Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im Bereich der Verhaltensneurowissenschaften zu beantworten, ob eine genetische Mutation oder Umweltvariable das soziale Verhalten oder die Erfassung und Aufbewahrung von räumlichen Erinnerungen beeinflussen kann. Die Hauptvorteile dieser Techniken sind, dass beide Studien einfach mit minimalen finanziellen Investitionen erstellt werden können und dass keines der Beiden Protokolle verlangt, dass die Tiere extreme oder stressige Reize erfahren. Die Damsel in Distress-Methode kann Einblicke in das prosoziale Verhalten von Mäusen geben, kann aber auch als Empathie-Maßnahme in anderen Säugetiermodellorganismen verwendet werden.
Bevor Sie mit dem Barnes Maze Testing Procedure beginnen, reinigen Sie alle Labyrinthkomponenten mit Wasser und 70% Ethanol. Wenn die Komponenten trocken sind, montieren Sie das Labyrinth und weisen Sie jede Maus nach dem Zufallsprinzip einer Zielbohrung zu, die während des gesamten Testzeitraums verwendet werden soll. Die Löcher können ein bis 20 auf der Unterseite des Labyrinths oder auf der Außenseite des Labyrinthumfangs beschriftet werden, wo sie nicht aus dem Labyrinth heraus sichtbar sind.
Um einen Trainingstest zu starten, ersetzen Sie die zugewiesene Lochscheibe durch eine 23 mal 11 Zentimeter große Blackbox und befestigen Sie die Box mit Gummibändern und Haken fest am Labyrinth. Legen Sie dann eine Maus auf die Mitte des Barnes Maze unter einer Tasse und lassen Sie die Maus für 30 Sekunden zu akklimatisieren. Beginnen Sie am Ende der Akklimatisierungsphase mit der Videoaufzeichnung und schalten Sie den Licht- und Ultraschall-Rauschbildner ein.
Heben Sie die Tasse über einen String-Mechanismus, um zu vermeiden, dass die Anfangsüberschrift des Tieres verzerrt wird, und starten Sie einen Timer hinter einem Beobachtungsvorhang. Verfolgen Sie die Bewegungen des Tieres auf einem Blatt Papier mit einem Diagramm des Labyrinths und verwenden Sie das Diagramm, um die Suchstrategien der Maus zu analysieren sowie die Anzahl der Löcher zu bestimmen, die im Quadranten gegenüber dem Ziel untersucht wurden. Wenn die Maus in das Zielloch eindringt, bedecken Sie das Loch mit einem schweren, undurchsichtigen Bindemittel und schalten Sie den Ultraschall-Rauschbildner aus.
Wenn die Maus das Ziel nach fünf Minuten nicht betreten hat, korralieren Sie das Tier in das Zielloch. Dann lassen Sie die Maus für eine Minute ungestört in der Zielbox bleiben, um sicherzustellen, dass das Ultraschallrauschen ausgeschaltet wird. Dann kehren Sie das Tier in seinen Käfig zurück.
Wenn alle Mäuse getestet wurden, überprüfen Sie manuell ihre Aufnahme, um die Gesamtbewegung der Maus zu verfolgen, um die Anzahl der falschen Löcher zu bestimmen, die vor und nach dem Ziel gefunden wurden, sowie die Anzahl der Löcher vom Zielloch bis zum ersten untersuchten Loch und jedes bemerkenswerte Pflegeverhalten. Für exploratives Verhalten Damsel in Distress Testing, legen Sie eine geschlossene und leere Stresskammer in das Zentrum einer Empathie-Arena und beginnen Sie mit der Aufnahme mit der abgehängten Kamera. Legen Sie eine männliche Maus in der linken unteren Ecke in der Arena für 30 Sekunden vorsichtig unter einen Becher.
Entfernen Sie dann die Tasse über einen String-Mechanismus und lassen Sie die Maus für 10 Minuten zu erkunden, wobei Sie darauf achten, während der Aufnahme adennn a-view zu bleiben. Am Ende der Explorationsphase bewegen Sie die Maus aus der Arena für fünf Minuten in einen Haltekäfig und stoppen und speichern Sie die Aufnahme. Für soziale Reaktionsfähigkeit Damsel in Distress Testing, vorsichtig manuell eine weibliche Maus zurückhalten und senken Sie die Maus in eine Rückhaltekammer.
