This work was supported by the National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (RO1 AA014925 awarded to Dr. Patricia H. Janak at University of California, San Francisco, CA, USA), Fonds de recherche du Quebec &#8211; Sant&#233; (NC) and the Natural Sciences and Engineering Research Council (NC, 387224-2010). The open-access publication of this article was made possible by sponsorship from Med Associates Inc.

Alle Verfahren werden von der Animal Research Ethics Committee an der Concordia Universität genehmigt und stimmen mit den Empfehlungen des Canadian Council on Animal Care. 1. Tiere <ol><li> Erhalten männlichen Long-Evans-Ratten (220 - 240 g bei Ankunft). </li><li> Pflegen Ratten in einem Temperatur (21 ° C) und Luftfeuchtigkeit (44%) kontrolliert Tierstation, auf einem 12 Stunden Licht-Dunkel-Zyklus mit Lichtern auf 7:00 Uhr. </li><li> Paar-Haus Ratten bei der Ankunft. Nach 3 Tagen, Hausratten einzeln in Plastikkäfigen Schuhkarton mit Beta-Chip-Bettwäsche, eine Nylon-Knochen und freien Zugang zu Standardrattenfutter und Wasser. Verwenden Käfig Deckel, die doppelte Ösen für die nachfolgende Platzierung einer zweiten Flasche ermöglichen, zusätzlich zu der Wasserflasche zu haben. HINWEIS: Die Ratten einzeln untergebracht werden, sobald sie in der Tierstation ankommen. </li><li> Beginnen, Ratten täglich behandeln. HINWEIS: Als Richtwert ist eine Woche der Behandlung in der Regel ausreichend, um sie als pi akklimatisierencked und vom Experimentator behandelt. </li></ol> 2. Gelegentliche Ethanol-Zugang im Käfig HINWEIS: Verhaltens intermittierende Ethanol-Zugang in den eigenen Käfig, um sicherzustellen, dass Ratten wird physiologisch relevanten Mengen von Ethanol, bevor das Verhaltenstraining Phase des Experiments beginnt 17-19 trinken. Initiieren dieses Verfahren während der Lichtphase, obwohl sie jederzeit während der hellen oder dunklen Zyklus initiiert werden. <ol><li> Bereiten Sie zwei Flaschen für jede Ratte. <ol><li> Verwenden Sie ein 100-ml-Plastikmesszylinder als Ethanol-Flasche und einer 473 ml Standard-Kunststoff-Wasserflasche. Verwenden Sie eine relativ geringe Kapazität Ethanol-Flasche, fast auf maximale Lautstärke Kapazität gefüllt, um den Verlust von Ethanol durch Leckage und Verdunstung zu minimieren. </li><li> Füllen Sie eine Flasche mit 15% Ethanol, 95% durch Verdünnen Ethanol in Leitungswasser. HINWEIS: Andere Ethanolkonzentrationen, wie 10% oder 20%, können anstelle von 15% Ethanol verwendet werden. </li><li> Fiwerde die zweite Flasche mit Leitungswasser. </li><li> Legen Sie eine Gummistopfens mit einer Zuführungsschlauch, der ein Kugellager, um ein Auslaufen zu minimieren, in jede Flasche enthält. </li></ol></li><li> Bis zwei Steuer Käfige, identisch zu den Käfigen mit der Ausnahme, dass die Steuer Käfige haben Ratten oder Bettwäsche enthalten behandelt eingestellt. <ol><li> Bereiten Ethanol und Wasser-Flaschen für die Steuer Käfige wie in den Schritten 2.1.1 - 2.1.4. </li><li> Verwenden Sie die von den Steuer Käfige erhalten, um für Verschütten und / oder Verdampfung, die im Laufe des Ethanols Zugriffssitzung auftreten können (wie in den Schritten 2.8.1 beschrieben - 2.8.2) Schutzmaßnahmen. </li></ol></li><li> Wiegen alle Ethanol und Wasser-Flaschen. Notieren Sie alle Gewichte. </li><li> Wiegen alle Ratten. Notieren Sie alle Gewichte. </li><li> Legen Sie das Ethanol-Flasche und die Wasserflasche auf jedem Heimkäfig Käfig und Kontrolle zugleich. Lassen Sie beide Flaschen auf die Käfige für 24 Stunden. </li><li> Am Ende des 24-Stunden-Zeitraum, entfernen Sie die beiden Flaschen aus derKäfige gleichzeitig. </li><li> Wiegen alle Ethanol und Wasser-Flaschen. Notieren Sie alle Gewichte. </li><li> Um zu bestimmen, wie viel Ethanol und Wasser wurde während des 24 Stunden-Zeitraum verbraucht wird, subtrahiert das Gewicht jeder Flasche, wenn es aus dem Käfig aus dem Gewicht der Flasche entfernt werden, wenn es auf dem Käfig 24 Stunden früher für jede Ratte gegeben. <ol><li> Machen Sie dasselbe für die beiden Regel Käfige, und dann die Berechnung der Durchschnittsbetrag der Verschüttung für jede Flüssigkeit. </li><li> Subtrahieren Sie die durchschnittliche Menge von Ethanol und Wasser Verschütten bzw. aus den entsprechenden Ethanol-und Wasserverbrauch Maßnahmen für jede Ratte. </li><li> Verwenden Sie diese Verschütten gesteuert Unterschied Maßnahmen zur Ethanolkonsum in g / kg, Verbrauch von Wasser und Ethanol Vorlieben zu berechnen. </li></ol></li><li> Ethanol Verbrauch (g / kg), das erste Gewicht (g) Ethanol-Lösung in das Volumen (ml) verbraucht zu konvertieren, basierend auf der Dichte der gesamten Lösung (Ethanol + Wasser-Komponenten) zu berechnen, nachder Formel Volumen (ml) = Gewicht (g) / Dichte (g / ml). HINWEIS: Die Dichte der Lösung wird als Funktion der Ethanolkonzentration variieren. <ol><li> Als Nächstes multiplizieren das Volumen (ml) Ethanol-Lösung durch die Dichte (g / ml) Ethanol für die spezifische Anteil Lösung verwendet skaliert verbraucht, um das Gewicht (g) an Ethanol zu erhalten. </li><li> Teilen Sie das Gewicht (g) Ethanol durch das Rattengewicht (kg) verbraucht, um die g / kg Maß der Ethanolkonsum zu erhalten. </li></ol></li><li> Ethanol Vorlieben zu berechnen, ausdrücken Ethanolaufnahme (ml) als Prozentsatz des Gesamtflüssigkeit (Ethanol + Wasser, ml) Aufnahme. </li><li> Bringen Sie die Wasserflasche nur zurück nach Hause Käfig der Ratte. Für die nächsten 24 Stunden, geben die Ratten Zugang zu Wasser, aber nicht zu Ethanol. Statt einer Flasche Ethanol, legen Sie ein vorgewogen zweite Wasserflasche auf dem Käfig. </li><li> Am Ende des 24-Stunden-Zeitraum, entfernen Sie die beiden Wasserflaschen aus dem Käfig in der gleichen Zeit. </li><li> Wiegen beide Arten von Wasser-Flaschen. Notieren Sie alle weights. </li><li> Subtrahieren das Gewicht jeder Flasche, wenn es aus dem eigenen Käfig von dem Gewicht der Flasche entfernt werden, wenn sie auf der Heimkäfig 24 Stunden zuvor gelegt, Subtrahieren der durchschnittlichen Verschütten Maßnahme aus Steuer Käfige erhalten wie in den Schritten 2.8.1 beschrieben - 2.8.2. </li><li> Verwenden Sie diese Verschütten gesteuerte Unterschied Maßnahmen zur Wasserverbrauch zu berechnen. </li><li> Beginnen Sie den Zyklus erneut, indem sowohl Ethanol und Wasser-Flaschen an Ratten, wie in den Schritten 2.1 bis 2.14 beschrieben. <ol><li> Wiederholen Sie diesen Zyklus für mehrere (ca. 12) Sitzungen, um eine hohe und stabile Ebenen der Ethanolkonsum zu induzieren. Siehe Abbildung 1 für repräsentative Ergebnisse der Ethanolkonsum (g / kg) im Käfig. </li><li> Abwechselnd die räumliche Lage der Ethanol und Wasserflasche auf dem Käfigdeckel über die Sitzungen, die Entwicklung von Seitenpräferenz zu verhindern. </li><li> Machen Sie eine frische Ethanollösung einmal pro Woche, um genaue und stabile Ethanolkonzentration über zu gewährleistenSitzungen. Minimierung der Auswirkungen der Verdampfung von Ethanol über eine längere Zeitdauer unter Verwendung dieses Ansatzes. </li></ol></li></ol> 3. Geräte <ol><li> Haus jeder Klimakammer in einer belüfteten, schalldämpfenden Kabine. </li><li> Konstruieren jedes Konditionierungskammer aus einem Edelstahl-Metallstab Stock, eine klare Polycarbonat Decke, klarem Polycarbonat Rückwand und Fronttür und Aluminium Metallplatte Seitenwände. <ol><li> Installieren Sie eine Fluidöffnung zentral in der Nähe der Basis der rechten Seitenwand Metall. Rüsten den Eingang der Fluidanschluss mit einem Infrarot-Lichtschranke, um Einträge in die Öffnung zu erfassen. </li><li> Verbinden Polyethylenschlauch von der Rückseite des Fluidöffnung zu einer 20 ml Spritze mit Ethanol unter Verwendung eines stumpfen Nadel. Legen Sie die Spritze in eine Spritzenpumpe außerhalb der schalldämpfenden Schrank gelegen. Für Pawlow Diskriminierung Schulungen, laden Ethanol in die Spritze, bevor Sie es in die Pumpe. Prime der Schlauch by manuell Förderung der Pumpe, und wischen Sie das überschüssige Ethanol aus dem Fluidanschluss. </li><li> Auf der linken Seitenwand, installieren Sie einen weißen houselight zentral in der Nähe der Decke der Kammer. </li><li> Installieren Sie einen Clicker (2 Hz-Zyklus) und einen weißen Rauschgenerator mit Lautsprecher in der linken oberen Ecke des linken Seitenwand. </li></ol></li><li> Statten Sie jeden Klimakammer mit einer bestimmten Konfiguration von visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen zu einem unverwechselbaren Kontext zu schaffen. <ol><li> Verwenden Sie zwei unterschiedliche Kontexte, bezeichnet Kontext 1 und Kontext 2. Konfigurieren Sie die Hälfte der Klimakammern als Kontext 1 und die andere Hälfte als Kontext 2. </li><li> Um Kontext 1 zu erstellen, legen Sie schwarze Pappe Platten über die Decke und die vorderen und hinteren Wänden der Kammer, Spray Zitronenduft (10% v / v, durch Verdünnen Zitronenöl in Leitungswasser) in eine Petrischale und legen Sie sie in der Mitte eines Metallabfallfach unter dem Boden der Kammer, und legen Sie eine klare Polycarbonat Bodenplatte über dem Metall rod Boden. Säumen den Abfallbehälter mit einem saugfähigen Papiertuch oder Bank-Liner. </li><li> Um Kontext 2 zu erstellen, lassen Sie die Decke und Vorder-und Rückwände der Kammer aufgedeckt, so dass sie klar sind, sprühen Mandelgeruch (10% v / v, durch Verdünnen Benzaldehyd in Leitungswasser) in eine Petrischale und legen Sie sie zentral in einem Metallabfallfach unter dem Boden der Kammer, und legen Sie eine perforierte Metallbodenplatte über die Metallstange Boden. Säumen den Abfallbehälter mit einem saugfähigen Papiertuch oder Bank-Liner. </li></ol></li></ol> 4. Habituation Gewöhnen Ratten auf die Verhaltenstraining Raum und jeder der beiden Kontexte