Kunstwerken und Bildern. Diese Arbeit wurde vom NIH / NIAID Programm Zuschuss 5P01AI073693-03 unterstützt.

1. Tetrode Fabrication <ol><li> Starten Sie durch mit isolierten 12,5 um (0,0005 &quot;) Kerndurchmesser Platin-Iridium-Draht von California Fine Wire. Die Länge des Drahtes sollte auf die passende Länge für die Zielstruktur geschnitten werden. Beispielsweise den Draht auf mindestens 30 cm lang für die Ausrichtung der Rückenflosse subiculum oder Hippocampus. </li><li> Falten Sie den Draht über in der Mitte, so dass es zwei parallele Drähte, die 15 cm lang sein wird sind. Hängen Sie den Mittelpunkt dieses Drahtes über einen horizontalen Arm zu vier parallele Drähte von 7,5 cm in der Länge zu bilden. Weiter befestigen gummierte Clip in der Nähe der Unterseite des drapierten Draht, wodurch ein Bündel von vier Adern. </li><li> Legen Sie die Gummi-Clip in der motorisierten Tetrode Spinner, darauf achten, dass der Draht straff, aber nicht zu straff oder Gewicht Lager, wie es während der Spinnverfahren brechen. </li><li> Schalten Sie die Tetrode Spinner auf &quot;Manual&quot;-Modus und drücken Sie den Joystick, um &quot;Rechts&quot;, um den Draht im Uhrzeigersinn drehen. Der Spinnerwird bei etwa 2 Hz zu drehen, wodurch ein enges Bündel von vier Drähte, die tetrode bilden. </li><li> Bewerben 80 Umdrehungen im Uhrzeigersinn dann stoppen, indem Sie &quot;Up&quot; auf dem Joystick. Dies unterbricht die motorisierte spinner. Weiter gelten 20 entgegen dem Uhrzeigersinn (&quot;Links&quot;), Drehungen, um die Spannung auf der tetrode freizugeben. Die endgültige Zahl der Drehungen pro Länge des Drahtes zu 8 Umdrehungen pro Mikrometer sein. </li><li> Verwenden Sie die Heißluftpistole auf der unteren Stufe 1, die ein Maximum von 400 Grad erreicht, um die Drähte miteinander verschmelzen durch Schmelzen des VG Bindeüberzug. Halten Sie die Heißluftpistole ~ 2 cm aus dem Draht und führen Sie die Waffe nach oben und unten die gerade Länge des Drahtes für ca. 5 sec aus verschiedenen Blickwinkeln. Achten Sie darauf, ständig fegen die Heißluftpistole und es nicht halten jede einzelne Stelle, da dies die HML Isolierung schmelzen und bewirken, dass die Drähte miteinander zu verschmelzen innerhalb des Bündels. </li><li> Machen Sie einen Schnitt an der Spitze der tetrode (in der Nähe der horizontalen Arm) und dann die tetrode aus dem Clip an der Unterseite. Schneiden der einzelnen Schleife, so dass es vier separate Leitungen an einem Ende der Tetrode sind, werden diese Leitungen elektrisch mit Gold Stifte oder einer Leiterplatte in einem späteren Schritt verbunden werden. </li><li> Legen Sie das ausgefüllte tetrode in einem staubfreien Betrieb zur Aufbewahrung, bis das Laufwerk abgeschlossen ist. </li></ol> 2. Individuelle Microdrive Versammlung <ol><li> Zuerst bauen die Basis mit dem Microdrive (n) halten wird. Die Basis des implantierten Microdrive ist in der Regel am stabilsten, wenn sie gesichert ist und entlang der Mittellinie des Schädels. Dieses Protokoll beschreibt die Schritte, um eine Basis mit einem einzigen Microdrive bis vier Polyamidrohr Träger halten bauen. Zusätzliche Kleinstantrieben und Röhren können leicht hinzugefügt werden, wie gebraucht. </li><li> Beginnen Sie mit einer ca. 20 mm quadratisches Stück Plexiglas Acrylglas (5 mm dick) und Sand das Acryl in einer Form, die es der Maus frei bewegen mit dem Laufwerk, nachdem es auf dem Kopf implantiert wird. </li><li> Anschließend montieren Sie die Antriebseinheit. Verwenden Sie maßgeschneiderte 30,3 x 6,3 mm Messing Führungen, die das Laufwerk Schraube tragen wird. Erstens, löten zwei Messing Führungen zusammen senkrecht. Die vertikale Führung Messing hält das Laufwerk Schraube und Elektroden, während die horizontale Stück in den Acryl-Basis verklebt werden. </li><li> Nach dem Löten das Messing Stücke zusammen, beginnen Montage des Antriebs selbst, indem ein Linsenkopf Messing Schraube durch das obere Ende der Führung und in einem Block Delrin Kunststoff. Der quadratische Block ist so ausgelegt, dass die Gewindebohrung etwas außerhalb der Mitte (0,2 mm) ist, die sich in einer Fläche des Blocks vorsteht sehr leicht aus der Führung. Dies ist die Seite, wo die Polyamidröhre Tragen der Elektroden sitzen. </li><li> Mit dem Delrin Block innerhalb der Führung und der Schraube den ganzen Weg durch, fädeln ein hex Messing Mutter, bis die Mutter fast berühren wird die Unterseite