Schließen Sie das offene Ende der Kammer hinter der Maus und bestätigen Sie, dass die Maus nicht umdrehen kann. Beginnen Sie mit der Aufnahme mit der aufgehängten Kamera und platzieren Sie die Rückhaltekammer in der Mitte der Arena. Lassen Sie das Tier für 10 Minuten zu akklimatisieren, wobei darauf geachtet wird, adennn aus dem Sichtfeld zu bleiben.
Dann übertrage die männliche Maus für 10 Sekunden die männliche Maus aus dem Haltebereich zurück in die Empathie-Arena und erlaube der männlichen Maus weitere fünf Minuten, um die Arena zu erkunden und dabei darauf zu achten, ablöse dich aus dem Sichtfeld zu halten. Am Ende der Explorationsphase halten Sie an und speichern Sie die Videodatei und geben Sie beide Mäuse in ihre Käfige zurück. Dann ersetzen Sie die Maisbettung und desinsieren Sie sowohl die Arena als auch die Spannungskammer mit 70% Ethanol.
Um die Daten zu analysieren, öffnen Sie die Videodatei in der entsprechenden Tracking-Software und platzieren Sie ein transparentes Blatt über dem Bildschirm. Umreißen Sie den Platz der Arena mit einem Marker und teilen Sie den Arenaplatz in neun gleiche Fächer. Überprüfen Sie die Videodaten für die ersten fünf Minuten der ersten Sondierungsmaßnahme, die die Anzahl der gekreuzten Fächer, die Zeit, die im Mittleren Quadrat der Arena verbracht wird, die Anzahl der Graben- und Pflegeepisoden und die Anzahl der Male, mit denen die Maus die leere Mittelhaltekammer berührt.
Überprüfen Sie dann die Videodaten für die fünf Minuten der Messung der sozialen Reaktionsfähigkeit unmittelbar nachdem das Männchen wieder in die Arena eingeführt wird, wobei das gefangene Weibchen die gleichen Daten aufzeichnet wie bei der ersten sondierungsfähigen Maßnahme, aber indem Sie die Häufigkeit hinzufügen, mit der die männliche Maus die Nasen mit der gefangenen weiblichen Maus berührt hat. Wenn Barnes Maze trainierte Neoonate als Erwachsene in einer einzigen Langzeitstudie laufen, haben die mit Ethanol injizierten Mäuse es schwerer, sich daran zu erinnern, wo sich das Zielloch befand, als injizierte Kontrolltiere mit Einer Saline. Ethanol behandelte Mäuse erforschen auch deutlich mehr Löcher im gegenüberliegenden Quadranten vom Ziel, was darauf hindeutet, dass sich die richtige allgemeine räumliche Position nicht mehr merken und eine sequenzielle Lochsuche in ringförmiger Weise verwendet wird, bis das Loch gefunden ist.
Im Damsel in Distress-Modell kreuzen ältere Mäuse mehr Quadrate als jüngere Mäuse. In Gegenwart eines gefangenen Weibchens verbringen männliche Mäuse beider Altersgruppen jedoch weniger Zeit damit, die Arena zu erkunden. Junge Männchen verbringen mehr Zeit damit, während ihrer Zeit in der Arena in Gegenwart einer gefangenen weiblichen Maus zu graben, als wenn allein Angst oder pro-soziales Verhalten gegenüber dem gefangenen Weibchen suggeriert.
Im Gegensatz dazu berühren männliche Mäuse die Röhre mit dem gefangenen Weibchen und initiieren den gefangenen weiblichen Kontakt deutlich häufiger als Erwachsene als Als Jugendliche. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, die Bedingungen zwischen und innerhalb der Versuche konstant zu halten, um sicherzustellen, dass die Umweltvariablen die Ergebnisse der Studie nicht verwirren. Nach der anfänglichen Verwendung dieser Verhaltenstests können dieselben Tiere zu verschiedenen Zeitpunkten während der Entwicklung erneut getestet werden, um Fragen zum Langzeitgedächtnis und möglichen Veränderungen im Sozialverhalten zu beantworten.