innerhalb Anlage Kammern. In dieser Phase des Experiments nicht Ethanol in den 20 ml Spritzen geladen. <ol><li> Ratten zu gewöhnen, um den Prozess der von der Tierstation auf die Verhaltensschulungsraum im Labor in zwei kurzen Gewöhnungs Sitzungen transportiert. <ol><li> In der ersten Sitzung, laden die Ratten in ihre Käfige auf einem Rollwagen in der Tierstation, und transportieren sie zu den Verhaltens-Schulungsraum im Labor. Beleuchten die Raumbeleuchtung, schalten Sie auf die Fans in jedem schalldämpfenden Schrank, den Raum zu verlassen, schließen Sie die Tür und ließ die Ratten anpassen, um diese neue Umgebung für 20 Minuten, während sie in ihre Käfige auf dem Wagen zu bleiben. Am Ende dieser 20 Minuten Zeit, kehren die Ratten in die Tierstation. </li><li> In der zweiten Sitzung, bringen die Ratten auf die Verhaltensschulungsraum im Labor. Nach wie vor, das Licht und Schrank Fans in den Raum. Bleiben im Zimmer, bei geschlossener Tür, um Ablenkungen zu minimieren und zu behandeln und wiegen jede Ratte in der Verhaltensschulungsraum. Notieren Sie sich die Gewichte, und dann die Ratten zurück zum Tierstation. </li></ol></li><li> Gewöhnen Ratten zu den Klimakammern in zwei kurzen Gewöhnungs Sitzungen. <ol><li> Transportieren die Ratten auf die Verhaltensschulungsraum, notieren das Gewicht jeder Ratte,und laden Sie jede Ratte in die Klimakammer bezeichnet. </li><li> In der ersten Sitzung festgelegt Gewöhnung bis die Hälfte der Kammern als Kontext 1 und den Rest als Kontext 2. </li><li> In der zweiten Sitzung Gewöhnung jede Kammer einzurichten mit dem Kontext, die nicht in der vorherigen Sitzung verwendet wurde. </li><li> Gewöhnung führen Sitzungen in einer Art und Weise ausgeglichen, so dass die Hälfte der Ratten werden zunächst Kontext 1 ausgesetzt, gefolgt von Kontext 2, und die andere Hälfte sind erste Kontext 2 ausgesetzt, gefolgt von Kontext 1. Idealerweise führen beide Gewöhnung Sitzungen in der am gleichen Tag, auch wenn sie sich über zwei Tage verteilt werden könnte, wenn nötig. </li><li> Für Gewöhnung Sitzungen, verwenden Sie ein Computerprogramm, um die houselight 1 min zu beleuchten, nachdem das Programm ausgegeben wurde. Notieren Sie sich die Gesamtzahl der Fluidanschluss Einträge während eines 20 Minuten-Sitzung gemacht. Am Ende der Sitzung, programmieren die houselight zu deaktivieren. Ethanol oder jede Merkmale während Gewöhnung Sitzungen präsentieren nicht. </li></ol></li&gt; <li> Ratten zu entfernen aus den Kammern, kehren sie in ihre Heimatkäfige, und transportieren sie zurück in die Tierstation. </li><li> Reinigen Sie das Gerät (zB Bodenplatten, Abfallschalen, Petrischalen). Siehe Schritt 5.7 für weitere Details. </li></ol> 5. Pawlowdiskriminierungstraining (PDT) Zug Ratten, die verhaltens unterscheiden zwischen einem Gehör Cue, die mit Ethanol und einem zweiten Gehör Cue, die nicht gepaart ist. In dieser Phase des Experiments, füllen die 20 ml Spritzen mit 15% Ethanol. <ol><li> Statten Sie jeden Klimakammer mit einer bestimmten Konfiguration von visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen zu einem unverwechselbaren Kontext zu schaffen, wie in den Schritten 3.3.2 und 3.3.3 beschrieben <ol><li> Weisen Sie die Hälfte der Ratten Kontext 1 und die andere Hälfte zum Kontext 2 in einem Gegengewichts Mode, basierend auf Ethanolkonsum und Vorzugs gemittelt über die letzten 2 Sitzungen des Heimkäfig Ethanol Zugangsverfahren. Beziehen sich auf die Fortsetzungext während PDT verwendet als Kontext A. HINWEIS: Jede Ratte sollte nur einen Kontext zu erleben in dieser Phase der Ausbildung. </li><li> Stellen Sie sicher, dass die Geruchsreizes ist die letzte Kontextreiz, jedem Behandlungsraum hinzugefügt werden. Schließen Sie die Türen der Kammer und dem schalldämpfenden Kabine, um den olfaktorischen Reiz enthalten und die Vermischungen künftig von verschiedenen Gerüche zu minimieren. </li></ol></li><li> Bringen die Ratten in der Verhaltensschulungsraum, notieren das Gewicht jeder Ratte, und laden Sie jede Ratte in die Klimakammer bezeichnet. </li><li> Starten Sie den Computer-Programm, das die folgende Sequenz von Ereignissen während jeder Sitzung PDT steuert. <ol><li> 5 min nach dem Programm ausgegeben wurde, beleuchten die houselight. </li><li> Präsentieren Sie das weiße Rauschen Reiz und der Clicker Reiz 16 Mal jeweils. Bestimmen Sie eine dieser auditive Reize, um die CS + und die andere, um die CS sein, in einer Art und Weise ausgeglichen über beide Kontexte. </li><li> Machen jedes CS + und CS-Studie last 10 sek. </li><li> Liefern 0.2 ml Ethanol in die Fluidöffnung in den letzten 6 sec des CS +. Keinerlei Ethanol während der CS nicht liefern. </li><li> Machen jedes PDT-Sitzung letzten 58 min im Durchschnitt. Präsentieren Sie die CS + und CS die jeweils auf einer variablen Zeit 67 sec Zeitplan. </li><li> Datensatz Fluidöffnung Eingaben während der 10 sec CS Intervalls (10 s bei CS Präsentation), die 10 Sekunden vor-CS Intervalls (10 s unmittelbar vor Beginn CS) und 10 sec nach der CS Intervalls (10 s sofort folgenden CS-Offset) sowohl für CS + und CS-Präsentationen, sowie der Gesamtfluidanschluss Einträge für die gesamte Sitzung. Auch aufzeichnen die Dauer der einzelnen Port-Eintrag in diesen Intervallen. </li><li> Am Ende der Sitzung, drehen Sie den houselight aus. </li></ol></li><li> Ratten zu entfernen aus den Kammern, kehren sie in ihre Heimatkäfige, und transportieren sie zurück in die Tierstation. </li><li> Überprüfen Sie die Fluidanschlüsse, um sicherzustellen, dass Ratten, die verbraucht 3,2 ml Ethanol in jeder PDT s geliefertession. </li><li> Spülen Sie das Ethanol aus dem Polyethylenschlauch mit einer 60 ml Spritze mit einer kleinen Menge Wasser. Dann passieren 60 ml Luft durch den Schlauch mit einem zweiten, leeren Spritze, um sicherzustellen, dass es trocken ist. </li><li> Reinigen Sie das Gerät. Für die tägliche Reinigung, waschen Sie die Bodenplatten, Abfallfächer und Petrischalen. Einmal in der Woche, reinigen Sie die gesamte Konditionierungskammer. Verwenden Sie keine Reinigungsmittel duftende Einführung zu vermeiden unerwünschte Gerüche in die Versuchsapparatur. </li><li> Weiter PDT-Sitzungen täglich bis Ratten zeigen stabile Diskriminierung in ihrem Port-Eintrag Antworten auf die CS + vs CS. HINWEIS: Port-Eintrag in Reaktion auf den CS + gemacht sollte über Sitzungen zu erhöhen, während Porteinträge in Reaktion auf die CS hergestellt tief bleiben. Die genaue Anzahl der PDT-Sitzungen notwendig, diskriminiert zu erreichen Anlage reagiert, kann variieren, aber, wie ein Führer, planen etwa 20 Sitzungen. </li></ol> 6. Extinction <ol><li> Statten Sie jeden Anlage Chamber mit visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen, um einen Kontext, der sich von der einen die Ratten während der PDT-Sitzungen erlebt zu schaffen. Wenn zum Beispiel 1 wurde im Kontext PDT verwendet, konfigurieren die Kammer Kontext 2 zum Löschen Sitzungen. Erhalten Sie über die während der Extinktion als Kontext B verwendet </li><li> Führen Aussterben Sitzungen identisch PDT-Sitzungen, aber keine Ethanol während der CS + zu liefern. <ol><li> Verwenden Sie die gleiche Computerprogramm, das während der PDT verwendet wurde, um den CS + und CS zu präsentieren. </li><li> Um die Konsistenz über den Phasen des Experiments zu erhalten, legen Sie eine leere Spritze in die Spritzenpumpe, und lassen Sie die Pumpe eingeschaltet. Stellen Sie sicher, dass die Polyethylen-Schlauch nicht Ethanol enthalten vor Aussterben Sitzungen. </li></ol></li><li> Weiter Aussterben Sitzungen täglich bis Ratten nicht mehr diskriminiert Show reagiert zwischen dem CS + und CS. HINWEIS: Port-Eintrag in Reaktion auf den CS + gemacht schrittweise über Extinktion Sitzungen sinken, bis es keine differenz zwischen Anschlusseinträge in Reaktion auf die CS + gemacht und Anschlusseinträge in Reaktion auf die CS hergestellt. Die genaue Zahl der vom Aussterben Sitzungen notwendig, Anlage reagiert, kann variieren löschen, aber als Führer, planen etwa 8 Sitzungen. </li><li> Reinigen Sie das Gerät am Ende jeder Sitzung, wie in Schritt 5.7 beschrieben. </li></ol> 7. Context-induzierte Renewal-Test <ol><li> Anlegen jeder Klimakammer mit den visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen, um den Kontext, die während der PDT-Sitzungen erlebt wurde erstellen. Zum Beispiel, wenn eine bestimmte Ratte erlebt Kontext 1 in der PDT-Sitzungen konfigurieren seiner Kammer als Kontext 1 in der Testsitzung. Erhalten Sie über die während der Erneuerung Test als Kontext verwendet A. </li><li> Führen Sie den Kontext-induzierte Erneuerung Test identisch mit PDT-Sitzungen, aber keine Ethanol während der Erneuerung Test liefern. Präsentieren die CS + und CS nach wie vor während der PDT-Sitzungen, aber zurückhalten, das Ethanol. <ol><li> Verwenden Sie den gleichen Computer prOgram, die während der PDT verwendet wurde, um den CS + und CS zu präsentieren. </li><li> Um die Konsistenz Phasen zu erhalten, laden Sie eine leere Spritze in die Spritzenpumpe, und lassen Sie die Pumpe eingeschaltet. Stellen Sie sicher, dass die Polyethylen-Schlauch nicht Ethanol enthalten, bevor der Testsitzung. </li></ol></li><li> Beachten Kontext-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht Verhalten. ANMERKUNG: Diese Erneuerung Effekt wird offensichtlich sein, durch eine selektive Erhöhung der Anzahl von Eingangsports in Abhängigkeit von der CS + gemacht, ohne Veränderung der Eingangsöffnung Verhalten in Reaktion auf die CS, bezogen auf CS + und CS hergestellt Reagieren auf die beobachtete Ende des Aussterbens Ausbildung. </li><li> Reinigen Sie das Gerät am Ende der Sitzung, wie in Schritt 5.7 beschrieben. </li></ol>