der Führung. Ziehen Sie die Mutter voll, sondern schmelzen eine kleine Menge von Lot auf das Ende, um die Mutter und die Schraube kommen, aber darauf achten, nicht zu löten anytHing auf der Führung. Nun sollte Drehen der Schraube bewegen Sie den Block Delrin oben (im Uhrzeigersinn) und nach unten (gegen den Uhrzeigersinn) vertikal entlang dem Gewinde. Abgeschnitten Thread, vorbei an der Lötmutter vorsteht. </li><li> Sobald das Laufwerk montiert worden ist, gehen Sie zurück auf die Acryl-Basis und schneiden Sie einen 3 mm breiten Schlitz, wo die Elektrode Antrieb sein wird. Übergeben Sie die horizontale Messing Führung durch den Schlitz und dann cryanoacrylate Leim, um das Stück an der Basis zu sichern. </li><li> Setzen Sie den Acryl-Basis in einen Schraubstock, um sie zu sichern. Legen Sie eine elektronische Schnittstellenkarte (EIB) auf der Oberseite der Base und markieren Sie die Stellen der beiden Bohrungen. EIBS sind Mikrochips, die ein Signal zwischen den Elektroden Drähte und einen Vorverstärker headstage bieten. Mit einem 1,5 mm Spitze Bohrer bohren sorgfältig an den Markierungen Löcher für Schrauben, die die EIB in Position zu halten, auf der Oberseite der Basis wird. Legen Sie die EIB und Faden zwei Messing-Schrauben in die Löcher. </li><li> Verwenden Mikro Präparierscheren zu vier 7 mm lange Stücke geschnitten Polyamide Schlauch. Linie die vier Rohre nebeneinander auf einem Stück gefaltete Band Labor. Bewerben Cyanacrylat zum Zentrum, um sie miteinander zu verbinden, sondern nehmen Sie vorsichtig nicht zu kleben innerhalb der Rohre selbst zu bekommen. Lassen Sie die verbundenen Rohre vollständig trocknen. </li><li> Drehen Sie das Laufwerk Basis 90 Grad, so dass die EIB-Chip vertikal ist und der Antrieb ist horizontal mit dem vorstehenden Delrin Block nach oben positioniert. Blick durch ein Binokular, eine kleine Menge Sekundenkleber auf der Delrin Gesicht vorsichtig abtupfen dann die vier verbundenen Rohre auf den Leim. Lassen Sie den Kleber vollständig eingestellt werden, bevor Sie versuchen, das Laufwerk zu verschieben. </li><li> Testen Sie, ob die Polyamid-Rohre sicher befestigt sind und dass die gesamte Baugruppe bewegt reibungslos ohne Berührung der Anleitung oder auf Widerstand. </li><li> Als nächstes bereiten die Erdungsschraube und verbinden Sie das Erdungskabel an die EIB. Machen Sie eine Erdungsschraube, indem sie eine Schraube aus Messing (3/32 &quot;) und Abschleifen die Fäden, bis nur noch 1-2 Fäden bleiben. Dieser sollte ~1 mm als dieser Schraube wird innerhalb des Schädels sitzen und ist nicht für die Gehirngewebe eindringen. </li><li> Schneiden Sie ein 30 mm Länge von Kupferdraht (die genaue Länge hängt davon ab, wo auf dem Schädel des Tieres Boden zu setzen). Der Kupferdraht sollte 100 sein - 500 um (0,004 bis 0,02 &quot;) im Durchmesser, ist dies entspricht in etwa 38 AWG bis 24 AWG Draht Übernehmen Flussmittel an beiden Enden der Kupferdraht An einem Ende, löten die Erdungsschraube an.. der Draht. Am anderen Ende, löten ein EIB-Nadel in Gold. Dieses Erdungskabel kann aufgehoben werden und mit dem EIB später während der Implantation Chirurgie. </li><li> Der nächste Schritt ist, um die Elektroden durch die Polyamid-Rohre leiten und schließen Sie sie an den Kanal Löcher auf dem EIB-Chip. Schalten Sie das Laufwerk Schraube komplett, so dass die Rohre an ihren oberen Position sind im Uhrzeigersinn. </li><li> Für einzelne Elektroden, schneiden Sie ein 50 mm Länge Stableohm 50 uM Draht und führen sie durch ein Polyamid-Rohr, so dass sie mindestens 2,0 mm über das Rohrende erweitern (für die Ausrichtung subiculum oderHippocampus). Tragen Sie einen kleinen Tropfen Sekundenkleber an der Spitze des Rohres, die Anbringung der Draht an der Röhre und die Verhinderung jeglicher Draht Bewegung. Dann verbinden Sie das lose Ende des Drahtes an einer EIB-Kanal Loch mit einer Nadel in Gold. Schneiden Sie das überschüssige Draht mit einer feinen Schere. Wiederholen Sie für andere Mikroelektroden. </li><li> Für den Anschluss Tetroden, nehmen Sie eine abgeschlossene tetrode aus der Aufbewahrungsbox. Führen Sie das Ende des fusionierten tetrode durch ein Polyamid Rohr und lassen Sie es mindestens 2,0 mm über das Rohrende (für subiculum oder Hippocampus) erstrecken. Tragen Sie einen kleinen Tropfen Sekundenkleber an der Spitze des Rohres, die Anbringung der tetrode mit dem Rohr und verhindert jede Bewegung. Nehmen Sie die vier lose Drähte am anderen Ende des tetrode und verbinden Sie jeden Draht auf ein EIB-Kanal Loch mit einer Nadel in Gold. Schneiden Sie das überschüssige Draht. Wiederholen Sie dies für die anderen Tetroden. </li></ol> 3. VersaDrive Versammlung <ol><li> Beginnen Sie den Bau einer vier tetrode VersaDrive; diese besteht aus einer Basis, Gehäuse und Kappe pieces. </li><li> Schneiden einer Polyamidschlauch bis 10 mm und führen sie durch das kleinste Loch auf einer Tetrode Träger. Lassen Sie das Rohr in der Vergangenheit die Träger sehr leicht (0,5 mm) zu verlängern. Mit 5-min Epoxy zu kleben die Polyamidrohr im Ort, wobei Sie darauf achten, nicht zuzulassen, das Epoxidharz in die Röhre selbst gehen. Wiederholen Sie dies für drei weitere Rohre und Träger. </li><li> Nachdem das Epoxid vollständig festgelegt ist, führen jeweils Polyamid Rohr durch eines der vier Löcher auf der Basis VersaDrive. Wenn alle vier Rohre durch ihre Löcher sind, schieben ein Insekt Stift durch das äußere Loch, das die Tetrode Träger ausgerichtet zu halten, und dient als Schiene für den Träger, auf Reisen. Wiederholen Sie diesen Vorgang für die drei anderen Trägern. </li><li> Nehmen Sie eine Kappe und richten Sie es mit den vier Insektennadeln so dass die Kappe die Basis abdeckt und die tetrode Träger innerhalb der Kappe befinden. Thema ein 1 mm x 5 mm Maschine Schraube durch das entsprechende Loch in der Kappe und in den tetrode Träger. Dies wird die Antriebsspindel zum Bewegen des Trägers nach oben und unten. Repessen diese für die anderen drei Schrauben. </li><li> Drehen Sie alle Schrauben im Uhrzeigersinn, bis tetrode Träger an ihren oberen Position befinden und die Polyamid-Schläuche sind sichtbar durch das Öffnen der Kappe. Mit feinen Mikro Sezieren Schere, schnitt den Schlauch direkt unter (1 mm) die Basis, so dass alle vier Polyamid Rohre gleicher Länge sind. </li><li> Mit einem Binokular, sorgfältig einfädeln einem tetrode durch eine Polyamid-Rohr. Es ist wichtig, die tetrode Draht perfekt gerade, wie es Fortschritte halten durch das Rohr wie keine Knicke oder Biegungen machen es sehr schwierig, völlig den Faden in die tetrode durch. Wiederholen Sie dies für drei weitere Tetroden. </li><li> Sobald alle Tetroden in ihre Röhren sind, sorgfältig anwenden einen kleinen Tropfen Sekundenkleber an die Spitze jeder Röhre, die Sicherung der Tetroden innerhalb ihrer jeweiligen Rohre. Seien Sie vorsichtig, keine Cyanacrylat zwischen den Trägern oder auf dem losen tetrode Drähte, die durch die Kappe hervorstehen bekommen. </li><li> Schneiden Sie die Tetroden so dass sie an den Rohren nur verlängern2,0 mm (für subiculum oder Hippocampus). Dann legen Sie das Laufwerk Basis (mit den vier Insektennadeln eingesetzt) ​​in den VersaDrive jig. Die andere Hälfte der Vorrichtung hält die VersaDrive Kappe, die alle Aufnahmeöffnungen für die Herstellung der Kanal-Verbindungen hat. </li><li> Schalten Sie das Laufwerk Schraube komplett, so dass die Tetroden in ihrer niedrigsten Position sind gegen den Uhrzeigersinn. </li><li> Vor dem Anschließen der Kabel an die tetrode gold Aufnahmen, zuerst das Erdungskabel an der Kappe. Die Kappe hat VersaDrive zwei Stiftlöcher für Masseverbindungen an der mittleren Position der beiden Reihen von Löchern. Schneiden Sie ein Kupferdraht von mindestens 30 mm (abhängig, wo auf dem Schädel, den Boden zu legen) und führen Sie es durch eines dieser Löcher Zentrum. Der Kupferdraht sollte 100 sein - 500 um (0,004 bis 0,02 &quot;) im Durchmesser, ist dies entspricht in etwa 38 AWG bis 24 AWG Draht schieben einen goldenen Behälter durch das Loch, um den Kupferdraht an Ort und Stelle zu fangen und schneiden Sie überschüssigen Draht.. Am anderen Ende des Kupferdrahtes, Flussmittel und Anlötenr dieses Drahtende zu einer Erdungsschraube (siehe 2.11.). Wiederholen Sie für die zweite Erdungskabel. </li><li> Als nächstes führen alle losen Drähte tetrode (es sollte sechzehn insgesamt) durch ihre jeweiligen Aufnahme Löcher auf der Kappe. Es ist am besten, um mit einem tetrode beginnen und fädeln die einzelnen Leitungen an die entsprechenden vier Löcher, die am Ende direkt über es. Die einzelnen tetrode Drähte sollten mit leichtem Druck behandelt werden, wie sie zerbrechlich und kann leicht quetschen, wenn gegriffen zu fest. Installieren Sie die Kappe durch Aneinanderreihung der Insektennadeln Löcher und drücken Sie passend