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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pavlovian+conditioning+of+heart+rate+and+body+temperature+with+morphine:+effects+of+CS+duration.">Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration.</a> Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).</li><li>Palm, S., Roman, E., Nylander, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+voluntary+ethanol+consumption+in+Wistar+rats+from+five+different+suppliers.">Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers.</a> Alcohol. 45, 607-614 (2011).</li><li>Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+rat+strain+differences+in+ethanol+consumption+reflect+differences+in+ethanol+sensitivity+or+the+preparedness+to+learn.">Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn.</a> Alcohol. 10, 37-43 (1993).</li><li>Goodwin, F. L., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+taste+thresholds+for+ethanol,+saccharin,+and+quinine+solutions+in+three+strains+of+rats+nonselected+for+ethanol:+a+comparative+study.">Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).</li><li>Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+the+consumption+of+ethanol+and+flavored+solutions+in+three+strains+of+rats.">Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).</li><li>Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+in+ethanol+preference+and+reinforced+behaviour:+a+comparison+of+two-bottle+choice+and+operant+self-administration+paradigms.">Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms.</a> Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).</li><li>Yap, C. S., Richardson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extinction+in+the+developing+rat:+an+examination+of+renewal+effects.">Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects.</a> Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).</li><li>Carew, M. B., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+functions+of+context+during+conditioning:+a+developmental+analysis.">Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis.</a> Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).</li><li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+seeking+triggered+by+environmental+context+is+attenuated+by+blocking+dopamine+D1+receptors+in+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+rats.">Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).</li></ol>

Alle experimentellen Verfahren wurden von der Concordia University Animal Research Ethics Committee genehmigt und sind in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Canadian Council on Animal Care. Die Open-Access-Veröffentlichung dieses Artikels möglich durch das Sponsoring von Med Associates Inc. wurde

Results from this procedure reveal that discrete environmental stimuli that routinely accompany alcohol delivery can acquire the capacity to drive alcohol-seeking behavior. They also demonstrate that contextual stimuli associated with the prior availability or absence of alcohol can guide conditioned behavioral responses to discrete alcohol-predictive cues.
Critical steps within the protocol
Contexts in the present task incorporate stimuli that are external to the rat. However, the interoceptive state of the rat at test can also constitute a &#8216;context&#8217; that could affect renewal20. It is therefore important to habituate rats to any procedures that may occur before the renewal test and change their interoceptive state, like intracranial microinfusions or systemic injections. Moreover, habituation to microinfusions or systemic injections should be conducted prior to both extinction and PDT sessions, to prevent such procedures from becoming associated with one specific phase of the experiment.
Temporal parameters, such as CS duration, CS-US interval, and intertrial interval (ITI), have long been known to influence conditioned responding in a variety of conditioning paradigms21-26. Similarly, temporal parameters may influence the observation of the renewal effect in our procedure. Any set of parameters other than those specified in the protocol should be experimentally validated in pilot studies before proceeding to employ them in larger investigations.
Modifications and troubleshooting
Previous research has found that the amount of ethanol that rats consume in the home cage can vary as a function of the supplier from which rats are purchased17,27. Supplier is therefore an important consideration for this phase of the study. Similarly, the choice of rat strain should be considered carefully, as there are numerous reports of strain differences in ethanol consumption28-31.
Prior work in an aversive conditioning paradigm has shown that the developmental age of rats influences the observation of renewal of a Pavlovian conditioned fear response32. The lack of a renewal effect in very young rats (younger than postnatal day 20) has been suggested to be due to impaired encoding of contextual information33. The developmental age of rats to be used in the present procedure should therefore be taken into consideration.
Renewal of Pavlovian conditioned alcohol-seeking behavior has been observed when 10%9,16, 15%14, or 20%15 ethanol solutions were used during the home cage ethanol access and PDT phases of the experiment. Researchers could use any of these concentrations of ethanol for the purposes of establishing this procedure in their laboratories.
During the acquisition of Pavlovian discrimination training it is important to check fluid ports after each session to ensure that all the ethanol that was delivered has been consumed. Leaving rats in the conditioning chambers for an additional 10 - 15 min after each session may be done early in PDT to encourage consumption of any ethanol that was not consumed during the session. The number of rats leaving unconsumed ethanol in the ports should decrease as PDT progresses. If by the end of PDT rats are either (a) not consuming all the ethanol and/or (b) not responding to the CS+ then these subjects should be dropped from the study. Most rats reliably respond more to the CS+ than the CS-. However, some rats may respond at high levels to both cues, thereby not showing evidence of discrimination. Rats that show high responding to both the CS+ and CS- during PDT are not dropped from the study. In our experience, these subjects show remarkable discrimination during the first extinction session in the absence of ethanol, suggesting that their high levels of responding to the CS- during PDT are driven by the presence of ethanol in the fluid port. These subjects also tend to show robust renewal effects.
Limitations of the procedure
Because the renewal test is conducted in the absence of ethanol, conditioned port entries elicited by the CS+ gradually diminish across the test session. Therefore, the overall amount of behavior generated at test, against which experimentally induced changes can be assessed, is fairly low. Because in this task responding tends to be higher at the start versus the end of the test session, it is important to examine the effects of experimental manipulations on conditioned responding on a trial-by-trial basis.
Entries into the fluid receptacle provide the main dependent measure in this task. However, an erroneous port entry might be registered if an animal is close enough to the fluid receptacle to break the infrared beam across the opening of the fluid port with its whiskers. While infrequent, erroneous responses are obvious as a dramatic increase in total port entries relative to the subject&#8217;s behavior on prior sessions. Videotaping the animals would facilitate the detection of possible erroneous responses, and allow for a more refined analysis of the behaviors exhibited by the rats throughout training and testing.
Significance of technique with respect to existing/alternative methods
Context-induced renewal of drug-seeking behavior is largely studied using an instrumental conditioning task in which the primary dependent variable is an operant response, such as a lever press8,34 or nose poke12. In the present procedure, the drug-seeking response is &#8216;conditioned approach&#8217; to the fluid port that is elicited by presentations of the CS+. This response is likely acquired through Pavlovian learning, which is the learning process that mediates the formation of associations between environmental stimuli and the pharmacological effects of drugs of abuse in humans.
Future applications
This task can be used in combination with neuropharmacology, optogenetics and neurochemistry to study the neural mechanisms that are involved in context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking behavior16. In addition, behavioral and neural mechanisms that regulate the acquisition and extinction of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking behavior can be investigated. Lastly, this task can be used to explore manipulations of extinction that might prevent renewal, an important direction for translational research aimed at reducing the impact of drug associated environmental contexts on reactivity to drug predictive cues after cue exposure therapy in human addicts.