zu der Basis. </li><li> Mit den vorstehenden tetrode Drähte durch den Deckel, drücken Sie passen die goldenen Gefäße, die Drähte in tetrode Ort zu erfassen und die elektrischen Anschlüsse. Ungefähr 50% der Drähte aus befestigt werden (über dem Deckel), sobald die Gold Hülse nach unten gedrückt wird. Trim überschüssige Draht, der aus der Oberseite der Kappe bleibt. In seltenen Fällen (weniger als 5%), wird drängen auf den nach unten gold Aufnahme zerquetschen den Drahtund brechen sie unter Aufnahme, was in einem getrennten Kanal. Diese Trennung kann nicht bis zur Impedanz Tests und Galvanotechnik Schritte (siehe 4.7) realisiert werden. </li><li> Wiederholen Sie das Einpressen Verfahren für die drei anderen Tetroden. Schalten Sie das Laufwerk Schrauben im Uhrzeigersinn, um sie zu bewegen nach oben und stellen Sie sicher, dass das Laufwerk Bewegung glatt ist. </li></ol> 4. Vergoldung der Elektroden-Tipps <ol><li> Unabhängig davon, welche Art von Mikroelektroden verwendet wird, sollten die Spitzen der Elektroden vergoldet sein, um Spitze Impedanz zu reduzieren. Dies maximiert die Fähigkeit, sicher zu erfassen und zu unterscheiden Single-Unit-Aktionspotentiale. Testen Sie die Elektrode mit der Impedanz Neuralynx nanoZ Gerät. Die nanoZ ist ein Computer-basiertes Gerät, Impedanz misst und ermöglicht automatisierte Galvanotechnik. </li><li> Zuerst drehen Sie die Schrauben Microdrive unten (gegen den Uhrzeigersinn) in die unterste Position. Dann sicheren Montage des Microdrive an einer Klammer, die es Absenken wirddie Elektrode in die Spitzen Goldplattierlösung. </li><li> Füllen Sie einen Turm mit Delrin SIFCO Gold-Lösung und der andere Turm mit destilliertem Wasser. Senken Sie die Elektrode in die Spitzen gold Lösung. </li><li> Stecken Sie das USB-Kabel in nanoZ einem Windows-basierten Computer und öffnen Sie dann die nanoZ Programm. Dieses Programm gibt Impedanz Lesungen und führen Vergoldung auf jeden angeschlossenen Kanal des Microdrive. </li><li> Öffnen Sie den Gerätemanager Drop-Down und wählen Sie die nanoZ, nach dem es erscheint &quot;Verbindung hergestellt&quot; am unteren Rand des Fensters. Als nächstes wählen Sie den passenden Adapter für die Prüfung in der Drop-Down-Menü. Klicken Sie auf &quot;Test Impedanzen&quot; und setzen Sie den Test Frequenz bis 1004 Hz (40 Zyklen, 0 ms Pause). Klicken Sie auf &quot;Test-Sonde&quot;, die die &quot;Probe Report&quot; Fenster, das alle verfügbaren Kanäle mit ihren Lesungen MOhm zeigt öffnen. Bewahren Sie diese Impedanz Werte durch Anklicken des Disketten-Symbol oder durch Auswahl von &quot;File&quot; und dann &quot;Save report&quot;. </li><li> Als nächstes wird auf &quot;DC Galvanisieren&quot; klicken und zuweisendie folgenden Werte: Mode = Spiel Impedanzen Galvanisierstrom = -1.0 uA, Target = 350 kOhm bei 1.004 Hz, 5 Pisten, 5 sec Intervall, 2 sec Pause. </li><li> Klicken Sie auf &quot;Autoplate&quot;. Das Programm wird zum ersten Mal las die Impedanz jedes Kanals, dann gelten die angegebenen Strom an diesen Kanal, Re-Test der Impedanz und die geltenden als bis das Ziel Impedanz (oder ein niedrigerer Wert) erreicht ist erforderlich. Während das Ziel ist Elektrodenimpedanz zu reduzieren, ist es möglich, dass Kanäle unter den Werten von 100 kOhm galvanisieren. In solchen Fällen ist es möglich, daß benachbarte Drähte auf der Tetrode sind miteinander kurzgeschlossen. Wenn dies geschieht, kehren Sie die aktuelle Polarität (+ 1,0 uA), um überschüssige Goldpartikel zu entfernen, Re-Test der Impedanz des Kanals, und wiederholen Sie die Galvanotechnik. Typische endgültige Impedanz Werte auf ein Bündel von vier 12,5 uM Drähte reichen von 150 bis 325 kOhm. </li><li> Wenn es einen einzigen Kanal, der nicht unter 350 kOhm hat plattiert wiederholen galvanischen Prozess.Das Programm wird über Kanäle, die das Ziel bereits erreicht haben, springen und wird nur Plattenkanälen welche nicht. </li><li> Sobald alle Kanäle auf ein akzeptables Impedanz überzogen worden, schließen Sie das Programm und nanoZ trennen Sie das Gerät. Heben Sie die Elektroden aus der Beschichtungslösung und senken Sie die Spitzen in dem destillierten Wasser Delrin Turm um abspülen überschüssige Goldpartikel. </li><li> Schalten Sie das Laufwerk Schrauben im Uhrzeigersinn, bis die Elektroden, um ihre Top-Position angehoben werden. Nun ist die Microdrive und Elektroden sind bereit für die Implantation. </li></ol>