Rest nüchtern ist eine große Herausforderung durch Personen, die unter Alkoholmissbrauch Erkrankungen konfrontiert. Abstinenz ist eine Zeit der Anfälligkeit für den Verhaltens, psychologischen und physiologischen Auswirkungen von Umweltreizen, die routinemäßig Alkoholkonsum zu begleiten, die können, durch Pawlowschen Konditionierung, sich mit Rausch 1,2 verbunden. Exposition gegenüber Alkohol prädiktiven Cues bedingter Reaktionen wie Alkohol Begierde, die Alkohol-Rückfall der Suche nach Verhaltensweisen, die 3,4 erleichtern fördern kann zu entlocken. Die stereotype Verhaltenssequenzen, die den Alkoholkonsum führen kann bestimmte Arten von Stimuli, routinemäßig unmittelbar vor den pharmakologischen Wirkungen von Alkoholkonsum erlebt werden. Zum Beispiel der Anblick, den Geruch und Geschmack von Alkohol sind die sensorischen Eigenschaften von Alkohol, die zuverlässig voraus Rausch. Zusätzlich zu solchen Signale, die als &quot;diskrete&quot; oder &quot;proxima bezeichnet werdenl &#39;Cues, Umwelt Kontexte, in denen Medikamente werden regelmäßig verwendet wird, kann auch provozieren Verlangen 5,6. Exposition gegenüber physikalischen Standorten, an denen Medikamente haben bisher verwendet wurden, kann daher eine kritische Auslöser für den Rückfall 7 sein. Tiermodelle wurden entwickelt, um die neuronalen Mechanismen, die die Auswirkungen der Droge verbunden Kontexte auf Drogen-sucht Verhalten 8-13 vermitteln studieren. Das hierin beschriebene Verfahren erlaubt die Untersuchung, wie Kontexte mit Alkoholkonsum kann Alkohol-sucht Verhalten, das durch eine diskrete, Alkohol prädiktiven Pavlovian Cue ausgelöst wird modulieren. Pawlow Diskriminierung Ausbildung in einem spezifischen ökologischen Kontext, wo Ratten sind verhaltens zwischen zwei Gehöranlage Reize, eine CS +, die mit Alkohol kombiniert wird, und ein CS, die nicht zu unterscheiden geschult durchgeführt. Extinktion Einheiten werden dann in einem anderen Zusammenhang, in dem die Reaktion auf den CS durchgeführt+ Abnimmt, wenn ein Ergebnis der Alkohol zurückgehalten. Anschließend Reexposition zum Alkohol assoziiert, Pavlovian Ausbildung Kontext löst eine selektive Zunahme des Alkoholsuchverhalten der CS + hervorgerufen, ohne Änderung in Reaktion auf die CS. Dieses Ergebnis, das haben wir konsequent repliziert 9,14-16 erstreckt sich Erkenntnisse aus der instrumentellen Konditionierungsverfahren, in dem Drogen Kontexten gefunden worden, um die Erneuerung der operanten Reaktionen mit Drug-Delivery 10,13 assoziiert zu stimulieren.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="2121">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:357px;">Company</td>
			<td style="width:192px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:969px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Heavy-duty utility cart</td>
			<td style="width:357px;">Rubbermaid</td>
			<td style="width:192px;">#4520-88</td>
			<td>Used to transport rats in their home cage from the colony room to the behavior room or other facilities</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Rats, Long-Evans</td>
			<td style="width:357px;">Harlan</td>
			<td style="width:192px;">-</td>
			<td>Rats weighed 220-240g on arrival</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Ohaus scale</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#S402421</td>
			<td>For weighing rats; tare the bottom of a plastic container first, then put the rat in it to weigh it</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Beta-chips, aspen</td>
			<td style="width:357px;">Harlan</td>
			<td style="width:192px;">#7090A</td>
			<td>Bedding for home cage</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Nylabone</td>
			<td style="width:357px;">Bio-Serv</td>
			<td style="width:192px;">#K3580</td>
			<td>Enrichment provided in the home cage</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Autoclavable rodent chow</td>
			<td style="width:357px;">Agribrands, Charles River</td>
			<td style="width:192px;">#5075</td>
			<td>For feeding rats</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Wire bar cage lid</td>
			<td style="width:357px;">Ancare</td>
			<td style="width:192px;">#R20SS2B</td>
			<td>Custom made with two slots for&#160; bottles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Cage bottom</td>
			<td style="width:357px;">Ancare</td>
			<td style="width:192px;">#R20PC</td>
			<td>To house rats</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Stoppers</td>
			<td style="width:357px;">Ancare</td>
			<td style="width:192px;">#8.5</td>
			<td>Rubber stoppers to occlude opening in water bottles &#38; graduated cylinders; goes with ball point sipper tubes&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Ball point tubes, 1.5&#34; length</td>
			<td style="width:357px;">Ancare</td>
			<td style="width:192px;">#TD-99</td>
			<td>Inserted in stoppers, enables rats to drink from water bottles and graduated cylinders</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Water bottles</td>
			<td style="width:357px;">Ancare</td>
			<td style="width:192px;">#FSPC8HT</td>
			<td>473 ml (16 oz) capacity, needs to be occluded with stopper</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Graduated cylinders, 100ml</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#0300741</td>
			<td>To contain ethanol during alcohol exposure in the home cage; spouted end needs to be cut off to enable occlusion with stoppers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Mettler scale</td>
			<td style="width:357px;">Mettler Toledo</td>
			<td style="width:192px;">#MS6001S</td>
			<td>For weighing water bottles and ethanol cylinders</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Polyethylene tubing, 1/32&#34; inner diameter,&#160; 1/32&#34; wall thickness, 3/32&#34; outside diameter</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#14-169-1A</td>
			<td>To connect 20 ml ethanol syringe to fluid port</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Needle, 18g, 1.5&#34; length</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#B305199</td>
			<td>To connect polyethylene tubing to ethanol syringes; needs to be filed</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Syringes, 20ml, Luer-Lok non-sterile</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#1482316J</td>
			<td>To contain ethanol on the fluid pumps; needs to be connected to the polyethylene tubing by a 18g 1 1/2 needle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Syringes, 60ml, Luer-Lok non-sterile</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#14-820-11</td>
			<td>To flush polyethylene tubing after PDT sessions</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Single speed syringe pump, 3.33 rpm</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-018MD</td>
			<td>To hold 20 ml ethanol syringes and deliver ethanol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Fluid port</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-254-CB</td>
			<td>To enable ethanol delivery during PDT sessions; connected to ethanol syringes with polyethylene tubing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Port entry infrared detector</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-215M</td>
			<td>Fixed on both sides of&#160; fluid port; need 2 per fluid port</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Houselight, 28V, 100mA</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-135M</td>
			<td>Provides general lighting in conditioning chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Clicker module</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-225SM</td>
			<td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">White noise generator with speaker</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#PHM-100</td>
			<td>Auditory stimulus for conditioning chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Bar floor</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-009A-GF</td>
			<td style="width:969px;">To go with modular test chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Bench coat, absorbant</td>
			<td style="width:357px;">VWR</td>
			<td style="width:192px;">#89126-790</td>
			<td style="width:969px;">Absorbant paper to put in metal tray, needs to be cut to fit the metal tray</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Polycarbonate sheet, 1/8&#34; thick, 12-5/8&#34;x10&#34;</td>
			<td style="width:357px;">Johnston Plastics</td>
			<td style="width:192px;">#30102515</td>
			<td style="width:969px;">To make smooth transparent floor insert used for context 1. Needs to be cut in 11.5&#34;x12.25&#34; pieces</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Aluminium sheet perforated, 0.063&#34;thick, 48&#34;x96&#34;, 0.250&#34; holes x 0.375&#34; centers</td>
			<td style="width:357px;">Anica Steel</td>
			<td style="width:192px;">-</td>
			<td style="width:969px;">To make perforated floor insert used for context 2. Needs to be cut in 11.5&#34;x12.25&#34; pieces</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:603px;">Black cardboard, 0.053&#34; thick, 28&#34;x44&#34;</td>
			<td style="width:357px;">Omer DeSerres</td>
			<td style="width:192px;">#P1909</td>
			<td style="width:969px;">To construct panels covering the ceiling, door and back wall of the conditioning chamber in context 1. Needs to be cut to size. Each chamber needs three panels measuring approximately 11.5&#34;x13.25&#34;. The panels can be joined by the narrower side using duct tape.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">All-purpose strength duct tape, 1.88&#34;x45yd.</td>
			<td style="width:357px;">Duck Tape</td>
			<td style="width:192px;">-</td>
			<td style="width:969px;">Adhesive material to connect the black cardboard panels used to cover the back wall, ceiling and door in context 1.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Modular test chamber</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-009A</td>
			<td>Conditioning chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Sound attenuating cubicles</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#ENV-200R3AM</td>
			<td>Comes with installed 28V DC fan (#ENV-025F)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Petri dish</td>
			<td style="width:357px;">Fisher</td>
			<td style="width:192px;">#08748B</td>
			<td>Bottom only, to contain the sprayed solution that provides the odor stimulus; needs to be centered in the metal tray in conditioning chambers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">PCI interface package</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#DIG-700P2-R2</td>
			<td>Connects tabletop interface cabinet to computer; includes 1 interface card, 1 Decode card, 1 ribbon cable and 1 28V DC power cable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Large tabletop cabinet and power supply</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#SG-6510D</td>
			<td>Used to contain the 12 cards included in the SmartCrtrl 8 Input, 16 Output package</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">SmartCtrl 8 Input, 16 Output package</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#DIG-716P2</td>
			<td>Used to connect and control the devices in the conditioning chamber. The package includes all the cables, the interface module and the connection panel.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Med PC IV software</td>
			<td style="width:357px;">Med Associates Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#SOF-735</td>
			<td>Software to run programs. Needs to be installed on the computer.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Monitor LG, 19&#34; LCD</td>
			<td style="width:357px;">Concordia computer store</td>
			<td style="width:192px;">#W1942TQ-BF</td>
			<td>Computer monitor; to go with computer running Med PC IV</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">HP Z200 tower workstation</td>
			<td style="width:357px;">Concordia computer store</td>
			<td style="width:192px;">#BZ788US#ABA</td>
			<td>Computer on which Med PC IV is run</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:603px;">Benzaldehyde, &#8805;99%</td>
			<td style="width:357px;">Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc.</td>
			<td style="width:192px;">#B37-50</td>
			<td>Dilute in tap water for almond context odor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Lemon oil, cold pressed, California</td>
			<td style="width:357px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:192px;">#W262528-1KG-K</td>
			<td>Dilute in tap water for lemon context odor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:603px;">Ethyl alcohol, 95%</td>
			<td style="width:357px;">Commercial Alcohols</td>
			<td style="width:192px;">-</td>
			<td>Dilute in tap water to desired concentration</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a procedure to observe context-induced renewal of pavlovian-conditioned alcohol-seeking behavior in rats