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Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.

Wir haben eine Reihe von Techniken zur Konstruktion leicht und kompakt microdrives für die Aufnahme von extrazellulärem Einheit und Feldpotential Aktivität bei Mäusen beschrieben. Durch den Aufbau von benutzerdefinierten Kleinstantrieben mit Basen aus Acrylglas (Methylmethacrylat) gestaltet, können die Core-System leicht für mehrere Laufwerke und für das Targeting von einer Vielzahl von neuronalen Regionen angepasst werden. Wir haben erfolgreich das System zur Aufzeichnung von mehreren Zielen und Gehirn mit grö?...

Die Nutzung der Mikroelektroden-Technik zum Aufzeichnen extrazelluläre neuronale Signale in vivo hat eine lange und geschätzte Tradition in der Neurowissenschaft 1, 2. Die Fähigkeit, elektrische Aktivität von vielen Hirnregionen in frei lebenden Tier aufzunehmen ist allerdings eine neuere Technologie, die immer häufiger als der Software-Pakete für die Erfassung, Analyse und Diskriminierung von neuronalen Signalen wird immer ausgefeilter und benutzerfreundlicher 3, 4. Die technologischen Fortschritte auf der Software-Seite sind auch durch Reduzierung des Gewichts und der Großteil der implantierbare Geräte, die festgelegt wurden, ausreichend für die Aufnahme in kleine Säugetiere wie Mäuse skaliert begleitet. Durch die Verwendung von leichten (meist aus Kunststoff)-Komponenten, sind die Forscher in der Lage, die für Kleinstantrieben unabhängige Positionierung der Elektroden oder Tetroden, um eine Vielzahl von Hirnregionen 5-7 gezielt erlauben konstruieren. Selbst tiefe Strukturen des Gehirns, wie derAmygdala 6 und das Striatum 5, kann routinemäßig mit der Auswahl eines entsprechend langen Antriebsschraube ausgerichtet sein. Diese Aufnahmetechnik Forschern erlauben, High-Fidelity-neuronale Signale zu erhalten und sind im Register mit der elektrischen Aktivität einzelner Neurone aufgezeichnet intrazellulär 8, 9. Mit diesen Arten von Mikroantriebe, haben wir erfolgreich ein-Einheiten von Mäusen aufgezeichnet für bis zu zwei Monate nach der Implantation 10. Darüber hinaus hat die leichte Art der Geräte (ca. 1,5-2,0 g) in Verhaltensleistung, die vergleichbar mit nicht-implantierten Mäuse in vielen Verhaltensstörungen Aufgaben geführt. Insbesondere haben wir gezeigt, dass Mäuse implantiert normale Leistung zeigen in dem Roman Objekterkennung Aufgabe 10 und dem Objekt Platz Task (unveröffentlichte Daten). Die Verwendung von Microdrives gekoppelt mehrere Tetroden ermöglicht es den Forschern zu überwachen und zu analysieren neuronale Aktivität auf der Netzebeneaber auch die Aufnahme von mehreren Single-Einheiten innerhalb des Gehirns. Recording mit diesen Tetroden hat mehrere große Vorteile für Einheit Zwecke der Identifizierung und ermöglicht die hohe Genauigkeit Erwerb und Diskriminierung von mehreren Single-Einheiten 11. Wir beschreiben, wie zu fabrizieren und Gold-Platte tetrode bündelt und anschließend laden Sie sie in fahrbaren Elektrode Träger. Eine Art von Antrieb Träger beschreiben wir im Handel erhältlich ist und das andere ist ein einfaches, aber leicht erweiterbar, Antriebskonzept, dass mehrere Träger und tetrode Regelungen ohne eine signifikante Investition von Ressourcen aufnehmen kann.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>0.0005" (12.5 &mu;M) diameter Platinum-Iridium wire </td>
			<td>California Fine Wire</td>
			<td>CFW#100-167</td>
			<td>HML VG insulated <a href="http://www.calfinewire.com" target="_blank">www.calfinewire.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>0.002" (50 &mu;M) diameter Stableohm 675 wire</td>
			<td>California Fine Wire</td>
			<td>CFW# 100-188</td>
			<td>HML insulated Ni-Cr</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>polyamide tubing</td>
			<td>Polymicro Technologies</td>
			<td>1068150020</td>
			<td>99 micron I.D., 166 micron O.D. <a href="http://www.polymicro.com" target="_blank">www.polymicro.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>brass guides</td>
			<td>World Plastics Inc</td>
			<td></td>
			<td>3.3 x 6.6 mm</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Delrin blocks</td>
			<td>World Plastics Inc</td>
			<td></td>
			<td>3.13 x 2.5 mm</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fillister head brass screws</td>
			<td>J.I. Morris Co.</td>
			<td>00-90 x 1/2</td>
			<td>drive screw <a href="http://www.jimorrisco.com" target="_blank">www.jimorrisco.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>hex brass nuts</td>
			<td>J.I. Morris Co.</td>
			<td>00-90</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fillister head brass screws</td>
			<td>J.I. Morris Co.</td>
			<td>000-120 x 3/32</td>
			<td>EIB mount and ground screw</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>plexiglass acrylic</td>
			<td>Canal Street Plastics</td>
			<td></td>
			<td>5 mm thick, clear, <a href="http://www.cpcnyc.com" target="_blank"> www.cpcnyc.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>cyanoacrylate</td>
			<td>Krazy Glue</td>
			<td></td>
			<td>2 g tube</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>electronic interface board</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>EIB-18</td>
			<td><a href="http://www.neuralynx.com" target="_blank">www.neuralynx.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>non-cyanide gold solution</td>
			<td>SIFCO</td>
			<td>SIFCO 5355</td>
			<td><a href="http://www.sifcoasc.com" target="_blank">www.sifcoasc.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>VersaDrive 4</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td></td>
			<td>four tetrode model</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>tetrode assembly station</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>motorized tetrode spinner</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>tetrode spinner 2.0</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>VersaDrive jig</td>
			<td>Neuralynx </td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>soldering iron</td>
			<td>Radio Shack </td>
			<td>64-2802B</td>
			<td><a href="http://www.radioshack.com" target="_blank">www.radioshack.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>nanoZ</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>small bit drill/driver</td>
			<td>Ram Products </td>
			<td>Rampower 35</td>
			<td>with footpedal controller, <a href="http://www.ramprodinc.com" target="_blank">www.ramprodinc.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>drill bits</td>
			<td>Small Parts, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>3/32" bits, <a href="http://www.smallpartsinc.com" target="_blank">www.smallpartsinc.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>dissecting microscope</td>
			<td>Olympus </td>
			<td>SZ-60</td>
			<td><a href="http://www.olympusamerica.com" target="_blank">www.olympusamerica.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>heat gun</td>
			<td>Alphawire</td>
			<td>Fit gun 3</td>
			<td>use setting "1" only, <a href="http://www.alphawire.com" target="_blank">www.alphawire.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>26 AWG copper wire</td>
			<td>Arcor Electronics</td>
			<td>F26</td>
			<td>for ground wires, <a href="http://www.arcorelectronics.com" target="_blank"> www.arcorelectronics.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>soldering flux</td>
			<td>Eagle</td>
			<td>2 oz, #205</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>0.02" diameter solder</td>
			<td>Kester</td>
			<td>24-6337-0010</td>
			<td><a href="http://www.kester.com" target="_blank"> www.kester.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>benchtop vise</td>
			<td>Vacu-Vise</td>
			<td>Model 300</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>fiber optic light</td>
			<td>Nikon </td>
			<td>MKII</td>
			<td>dual light arms, <a href="http://www.nikon.com" target="_blank"> www.nikon.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>5-min epoxy</td>
			<td>Allied Electronics</td>
			<td></td>
			<td>25 ml, <a href="http://www.alliedelec.com" target="_blank"> www.alliedelec.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>fine tweezers</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-4907, RS-5010</td>
			<td>INOX material, <a href="http://www.roboz.com" target="_blank"> www.roboz.com</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>micro dissecting scissors</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5880</td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>
 Table 1. Materials and reagents used for constructing tetrodes and microdrives.

construction of microdrive arrays for chronic neural recordings in awake behaving mice