Umwelt Kontexte, in denen Drogen konsumiert werden kann Verlangen, eine subjektive Pawlowschen-konditionierte Reaktion, die Drogen-sucht Verhalten und prompte Rückfall in abstinent Drogenkonsumenten erleichtern auslösen können. Wir haben ein Verfahren, um die Verhaltens-und neuronale Prozesse, die die Auswirkungen der Kontext auf Alkohol-seeking Verhalten bei Ratten zu vermitteln studieren entwickelt. Nach Akklimatisierung an den Geschmack und die pharmakologischen Wirkungen von 15% Ethanol im Käfig, erhalten männlichen Long-Evans-Ratten Pawlow Diskriminierung Ausbildung (PDT) in Klimakammern. In jeder täglich (Mo-Fr) PDT-Sitzung, die jeweils von zwei verschiedenen 10 sec Gehöranlage Reize 16 Studien auftreten. Während eines Stimulus, der CS + 0,2 ml 15% Ethanol wird in einen Fluidanschluss für den oralen Verzehr geliefert. Der zweite Reiz, der CS, wird nicht mit Ethanol gepaart. Über die Sitzungen, Einträge in die Fluidöffnung während der CS + Zunahme, während Einträge in der CS-Stabilisierung auf einem niedrigeren Niveau, das anzeigt, dass ein Predictive Assoziation zwischen der CS + und Ethanol gewonnen. Während PDT jede Kammer mit einer bestimmten Konfiguration von visuellen, taktilen und olfaktorischen Stimuli kontextuellen ausgestattet. Nach PDT ist vom Aussterben Ausbildung in der gleichen Kammer, die jetzt mit einer anderen Konfiguration von Kontextreizen ausgestattet ist durchgeführt. Die CS + und CS sind nach wie vor präsentiert, aber Ethanol wird zurückgehalten, die einen allmählichen Rückgang in Port-Einträge während der CS + verursacht. Bei Test werden Ratten wieder in den Kontext gestellt und PDT mit dem CS + und CS nach wie vor präsentiert, aber ohne Ethanol. Diese Manipulation löst eine stabile und selektive Erhöhung der Anzahl von Eingangsports während des Alkohols prädiktiven CS +, ohne Änderung in der CS antwortet. Dieser Effekt, der als Kontext-induzierte Erneuerung genannt, veranschaulicht die leistungsstarke Kapazität von Zusammenhängen mit dem Alkoholkonsum assoziiert zu Alkohol-sucht Verhalten in Reaktion auf Alkohol Pawlow Hinweise zu stimulieren.

Intermittierende Ethanol Zugang im Käfig: Ethanol Verbrauch (g / kg) und Ethanol bevorzugt Anstieg über Sitzungen der intermittierenden Ethanol Zugang im Käfig, in der Regel erreicht ein stabiles Niveau in 8 - 12 Sitzungen (Abbildung 1). In der in 1 gezeigten Datensatz gemittelt stabile Ethanolkonsum in den letzten beiden Sitzungen Käfig Ethanol Zugang reichten von 1,33 bis 6,44 g / kg für einzelne Ratten. Der Käfig Ethanolkonsum Phase des Experiments kann gestoppt werden, sobald die g / kg Verbrauch ein Plateau erreicht hat, und Ratten sind in diesem stabilen Niveau von Trinkwasser für eine Anzahl von Sessions gehalten. Um Daten aus dieser Phase zu analysieren, führen getrennte wiederholter Maßnahmen Varianzanalyse (ANOVA) über die intraindividuelle Faktor Sitzung für Ethanolkonsum (g / kg) und Ethanol Präferenz. Schematische Darstellung der Kontext-induzierte Verlängerungsverfahren: Jede Phase desVersuchsdurchführung (PDT, Aussterben, Erneuerung Test) ist in Abbildung 2 veranschaulicht. Siehe die Bildunterschrift für weitere Details. Reaktionsmaßnahmen und Datenanalyse: In allen nachfolgend beschriebenen Verhaltensphasen, sind Port-Eintrag Antworten während der CS + und CS gemacht normiert mit Bezug auf Eintrag Antworten Baseline-Port-CS vor. Um die normierten CS Maßnahmen erstellen, ziehen Sie die Anzahl der Anschlusseinträge während der Pre-Baseline-Intervall CS gemacht (die 10 Sekunden unmittelbar vor der CS Beginn) aus der Anzahl der Port-Einträge während der Präsentationen des CS + und CS gemacht. Die normalisierte CS + und CS-normierten Maßnahmen dienen als Indikatoren für Verhalten hervorgerufen insbesondere durch CS-Präsentationen, über den Ausgangswerten erhöht. Führen getrennte wiederholte Messungen ANOVA mit wiederholten intraindividuelle Faktoren der Sitzung und CS-Typ (CS + vs CS) für die PDT und Aussterben Phasen. Für Vergleiche zwischen Phase (PDT, Aussterben, erneuernal-Test), gemittelt Verwendung von Daten über den letzten beiden Sitzungen der PDT und Extinktion und einer Sitzung der Erneuerung Testdaten in wiederholten ANOVA Messungen. Im Nachgang zu signifikanten Haupteffekten und Wechselwirkungen, die Verwendung post hoc t-Tests für unabhängige oder gepaarte Stichproben, die für multiple Vergleiche korrigiert. Kriterium für die Bedeutung ist bei α = 0,05 festgelegt. PDT: Port Eintrag Antworten auf die CS + Anstieg über PDT-Sitzungen, während Port-Eintrag Antworten auf die CS nach wie vor niedrig und stabil, insgesamt. Beachten Sie, dass Port-Eintrag Antworten auf die CS in den ersten Sitzungen der PDT Training leicht erhöhen; Jedoch Anschlusseinträge in Reaktion auf die CS hergestellt Stabilisierung bei einem viel niedrigeren Niveau als die in Reaktion auf die CS + hergestellt. Erfolgreicher Diskriminierung wird durch eine statistisch signifikante Erhöhung in der Anschlusseinträge bei der CS + belegt verglichen mit dem CS (Abbildung 3). Dieses Ergebnis zeigt, dass Pawlowanlage Alkoholsucht Verhalten haten auf den CS +, nicht jedoch für die CS. Extinction: Port Eintrag Antworten auf die CS + allmählich über Aussterben Sitzungen sinken. Port-Eintrag Antworten auf die CS bleiben niedrig und stabil über Aussterben Sitzungen. Idealerweise unterschieden Reaktion wird durch das Ende der Löschung Ausbildung beseitigt, wie durch das Fehlen einer statistisch signifikanten Unterschied zwischen den Eingangsports zu den CS + und CS belegt. Es ist jedoch nicht ungewöhnlich gewissen diskriminiert reagiert bleiben, auch am Ende der Extinktion Ausbildung. In diesem Fall ist es wichtig, am Ende des Aussterbens Ausbildung sind statistisch niedriger als Port-Eintrag Antworten auf die CS + zu Beginn des Aussterbens, als auch am Ende der PDT zu überprüfen, dass die Port-Eintrag Antworten auf die CS + (Abbildung 3) . Dieses Muster der Ergebnisse zeigt, dass Pawlowanlage Alkoholsucht Verhalten wurde deutlich ausgelöscht. Kontext-induzierte Erneuerung Test: PortEintrag Antworten auf die CS + Zunahme Rahmen induzierte Verlängerung Test, bezogen auf CS + am Ende der Ausbildung Extinktion beobachtet Anschlusseinträge. Dieser Anstieg ist auf die selektive CS + als Hafen Einträge in die CS unverändert bleiben. Zusätzlich sind Anschlusseinträge zum CS + statistisch erhöhte im Vergleich zu Portangaben zu der CS im Rahmen induzierte Verlängerung Test (Abbildung 4). Statistische Vergleiche der Bestätigung der CS + Porteinträge zwischen Aussterben und Test, sowie Vergleiche von CS + und CS-Anschluss Einträge innerhalb Test, ein Indikator für eine Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkohol-sucht Verhalten durch den Alkohol zugeordneten Kontext bei Test induziert. <img alt="Figur 1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig1highres.jpg" width="400" /> Abbildung 1. Eskalation der Ethanolkonsum und Vorzugs durch intermittierende Ethanol-Zugang in den Heimkäfig induziert. Bedeuten und# 177; SEM (A) Ethanol Verbrauch (g / kg) und (B) Ethanol bevorzugt über 12 Sitzungen der intermittierenden Ethanol Zugang im Käfig. Beide Maßnahmen in der Regel über mehrere Sitzungen zu erhöhen und dann zu stabilisieren. Stabilen Ethanolkonsum gemittelt über die letzten beiden Sitzungen des Heimkäfig Ethanol Zugang reichten von 1,33 bis 6,44 g / kg für einzelne Ratten. Diese Daten wurden unter Verwendung von männlichen Long-Evans-Ratten Trink 15% (v / v) Ethanol. <img alt="Figur 2" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" width="400" /> . Abbildung 2. Ein Schema des Versuchsverfahren Das Verfahren besteht aus drei Phasen: Pawlow Diskriminierung Ausbildung (PDT), Aussterben, und Kontext-induzierte Erneuerung Test. Während jeder Sitzung PDT erhalten Ratten 16 Studien, die ein Gehör bedingten Reiz (CS +), die die Lieferung von Ethanol und 16 Studien von Signaleneine zweite auditorischen Reizes (CS), die nicht mit Ethanol Lieferung verbunden ist. PDT-Sitzungen finden in Kontext A, der eine bestimmte Konfiguration von visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen zusammen. Während Extinktion Sitzungen, die im Kontext B durchgeführt werden, von einem anderen Satz von visuellen, Geruchs und taktilen Reizen besteht, die CS + und CS dargestellt, aber Ethanol zurückgehalten. Für den Kontext-induzierte Erneuerung Test werden Ratten Kontext Ein zurückgegeben und die CS + und CS sind ohne Ethanol vorgestellt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Figur 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig3highres.jpg" width="400" /> Abbildung 3. Erwerb und Erlöschen der Pawlowschen diskriminiert Anlage reagiert für Ethanol. Mittelwert ± SEM normiert Porteinträge made während der CS + und CS für PDT (Sitzungen 1-18) im Kontext A und Extinktion (Sessions 19-26) in Zusammenhang B. Diese Daten wurden erhalten unter Verwendung von männlichen Long-Evans-Ratten mit 10% ausgebildet (v / v) Ethanol als unbedingter Reiz (US), die in Verbindung mit der CS + während der PDT präsentiert wurde. * P &lt;0,05, im Vergleich zu CS + CS. Abbildung ursprünglich in Chaudhri, Sahuque &amp; Janak (2008) veröffentlicht. Verwendung mit Genehmigung von Elsevier. <img alt="Figur 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig4highres.jpg" width="500" /> Abbildung 4. Kontext-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage reagiert für Ethanol. Mittelwert ± SEM normiert Porteinträge während der CS + und CS in der PDT-Sitzungen im Kontext A, Aussterben Sitzungen im Kontext B und Erneuerung Test in Context A. Daten sind gemittelt über die letzten beiden Sitzungen für die PDT und Aussterben; die Erneuerung Test ist eine einzige Sitzung. DieseDaten wurden unter Verwendung von männlichen Long-Evans-Ratten mit 10% (v / v) Ethanol als unbedingter Reiz (US), die in Verbindung mit der CS + bei PDT dargestellt ausgebildet wurde, erhalten. * P &lt;0,05; ** P &lt;0,001, im Vergleich zu CS + CS. #p &lt;0,05, CS + PDT gegenüber CS + Aussterben bedroht. ^ P &lt;0,05, CS + Aussterben gegen CS + Test. Abbildung ursprünglich in Chaudhri, Sahuque &amp; Janak (2008) veröffentlicht. Verwendung mit Genehmigung von Elsevier.