State-of-the-art elektrophysiologischen Ableitungen aus den Gehirnen von frei lebenden Tier den Forschern erlauben, gleichzeitig zu untersuchen lokalen Feldpotentiale (LFPs) aus Populationen von Neuronen und Aktionspotentiale von einzelnen Zellen, wie das Tier greift in experimentell relevanten Aufgaben. Chronisch implantierten Kleinstantrieben ermöglichen Gehirn Aufnahmen über einen Zeitraum von mehreren Wochen dauern. Miniaturisierte Antriebe und Leichtbau-Komponenten erlauben für diese langfristige Aufnahmen in kleinen Säugetieren, wie Mäusen auftreten. Durch die Verwendung Tetroden, die aus dicht geflochtenen Bündeln von vier Elektroden in der jeder Draht einen Durchmesser von 12,5 um bestehen, ist es möglich, physiologisch aktiven Neuronen in oberflächlichen Hirnregionen wie der Großhirnrinde, dorsalen Hippocampus und subiculum isolieren, sowie als tiefere Regionen wie dem Striatum und der Amygdala. Darüber hinaus gewährleistet diese Technik stabil, high-fidelity neuronalen Aufnahmen als das Tier mit einem Sorten in Frage gestellt wirdty von Verhaltens-Aufgaben. Dieses Manuskript beschreibt verschiedene Techniken, die optimiert wurden, um aus dem Gehirn der Maus aufzeichnen. Zuerst zeigen wir, wie man Tetroden herzustellen, laden Sie sie in fahrbaren Rohre und Gold-Platte ihre Tipps, um ihre Impedanz von MOhm reduzieren kOhm Bereich. Zweitens zeigen wir, wie Sie eine benutzerdefinierte Microdrive Montage zum Tragen und Bewegen der Tetroden vertikal, mit dem Einsatz von kostengünstigen Materialien zu konstruieren. Drittens zeigen wir die Schritte zur Montage eines handelsüblichen Microdrive (Neuralynx VersaDrive) die entworfen, um unabhängig bewegliche Tetroden tragen wird. Schließlich präsentieren wir repräsentative Ergebnisse der lokalen Feldpotentiale und Single-Unit-Signale in der dorsalen subiculum von Mäusen erhalten. Diese Techniken können leicht modifiziert werden, um verschiedene Arten von Elektroden-Arrays und Aufzeichnungsschemata im Gehirn der Maus unterzubringen.

<p class="jove_content"&gt; Nach Implantation der microdrive und Senken der Elektroden an die vorgesehenen Ziele Gehirn ein verstärktes Datenerfassungs-System, wie ein Neuralynx Lynx-8, zum Aufzeichnen neuronale Signale benötigt. Repräsentative neuronalen Aufnahmen von lokalen Feldpotentiale (LFPs) und Single-Unit-Aktionspotentiale (oft als &quot;Spikes&quot;) von der Maus dorsal subiculum sind in gezeigt<strong&gt; Abbildung 2</strong&gt;. LFP-Signale wurden bei 3 kHz und Band-Pass zwischen 0,1-500 Hz gefiltert abgetastet (<strong&gt; 2A</s...

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Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Die Konstruktion und Montage von Mikroantriebe für in vivo elektrophysiologischen Aufnahmen von Gehirn Signale von der Maus beschrieben. Durch das Anbringen Mikroelektroden Bundles robust fahrbare Träger erlauben diese Techniken für die langfristige und stabile neuronale Aufnahmen. Das leichte Design ermöglicht uneingeschränkte Verhaltensleistung durch das Tier folgende Laufwerk Implantation.

Bau Microdrive Arrays für chronische Neural Recordings in Awake benimmt Mäuse

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

construction-microdrive-arrays-for-chronic-neural-recordings-awake

Research

JoVE Journal

Behavior

20.0K Aufrufe.  North Shore LIJ Health System. Die Konstruktion und Montage von Mikroantriebe für in vivo elektrophysiologischen Aufnahmen von Gehirn Signale von der Maus beschrieben. Durch das Anbringen Mikroelektroden Bundles robust fahrbare Träger erlauben diese Techniken für die langfristige und stabile neuronale Aufnahmen. Das leichte Design ermöglicht uneingeschränkte Verhaltensleistung durch das Tier folgende Laufwerk Implantation.

Serie: Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice

Studies of long-term potentiation of synaptic efficacy, an activity-dependent synaptic phenomenon having properties that make it attractive as a potential cellular mechanism underlying learning and information storage, have long been used to elucidate the physiology of various neuronal circuits in the hippocampus, amygdala, and other limbic and cortical structures. With this in mind, transgenic mouse models of neurological diseases represent useful platforms to conduct long-term&#160;potentiation (LTP) studies to develop a greater understanding of the role of genes in normal and abnormal synaptic communication in neuronal networks involved in learning, emotion and information processing. This article describes methodologies for reliably inducing LTP in the freely behaving mouse. These methodologies can be used in studies of transgenic and knockout freely&#160;behaving mouse models of neurodegenerative diseases.

Transgenic and knockout mouse models of neurological diseases are useful for studying the role of genes in normal and abnormal neurophysiology. This article describes methodologies which can be used to study long-term potentiation, a cellular mechanism which may underlie learning and memory, in transgenic and knockout freely&#160;behaving mouse models of neuropathology.

Langzeit-Potenzierung der perforant Pathway-Gyrus dentatus Synapse in Frei Behaving Mäuse

Studies of long-term potentiation of synaptic efficacy, an activity-dependent synaptic phenomenon having properties that make it attractive as a potential ...

Forschung

Verhalten

Automated, Quantitative Cognitive/Behavioral Screening of Mice: For Genetics, Pharmacology, Animal Cognition and Undergraduate Instruction

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and pharmacological manipulations on basic mechanisms of cognition and learning in mice. A standard polypropylene mouse housing tub is connected through an acrylic tube to a standard commercial mouse test box. The test box has 3 hoppers, 2 of which are connected to pellet feeders. All are internally illuminable with an LED and monitored for head entries by infrared (IR) beams. Mice live in the environment, which eliminates handling during screening. They obtain their food during two or more daily feeding periods by performing in operant (instrumental) and Pavlovian (classical) protocols, for which we have written protocol-control software and quasi-real-time data analysis and graphing software. The data analysis and graphing routines are written in a MATLAB-based language created to simplify greatly the analysis of large time-stamped behavioral and physiological event records and to preserve a full data trail from raw data through all intermediate analyses to the published graphs and statistics within a single data structure. The data-analysis code harvests the data several times a day and subjects it to statistical and graphical analyses, which are automatically stored in the &#34;cloud&#34; and on in-lab computers. Thus, the progress of individual mice is visualized and quantified daily. The data-analysis code talks to the protocol-control code, permitting the automated advance from protocol to protocol of individual subjects. The behavioral protocols implemented are matching, autoshaping, timed hopper-switching, risk assessment in timed hopper-switching, impulsivity measurement, and the circadian anticipation of food availability. Open-source protocol-control and data-analysis code makes the addition of new protocols simple. Eight test environments fit in a 48 in x 24 in x 78 in&#160;cabinet; two such cabinets (16 environments) may be controlled by one computer.

Fully automated system for measuring physiologically meaningful properties of the mechanisms mediating spatial localization, temporal localization, duration, rate&#160;and probability estimation, risk assessment, impulsivity, and the accuracy and precision of memory, in order to assess the effects of genetic and pharmacological manipulations on foundational mechanisms of cognition in mice.

Automatisierte, Quantitative Kognition / Verhalten Screening der Mäuse: Für Genetik, Pharmakologie, Animal Cognition und Undergraduate-Unterricht

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and ...

Cortical Source Analysis of High-Density EEG Recordings in Children

EEG is traditionally described as a neuroimaging technique with high temporal and low spatial resolution. Recent advances in biophysical modelling and signal processing make it possible to exploit information from other imaging modalities like structural MRI that provide high spatial resolution to overcome this constraint1. This is especially useful for investigations that require high resolution in the temporal as well as spatial domain. In addition, due to the easy application and low cost of EEG recordings, EEG is often the method of choice when working with populations, such as young children, that do not tolerate functional MRI scans well. However, in order to investigate which neural substrates are involved, anatomical information from structural MRI is still needed. Most EEG analysis packages work with standard head models that are based on adult anatomy. The accuracy of these models when used for children is limited2, because the composition and spatial configuration of head tissues changes dramatically over development3.&#160;
In the present paper, we provide an overview of our recent work in utilizing head models based on individual structural MRI scans or age specific head models to reconstruct the cortical generators of high density EEG. This article describes how&#160;EEG recordings are acquired, processed, and analyzed with pediatric populations at the London Baby Lab, including laboratory setup, task design, EEG preprocessing, MRI processing, and EEG channel level and source analysis.&#160;

In recent years, there has been increasing interest in estimating the cortical sources of scalp measured electrical activity for cognitive neuroscience experiments. This article describes how high density EEG is acquired and how recordings are processed for cortical source estimation in children from the age of 2 years at the London Baby Lab.

Kortikale Quelle Analyse von High-Density-Aufnahmen EEG bei Kindern

EEG is traditionally described as a neuroimaging technique with high temporal and low spatial resolution. Recent advances in biophysical modelling and ...

A Novel Experimental and Analytical Approach to the Multimodal Neural Decoding of Intent During Social Interaction in Freely-behaving Human Infants

Understanding typical and atypical development remains one of the fundamental questions in developmental human neuroscience. Traditionally, experimental paradigms and analysis tools have been limited to constrained laboratory tasks and contexts due to technical limitations imposed by the available set of measuring and analysis techniques and the age of the subjects. These limitations severely limit the study of developmental neural dynamics and associated neural networks engaged in cognition, perception and action in infants performing &#8220;in action and in context&#8221;. This protocol presents a novel approach to study infants and young children as they freely organize their own behavior, and its consequences in a complex, partly unpredictable and highly dynamic environment. The proposed methodology integrates synchronized high-density active scalp electroencephalography (EEG), inertial measurement units (IMUs), video recording and behavioral analysis to capture brain activity and movement non-invasively in freely-behaving infants. This setup allows for the study of neural network dynamics in the developing brain, in action and context, as these networks are recruited during goal-oriented, exploration and social interaction tasks.

This protocol presents a novel methodology for the neural decoding of intent from freely-behaving infants during unscripted social interaction with an actor. Neural activity is acquired using non-invasive high-density active scalp electroencephalography (EEG). Kinematic data is collected with inertial measurement units and supplemented with synchronized video recording.

A Novel experimentellen und analytischen Ansatz zur multimodalen Neural Decoding of Intent Während Soziale Interaktion in Frei-verhalten menschliche Säuglinge

Understanding typical and atypical development remains one of the fundamental questions in developmental human neuroscience. Traditionally, experimental ...

A Pressure Injection System for Investigating the Neuropharmacology of Information Processing in Awake Behaving Macaque Monkey Cortex

The top-down modulation of feed-forward cortical information processing is functionally important for many cognitive processes, including the modulation of sensory information processing by attention. However, little is known about which neurotransmitter systems are involved in such modulations. A practical way to address this question is to combine single-cell recording with local and temporary neuropharmacological manipulation in a suitable animal model. Here we demonstrate a technique combining acute single-cell recordings with the injection of neuropharmacological agents in the direct vicinity of the recording electrode. The video shows the preparation of the pressure injection/recording system, including preparation of the substance to be injected. We show a rhesus monkey performing a visual attention task and the procedure of single-unit recording with block-wise pharmacological manipulations.

Here, we show the pressure injection of neuropharmacological substances during single-cell recording in an awake, behaving macaque monkey. This procedure allows pharmacological manipulation in the direct vicinity of a cortical recording site.

Ein Druckinjektionssystem zur Untersuchung der Neuropharmakologie der Informationsverarbeitung in Awake Behaving Makaken Cortex

The top-down modulation of feed-forward cortical information processing is functionally important for many cognitive processes, including the modulation ...