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A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Ein Verfahren, um die Kapazität von einem Alkohol verbundenen Umweltkontextstudie zur Auslösung der Erneuerung der Alkoholsucht bei der Ratte beschrieben.

Eine Vorgehensweise, um Context-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht bei Ratten Verhalten beobachten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

a-procedure-to-observe-context-induced-renewal-pavlovian-conditioned

Research

JoVE Journal

Behavior

12.7K Aufrufe.  Concordia University.  Ein Verfahren, um die Kapazität von einem Alkohol verbundenen Umweltkontextstudie zur Auslösung der Erneuerung der Alkoholsucht bei der Ratte beschrieben. 

Serie: A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during abstinence. Moreover, various environmental challenges can exacerbate this effect, as well as increase ongoing drug intake.
The procedure we describe here highlights the impact of a common environmental challenge, food restriction, on drug craving that is expressed as an augmentation of drug seeking in abstinent rats.
Rats are implanted with chronic intravenous i.v. catheters, and then trained to press a lever for i.v. heroin over a period of 10-12 days. Following the heroin self-administration phase the rats are removed from the operant conditioning chambers and housed in the animal care facility for a period of at least 14 days. While one group is maintained under unrestricted access to food (sated group), a second group (FDR group) is exposed to a mild food restriction regimen that results in their body weights maintained at 90% of their nonrestricted body weight. On day 14 of food restriction the rats are transferred back to the drug-training environment, and a drug-seeking test is run under extinction conditions (i.e.&#160;lever presses do not result in heroin delivery).
The procedure presented here results in a highly robust augmentation of heroin seeking on test day in the food restricted rats. In addition, compared to the acute food deprivation manipulations we have used before, the current procedure is a more clinically relevant model for the impact of caloric restriction on drug seeking. Moreover, it might be closer to the human condition as the rats are not required to go through an extinction-training phase before the drug-seeking test, which is an integral component of the popular reinstatement procedure.

A procedure that allows a demonstration of robust augmentation of drug seeking in food-restricted rats is described. Following heroin self-administration training, rats go through an abstinence period, in a drug-free environment, during which they are mildly food restricted. Drug seeking is then tested in the drug-associated environment.

Eine Vorgehensweise, um die Wirkung von Längerer Essen Beschränkung Heroin suche in abstinent Ratten untersucht

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Forschung

Verhalten

A Novel Procedure for Evaluating the Reinforcing Properties of Tastants in Laboratory Rats: Operant Intraoral Self-administration

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste reactivity with the behavioral aspects of operant self-administration of drugs. Under very brief general anaesthesia, rats are implanted with an intraoral (IO) cannula that allows delivery of test solutions directly in the oral cavity. Animals are then tested in operant self-administration chambers whereby they can press a lever to receive IO infusions of test solutions. IO self-administration has several advantages over experimental procedures that involve drinking a solution from a spout&#160;or operant responding for solid pellets or solutions delivered in a receptacle. Here, we show that IO self-administration can be employed to study self-administration of high fructose corn syrup (HFCS). Rats were first tested for self-administration on a progressive ratio (PR) schedule, which assesses the maximum amount of operant behavior that will be emitted for different concentrations of HFCS (i.e.&#160;8%, 25%, and 50%). Following this test, rats self-administered these concentrations on a continuous schedule of reinforcement (i.e.&#160;one infusion for each lever press) for 10 consecutive days (1 session/day; each lasting 3 hr), and then they were retested on the PR schedule. On the continuous reinforcement schedule, rats took fewer infusions of higher concentrations, although the lowest concentration of HFCS (8%) maintained more variable self-administration. Furthermore, the PR tests revealed that 8% had lower reinforcing value than 25% and 50%. These results indicate that IO self-administration can be employed to study acquisition and maintenance of responding for sweet solutions. The sensitivity of the operant response to differences in concentration and schedule of reinforcement makes IO self-administration an ideal procedure to investigate the neurobiology of voluntary intake of sweets.

The current study evaluates a novel procedure for assessing the reinforcing effects of palatable solutions in laboratory rats: intraoral self-administration. To this end, operant responding (i.e.&#160;lever pressing) for intraoral infusions of sweet solutions at different concentrations was measured on continuous and progressive ratios schedules of reinforcement.

Ein neues Verfahren zur Bewertung der verstärkenden Eigenschaften von Geschmacksstoffe in Labor-Ratten: Operante Intraorale Selbstverwaltung

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to this multifactorial disorder is the consumption of a high fat diet, a behavior that has been shown to increase both caloric intake and body fat content. However, the elements regulating preference for high fat food over other foods remain understudied.
To overcome this deficit, a model to quickly and easily test changes in the preference for dietary fat was developed. The Fat Preference model presents rats with a series of choices between foods with differing fat content. Like humans, rats have a natural bias toward consuming high fat food, making the rat model ideal for translational studies. Changes in preference can be ascribed to the effect of either genetic differences or pharmacological interventions. This model allows for the exploration of determinates of fat preference and screening pharmacotherapeutic agents that influence acquisition of obesity.