Using Laser Doppler Imaging and Monitoring to Analyze Spinal Cord Microcirculation in Rat

Laser Doppler flowmetry (LDF) is a noninvasive method for blood flow (BF) measurement, which makes it preferable for measuring microcirculatory alterations of the spinal cord. In this article, our goal was to use both Laser Doppler imaging and monitoring to analyze the change of BF after spinal cord injury. Both the laser Doppler image scanner and the probe/monitor were being employed to obtain each readout. The data of LDPI provided a local distribution of BF, which gave an overview of perfusion around the injury site and made it accessible for comparative analysis of BF among different locations. By intensely measuring the probing area over a period of time, a combined probe was used to simultaneously measure the BF and oxygen saturation of the spinal cord, showing overall spinal cord perfusion and oxygen supply. LDF itself has a few limitations, such as relative flux, sensitivity to movement, and biological zero signal. However, the technology has been applied in clinical and experimental study due to its simple setup and rapid measurement of BF.

Here we present a combination of laser Doppler perfusion imaging (LDPI) and laser Doppler perfusion monitoring (LDPM) to measure spinal cord local blood flows and oxygen saturation (SO2), as well as a standardized procedure for introducing spinal cord trauma on rat.

Mittels Laser-Doppler Imaging und Überwachung, Rückenmark Mikrozirkulation in der Ratte zu analysieren

Laser Doppler flowmetry (LDF) is a noninvasive method for blood flow (BF) measurement, which makes it preferable for measuring microcirculatory ...

A Wireless, Bidirectional Interface for In Vivo Recording and Stimulation of Neural Activity in Freely Behaving Rats

In vivo electrophysiology is a powerful technique to investigate the relationship between brain activity and behavior at a millisecond and micrometer scale. However, current methods mostly rely on tethered cable recordings or only use unidirectional systems, allowing either recording or stimulation of neural activity, but not at the same time or same target. Here, a new wireless, bidirectional device for simultaneous multichannel recording and stimulation of neural activity in freely behaving rats is described. The system operates through a single portable head stage that both transmits recorded activity and can be targeted in real-time for brain stimulation using a telemetry-based multichannel software. The head stage is equipped with a preamplifier and a rechargeable battery, allowing stable long-term recordings or stimulation for up to 1 h. Importantly, the head stage is compact, weighs 12 g (including battery) and thus has minimal impact on the animal&#180;s behavioral repertoire, making the method applicable to a broad set of behavioral tasks. Moreover, the method has the major advantage that the effect of brain stimulation on neural activity and behavior can be measured simultaneously, providing a tool to assess the causal relationships between specific brain activation patterns and behavior. This feature makes the method particularly valuable for the field of deep brain stimulation, allowing precise assessment, monitoring, and adjustment of stimulation parameters during long-term behavioral experiments. The applicability of the system has been validated using the inferior colliculus as a model structure.

A Wireless, Bidirectional Interface for In Vivo Recording and Stimulation of Neural Activity in Freely Behaving Rats

A wireless, bidirectional system for multi-channel neural recordings and stimulation in freely behaving rats is introduced. The system is light and compact, thus having minimal impact on the animal&#180;s behavioral repertoire. Moreover, this bidirectional system provides a sophisticated tool to assess causal relationships between brain activation patterns and behavior.

Ein kabelloses, bidirektionale Schnittstelle für In Vivo Aufnahme und Stimulation der neuronalen Aktivität in Ratten frei Verhalten

In vivo electrophysiology is a powerful technique to investigate the relationship between brain activity and behavior at a millisecond and micrometer ...

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often stereotyped actions elicited in response to innately aversive sensory stimuli, but their success requires enough flexibility for adapting to different spatial environments, which can change rapidly. Here, we describe a behavioral assay to evaluate the influence of learned spatial knowledge on defensive behaviors in mice. We have adapted the widely used Barnes maze spatial memory assay to investigate how mice navigate to a shelter during escape responses to innately aversive sensory stimuli in a novel environment, and how they adapt to acute changes in the environment. This new assay is an ethological paradigm that does not require training and exploits the natural exploration patterns and navigation strategies in mice. We propose that the set of protocols described here are a powerful means of studying goal-directed behaviors and stimulus-triggered navigation, which should be of interest to both the fields of instinctive behaviors and spatial memory.

This protocol describes a behavioral assay, based on the Barnes maze test, to study how instinctive defensive actions are modified by the knowledge of spatial environment.

Ein Verhaltens-Assay für die Untersuchung der Rolle des räumlichen Gedächtnisses während der instinktiven Verteidigung bei Mäusen

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

Das unvorhersehbare milde Dauerstress Protokoll zur Induktion Anhedonie bei Mäusen

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various physiological or pathological changes. The object location task (OLT) and the novel object recognition task (NORT) are two effective behavioral tasks commonly used to reveal the function and relative health of specific brain regions involved in memory. While both of these tests exploit the inherent preference of mice for the novelty to reveal memory for previously encountered objects, the OLT primarily evaluates spatial learning, which relies heavily on hippocampal activity. The NORT, in contrast, evaluates non-spatial learning of object identity, which relies on multiple brain regions. Both tasks require an open-field-testing arena, objects with equivalent intrinsic value to mice, appropriate environmental cues, and video recording equipment and the software. Commercially available systems, while convenient, can be costly. This manuscript details a simple, cost-effective method for building the arenas and setting up the equipment necessary to perform the OLT and NORT. Furthermore, the manuscript describes an efficient testing protocol that incorporates both OLT and NORT and provides typical methods for data acquisition and analysis, as well as representative results. Successful completion of these tests can provide valuable insight into the memory function of various mouse model systems and appraise the underlying neural regions that support these functions.

Here we provide a protocol which includes comprehensive instructions for the economical establishment of murine object location and novel object recognition behavioral testing, including the design, cost, and construction of required equipment as well as execution of behavioral testing, data collection, and analysis.