Dietary fat content influences both energy intake and body fat composition in mammals. By examining rats&#8217; preference for high fat food in a series of choice experiments, it is possible to test genetic differences and pharmacological interventions on their preference for high fat food.

Fat Vorlieben: A Novel Modell des Essverhaltens bei Ratten

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

Der modifizierte Loch Board - Mess Verhalten, Kognition und Sozialinteraktion an Mäusen und Ratten

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the attribution of incentive salience, or the transformation of neutral stimuli into attractive, &#34;wanted&#39; stimuli capable of motivating behavior. Pavlovian conditioned approach (PCA) develops after the response-independent presentation of a conditioned stimulus (CS; e.g., a lever) that predicts the delivery of an unconditioned stimulus (US; e.g., a food pellet) and can be used to measure incentive salience. During training, three patterns of conditioned responses (CRs) can develop: sign-tracking behavior (CS-directed CR), goal-tracking behavior (US-directed CR), and an intermediate response (both CRs). Sign-trackers attribute incentive salience to reward-related cues and are more vulnerable to cue-induced reinstatement of drug-seeking as well as other addiction-related behaviors, making PCA a potentially valuable procedure for studying addiction vulnerability. Here, we describe materials and methods used to elicit PCA behavior from rats as well as analyze and interpret PCA behavior in individual experiments.

Here, we present a protocol to elicit Pavlovian conditioned approach behavior in rats. This procedure can be used to measure individual differences in the tendency to approach and attribute incentive salience to reward-related cues and investigate addiction vulnerability.

Pavlovian Trainings konditionierten Ansatz bei Ratten

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

Das Nagetier Psychomotorik Vigilance Test (rPVT): Eine Methode zur Beurteilung der Neuropsychologische Leistung bei Ratten und Mäusen

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, few studies have investigated the long-term effects of injury in rodent models of TBI. Shown here are behavioral measures that are well-established in TBI research for times early after injury, such as two weeks, until two months. Some of these methods have previously been used at later times after injury, up to one year, but by very few laboratories. The methods demonstrated here are a short neurological assessment to test reflexes, a Beam-Balance to test balance, a Beam-Walk to test balance and motor coordination, and a working memory version of the Morris water maze that can be sensitive to deficits in reference memory. Male rats were handled and pre-trained to neurological, balance, and motor coordination tests prior to receiving parasagittal fluid percussion injury (FPI) or sham injury. Rats can be tested on the short neurological assessment (neuroscore), the beam-balance, and the Beam-Walk multiple times, while testing on the water maze can only be done once. This difference is because rats can remember the task, thus confounding the results if repeated testing is attempted in the same animal. When testing from one to three days after injury, significant differences are detected in all three non-cognitive tasks. However, differences in the Beam-Walk task were not detectable at later time points (after 3 months). Deficits were detected at 3 months in the Beam-Balance and at 6 months in the neuroscore. Deficits in working memory were detected out to 12 months after injury, and a deficit in a reference memory first appeared at 12 months. Thus, standard behavioral tests can be useful measures of persistent behavioral deficits after FPI.

The goal of the behavioral tests presented here is to detect functional deficits in rats after traumatic brain injury. Four specific tests are presented that detect deficits in behaviors to reflect the damage to specific brain areas at times extending to one year after injury.

Erkennung von Verhaltensstörungen Defizite bei Ratten nach Schädel-Hirn-Verletzung

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is no existing format for studying the mechanism of action, prevention, containment, and treatment of contagious depression. The purpose of this study, therefore, was to establish the first animal model of contagious depression.
Healthy rats can contract depressive behaviors if exposed to depressed rats. Depression is induced in rats by subjecting them to several manipulations of chronic unpredictable stress (CUS) over 5 weeks, as described in the protocol. A successful sucrose preference test confirmed the development of depression in the rats. The CUS-exposed rats were then caged with na&#239;ve rats from the contagion group (1 na&#239;ve rat/2 depressed rats in a cage) for an additional 5 weeks. 30 social groups were created from the combination of CUS-exposed rats and na&#239;ve rats.
This proposed depression-contagion protocol in animals consists mainly of cohabiting CUS-exposed and healthy rats for 5 weeks. To ensure that this method works, a series of tests are carried out - first, the sucrose preference test upon inducing depression to rats, then, the sucrose preference test, alongside the open field and forced-swim tests at the end of the cohabitation period. Throughout the experiment, rats are given tags and are always returned to their cages after each test.
A few limitations to this method are the weak differences recorded between the experimental and control groups in the sucrose preference test and the irreversible traumatic outcome of the forced swim test. These may be worth considering for suitability before any future application of the protocol. Nonetheless, following the experiment, na&#239;ve rats developed contagion depression after 5 weeks of sharing the same cage with the CUS-exposed rats.

This protocol describes a new model by which healthy rats could contract depression over a given time periodthrough contagion by exposure to chronic unpredictable stressed (CUS) rats.

Eine neue Methode zur Induktion einer Depression-ähnliches Verhaltens bei Ratten

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, numerous behavioral tasks have been created, many of which utilize an option to decline memory tests. To assess metamemory in rats, we utilized this decline-test option paradigm by adapting previous visual delayed-match-to-sample tests (DMTS)1,2 developed for primate species to an odor-based test suitable for rodents. First,&#160;rats are given a sample to remember by digging in a cup of scented sand. After a delay, the rat is presented with four distinctly scented cups, one of which contains the identical scent experienced during the sample; if this matching cup is selected, then the rat obtains a preferred, larger reward. Selection of any of the other three non-matching sand-filled scented cups results in no reward. Retention intervals are individually titrated such that subjects perform between 40 and 70% correct, therefore ensuring rats sometimes remember and sometimes forget the sample. Here, the operational definition of metamemory is the ability to distinguish between the presence and absence of memory through behavioral responding. Towards this end, on two-thirds of trials, a decline option is presented in addition to the four choice cups (choice trials). If the decline-test option- an unscented colored sand cup, is selected, the subject receives a smaller less-preferred reward and avoids the memory test. On the remaining third of trials, the decline-test option is not available (forced trials), causing subjects to guess the correct cup when the sample is forgotten. On choice tests, subjects that know when they remember should select the decline option when memory is weak rather than take the test and choose incorrectly. Therefore, significantly higher performance on chosen tests as compared to forced memory tests is indicative of the adaptive use of the decline-test response and metacognitive responding.

This protocol describes a method for investigating the possibility of metamemory, or memory awareness, in rodents. The odor-based delayed-matching-to-sample paradigm is a novel, ecologically-relevant behavioral test useful for determining the extent to which rodents can adaptively respond based on cognitively monitoring the strength of their memory states.

Für die metakognitiven Reaktion mit einem Geruch-basierte Tests verzögert Match Beispieltest bei Ratten

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...

A Conflict Model of Reward-seeking Behavior in Male Rats

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual stimulus) that represents a high-value reward, and the aversive stimuli (pins), are concurrently presented. The male rats have to climb or jump over the obstacle full of pins to approach and investigate the sexual partner. If the animal persists in their approaching behavior regardless of the aversive stimuli, it is considered as a maladaptive or risky reward-seeking behavior. The conflict task permits the evaluation of deficit in inhibitory control resulting from exposure to abused drug, such as morphine, or a stressful event. 
The main advantage of this model is that it provides a simple and quick way to discover the deficit in inhibitory control after exposure to opiate drugs or other stressful events. In addition to opiates, this behavioral model would also be useful for quickly discovering the inhibitory control deficits induced by other addictive drugs. However, the limitation is that the male rats' performance may be subject to exercising effects with repeated testing under this conflict task. In the future, one can hope that the individuals with the compulsive phenotype of reward-seeking behavior after exposure to opiates will be identified based on modifying this conflict model.

This conflict model is used to measure the impairment of inhibitory control after exposure to addictive drugs, or other factors that may influence inhibitory control. A sexual stimulus and an aversive obstacle are concurrently presented, thus male rats have to conquer the obstacle to approach the sexual reward.